一种壳交联的双载药胶束及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及生物医药材料技术领域，具体地说，涉及一种壳交联的双载药胶束及 其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002]目前，在众多的药物载体中，聚合物胶束因其核-壳的纳米结构、优良的生物相容 性、生物可降解性及可进一步功能修饰等优点而受到人们广泛的关注。此外，为了克服肿瘤 细胞对化疗药物的耐药性，提高化疗效果，基于纳米材料为载体的多药传递系统的概念被 提了出来，其一方面可降低毒性提高疗效，另一方面可克服临床化疗中的耐药性问题。 [0003]目前，聚合物胶束主要以非共价键方式载药，虽然此方法制备时较为简单，但是聚 合物与药物分子之间的相互作用力较弱且结合可逆，所以较低的药物包封率和较差的胶束 稳定性是不可避免的。为了克服上述问题，以共价键载药的方式被开发出来。但是涉及到多 种药物负载时体系的合成很复杂繁琐，具有相当大的难度。
[0004] 中国专利文献CN201210199661.2，公开日2012.10.24，公开了一种温度和pH敏感 性的壳交联聚合物胶束的制备方法，其通过可逆-加成断裂链转移聚合法合成一种具有温 度和PH敏感性的两嵌段共聚物，再利用小分子二醛或二酸对自组装形成的聚合物胶束的壳 层结构进行部分交联，该方法所制备的两嵌段共聚物具有功能性强、分子量分布窄的优点， 其利用小分子交联剂对胶束壳层结构进行部分交联，在保证聚合物胶束稳定的前提下，制 备方法具有可行性强、操作简便、可使胶束重复利用等特点。中国专利文献 〇呢01410162228.0，公开日2015.10.28，公开了一种治疗肿瘤的包载紫杉醇的聚合物胶束 及其制备方法，该发明采用薄膜分散法制备紫杉醇PEG-PLA/VitaminE-TPGS混合胶束，以 PEG-PLA和VitaminE-TPGS两种高分子材料组成的混合胶束为载体，将紫杉醇包载在混合胶 束的疏水内核中，制得的紫杉醇PEG-PLA/VitaminE-TPGS混合胶束能有效地增加紫杉醇的 溶解度，显著提高胶束系统对紫杉醇的载药量，最高可达到35% (w/w)，混合胶束体系中 VitaminE-TPGS具有的抑制P-gp外排的生物功能，起到高效逆转肿瘤多药耐药以提高对肿 瘤的治疗作用。
[0005] 然而目前关于使用非共价键方式包埋DOX于胶束疏水核中，以Pt(IV)抗癌药物为 交联剂共价交联胶束亲水壳所构建的壳交联双载药胶束还未见报道。而该种双载药胶束在 恶性肿瘤的复合化疗中具备广阔的应用前景。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种壳交联的双载药胶束。
[0007] 本发明的再一的目的是，提供所述壳交联的双载药胶束的制备方法。
[0008] 本发明的另一的目的是，提供所述壳交联的双载药胶束的用途。
[0009] 为实现上述第一目的，本发明采取的技术方案是：
[0010] -种壳交联的双载药胶束，其是由以下方法制备得到的：
[0011] (1)以带有羟基和溴基团的双官能团分子HBMP(2-溴异丁酸乙二醇酯）为引发剂， CL单体为底物，采用开环聚合法，制备得到分子量分布< 1.3的PCL(聚己内酯)链段材料，其 一端带有溴基团；
[0012] (2)以步骤（1)所得的PCL为大分子引发剂，通过ATRP聚合AzPMA(甲基丙烯酸叠氮 丙醇酯）和OEGMA单体，得到分子量分布< 1.3的两亲性嵌段共聚物PCL-b-P(0EGMA-c〇-AzPMA)；
[0013] (3)将步骤（2)所得的两亲性嵌段共聚物PCL-b-P (OEGMA-co-AzPMA)和DOX溶于 DMS0/DMF(二甲基亚砜/二甲基甲酰胺）的混合溶剂中，再在剧烈搅拌下以0.08-0.10mL/s滴 加去离子水，自组装形成胶束并实现对DOX的负载，其中DMSO和DMF体积比为1:1;
[0014] (4)在步骤(3)所得的溶液中加入Pt(IV)前药分子、硫酸铜、维C钠，在氮气保护下 室温反应，负载上第二种药物并将胶束的亲水壳层交联，未负载的药物分子通过透析除去。
[0015] 作为本发明的一个优选例，步骤(1)中以辛酸亚锡为催化剂，用量为CL单体质量的 0.5-1.5 %，聚合温度125-135°C，反应时间4-7小时。更优选地，所述辛酸亚锡用量为CL单体 质量的0.9-1.2%，聚合温度130°C，反应时间5小时。
[0016] 作为本发明的另一优选例，步骤(3)中所述去离子水滴加量为有机溶剂量的0.9-1.2倍。更优选地，步骤(3)中所述去离子水滴加量与有机溶剂量相同。
