天麻药材的炮制加工及含量测定方法
【技术领域】：
[0001] 本发明涉及天麻药材的炮制加工及含量测定方法，属于中药材加工的技术领域。
【背景技术】：
[0002] 天麻为多年生草本植物，分布于全国大部分地区。其干燥块茎亦称天麻，是一味常 用而较名贵的中药，临床多用于头痛眩晕、肢体麻木、小儿棍风、癒痛、抽摇、破伤风等症。天 麻的采收期一般在深秋或初冬，送时天麻已经停止生长，采收既便于收获和加工，还有利于 收获后及时栽培，同时此时问采收的天麻不仅产量高而且质量好。
[0003] 从天麻炮制历史沿革及现代炮制方法来看，记载较多的有切制、酒制、娘制、炒制 等。《全国中药炮制规范》和《中国药典》收载的炮制方法为切制法，目前市场上流通品种及 临床上应用的均为切制片。但是没有具体的表明如何加工成切制片，能提高产品中天麻素、 己利森巧等有效成分含量，也没有对药材中天麻素、己利森巧等有效成分检测，是药材质量 难W保证，进而影响疗效。
【发明内容】
：
[0004] 针对现有技术的不足，本发明提供一种天麻药材的炮制加工方法。技术方案如 下：
[0005] -种天麻药材的炮制加工方法，其特征在于，包含W下步骤：
[0006] 1)采收；选择深秋或初冬已停止生长的天麻药材，采收时避免损伤天麻体；
[0007] 2)加工；将采收后的天麻用清水洗净，置于蒸锅中隔水蒸8-15min，取出，稍瞭，切 片，敞开低温干燥，即得。
[0008] 进一步地，所述步骤2)中低温是指温度不高于6(TC。
[0009] 本发明还提供上述加工而成的天麻药材的含量测定方法，技术方案如下：
[0010] 天麻药材的含量测定方法，包含W下步骤：
[0011] 色谱条件：色谱柱为agilent Z0RBAX-C18(4. 6*150mm，5微米）；流动相为己 腊-0. 1%磯酸梯度洗脱；检测波长为270nm;进样量为IOy 1 ;柱温为35-45°C ;流速为 0. 8-1. 2血/min ;理论培板数W天麻素峰计不应低于5000 ;
[0012] 供试品溶液的制备；炮制后的天麻切片粉碎，过60目筛，精密称取天麻药材粉末 0.1 g ;加入50%己醇溶液25ml水，精密称定，加热回流2-4小时，放冷，用50%己醇溶液 补足减失重量，摇匀，滤过，取续滤液IOml,浓缩至近干，残渣加2%己腊溶液溶解并稀释至 IOml,摇匀，用0. 45微米微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液，即得；
[0013] 测定法；精密吸取供试品溶液IOul,注入液相色谱仪，进行检测。
[0014] 上述含量测定中，天麻药材含天麻素，不得少于0. 2%。
[0015] W下采用实验对本发明进一步进行说明：
[0016] 试验1、不同加工方法研究
[0017] 1.1收率考察
[0018] 选择采收后的天麻药材，洗净后分成3份样品，每份化g，分别采用不用的加工方 法，W收率为指标，考察不同加工方式的效率，结果如下表。
[001引表1不同加工方法
[0021] 结果可W看出，采用蒸天麻的加工方法，收率高于煮和直接切片。进一步考察有效 成分含量。
[0022] 1. 2天麻素含量测定
[0023] 1. 2. 1仪器与试剂
[0024] 仪器：日本甜IMADZU 20系列；LC-20AT四元梯度泉，DGU-20A在线脱气系统， S比-20A自动进样系统，CT0-20A柱温箱、SPD-M20A二极管阵列检测值AD);十万分子一电 子分析天平（德国赛多利斯股份有限公司）；KQ 3200E型超声波清洗器（昆山市超声仪器 有限公司）sKromasil 100-5C18 色谱柱（4. 6mmX150mm)。
[00巧]试剂；己腊（色谱纯，美国Fisher),甲酸（色谱级，国药集团化学试剂有限公 司）；娃哈哈纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）。
[0026] 参考化合物；天麻素对照品（供含量测定用，批号0807-9702,购自中国药品生物 制品检定所），己利森巧B对照品、己利森巧E对照品、己利森巧对照品均为自制（经HPLC 法按面积归一化法测定，含量> 98% )。
[0027] 1. 2. 2药材来源
[0028] 来源于安徽大别山的鲜天麻，按试验1的不同方法加工成不同炮制品。
[0029] 1. 2. 3实验方法
[0030] 供试品制备；精密称定天麻各炮制样品粉末0. 5g，置于50血容量瓶中，加入50% 甲醇超声提取30min，冷却定容至刻度，过0. 45 U m微孔滤膜，即得。
[0031] 色谱条件：Kromasi 1 100-5C18 色谱柱（4. 6 X 150mm)，流动相 A 为 0. 05% 甲酸， B 为己腊；梯度洗脱；0-8min 2%B，8-21min 2%-8%B，21-30min 8%-12%B，30-47min 12% -25% B ;检测波长 270nm ;流速 I. 0血? min I ;柱温 35°C。
[0032] I. 2. 4实验结果
[003引对3个样品进行含量测定，计算各成分的含量，结果见表2。
[0034] 表2含量测定结果
[0035]
[0036] 结果表明，天麻蒸、煮后，饮片重天麻素等含量得到了提高。综合收率考察结果，因 此选择将采收后的天麻用清水洗净，置于蒸锅中隔水蒸8-15min后稍瞭切片，来对药材进 行加工。
[0037] 试验2、天麻饮片含量测定方法学研究
[0038] 2. 1线性关系考察：精密称取对居基苯甲醇对照品12. 70mg置25ml量瓶中，加 50%甲醇溶解并稀释到刻度，得储备液（1);精密称取对居基苯甲醒对照品16. 2mg置50ml 量瓶中，加50%甲醇溶解并稀释到刻度，得储备液（2);再精密称取天麻素16. 07mg，己利森 巧23. 84mg置于同一量瓶中，再分别精密吸取储备液（1) 5ml储备液（2) 2. 5ml置该量瓶中， 再加2%己腊稀释到刻度，得混合对照品溶液（1);精密量取混合对照品溶液（l)5ml置量瓶 中，加2 %己腊稀释到刻度，得混合对照品溶液（2)，依次等比稀释，分别得系列对照品溶液 (3)、（4)和（5);分别精密吸取前述混合对照品溶液IOy 1，注入色谱仪中，测定，W进样浓 度为横坐标（X)，峰面积为纵坐标（y)，计算回归方程。结果表明在〇.3214mg~0.03214 Ug 范围内，天麻素线性关系良好。
[0039] 2. 2重复性试验；取同一批次的天麻样品，1，1. 5, 2. 0称量，每组3份，精密称定，制 备供试品溶液，分别测定，计算得天麻素、对居基苯甲醇、对居基苯甲醒、己利森巧的RSD分 别为2. 71%、0. 82%、7. 56%、0. 71%。说明重复性良好。见表3。
[0040] 表3重复性实验结果
[0042] 2. 3精密度试验；取同一供试品溶液10 U以连续进样6次，测定各指标成分峰面 积，计算得天麻素、对居基苯甲醇、对居基苯甲醒、己利森巧的RSD分别为0. 83%、0. 93%、 3.02%、0.56%。见表 4。
[0043] 表4精密度实验结果
[0045] 2. 4回收率试验；精密称取已知含量的天麻样品粉末，分别精密加入天麻素、对 居基苯甲醇、对居基苯甲醒、己利森巧4种被测成分对照品适量，制备供试品溶液，测定 得天麻素回收率为100. 65 %、对居基苯甲醇回收率为99. 54%、对居基苯甲醒回