[0017] 作为本发明的一种【具体实施方式】，步骤(2)中ATRP聚合反应温度为65-75°C，反应 时间为IO-Hh。
[0018]作为本发明的一种【具体实施方式】，步骤(4)反应时间为22-25h。
[0019] 为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：
[0020] -种壳交联的双载药胶束的制备方法，包括以下步骤：
[0021] (1)以带有羟基和溴基团的双官能团分子HBMP(2-溴异丁酸乙二醇酯）为引发剂， CL单体为底物，采用开环聚合法，制备得到分子量分布< 1.3的PCL(聚己内酯)链段材料，其 一端带有溴基团；
[0022] (2)以步骤（1)所得的PCL为大分子引发剂，通过ATRP聚合AzPMA(甲基丙烯酸叠氮 丙醇酯）和OEGMA单体，得到分子量分布< 1.3的两亲性嵌段共聚物PCL-b-P(0EGMA-c〇-AzPMA)；
[0023] (3)将步骤（2)所得的两亲性嵌段共聚物PCL-b-P(OEGMA-co-AzPMA)和DOX溶于 DMS0/DMF(二甲基亚砜/二甲基甲酰胺）的混合溶剂中，再在剧烈搅拌下以0.08-0.10mL/s滴 加去离子水，自组装形成胶束并实现对DOX的负载，其中DMSO和DMF体积比为1:1;
[0024] (4)在步骤(3)所得的溶液中加入Pt(IV)前药分子、硫酸铜、维C钠，在氮气保护下 室温反应，负载上第二种药物并将胶束的亲水壳层交联，未负载的药物分子通过透析除去。
[0025] 作为本发明的一个优选例，步骤(1)中以辛酸亚锡为催化剂，用量为CL单体质量的 0.5-1.5 %，聚合温度125-135°C，反应时间4-7小时。更优选地，所述辛酸亚锡用量为CL单体 质量的0.9-1.2%，聚合温度130°C，反应时间5小时。
[0026] 作为本发明的另一优选例，步骤(3)中所述去离子水滴加量为有机溶剂量的0.9-1.2倍。更优选地，步骤(3)中所述去离子水滴加量与有机溶剂量相同。
[0027]作为本发明的一种【具体实施方式】，步骤(2)中ATRP聚合反应温度为65-75°C，反应 时间为IO-Hh。
[0028] 作为本发明的一种【具体实施方式】，步骤(4)反应时间为22_25h。
[0029] 为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：
[0030] 如上任一所述壳交联的双载药胶束在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0031] 本发明优点在于：
[0032] 1、本发明通过开环聚合和ATRP聚合得到两亲性嵌段共聚物PCL-b-P( OEGMA-C0-AzPMA)，并以此为药物载体，通过非共价键方式包埋DOX于胶束疏水核中，而Pt(IV)则以交 联剂被共价交联到胶束亲水壳中，制备了一种新型的壳交联双载药胶束，实现了两种药物 的同时负载，具有复合治疗的功能。
[0033] 2、本发明选用了合适的引发剂、催化剂等，且用量、反应温度和时间等参数设置恰 当，制备得到的聚合物收率高，分子量分布窄，且在胶束的形成过程中，选用了合适的有机 溶剂，水的滴加速度和用量等参数设置恰当，确保了纳米胶束能够成功自组装，且胶束大小 均一，药物负载量大，稳定性好，可防止药物突释，累积释放百分率很高，抗癌效果和协同作 用十分显著，取得了预料不到的技术效果。
【附图说明】
[0034]附图1是本发明壳交联的双载药胶束的制备流程图。
[0035] 附图2是PCL凝胶渗透图谱。
[0036] 附图 3是PCL-b-P(OEGMA-co-AzPMA)凝胶渗透图谱。
[0037]附图4是壳交联的双载药胶束的红外图谱。
[0038] 附图5是壳交联的双载药胶束的透射电镜图。
[0039] 附图6是壳交联的双载药胶束的动态光散射图谱。
[0040] 附图7是壳交联的双载药胶束的热失重分析图。
[0041]附图8是壳交联的双载药胶束的体外药物释放图。A)铂类药物和B)阿霉素在不同 体外模拟条件下的药物释放曲线。（·)ρΗ 7.4，（#)pH 5.5，（A)pH 7.4，VcNa的浓度为 5.5，VcNa的浓度为5mM。
[0042]附图9是纯阿霉素、纯顺铂、单载药和壳交联双载药胶束在不同药物浓度和作用时 间下对A357和HeLa癌细胞的毒性实验结果。每一簇立体柱从左至右依次代表Pt、D0X、 Diblock-Pt、Diblock-DOX、Diblock-DOX-Pt。
【具体实施方式】