具有提高免疫力功能的益生菌组合物及其制备方法与应用
【专利说明】具有提高免疫力功能的益生菌组合物及其制备方法与应用 【技术领域】
[0001] 本发明属于本发明属于生物医药领域，具体涉及一种具有提高免疫力功能的益生 菌组合物及其制备方法与应用。 【【背景技术】】
[0002] 免疫力是人体自身的一种主动防御机制，对维持生理和生命活动具有十分重要的 意义。维系人体内免疫功能的免疫细胞有T细胞、B细胞、嗜中性白血球、巨噬细胞，免疫力不 足或免疫力过高，都会给自身带来不利影响，主要表现为食欲不振、营养不良、精神恍惚、体 质虚弱、浑身乏力、睡眠失常等。现代社会随着保健意识的提高，人们对防治"未病"也有更 高要求。但是由于现代社会节奏快，人们大多不能做到每天坚持锻炼来增强免疫力。因此， 寻求更安全、更有效能增强免疫力的方法，对人类的健康就显得尤为重要。 【
【发明内容】
】
[0003] 本发明的目的本发明的目的在于提供一种具有提高免疫力功能的益生菌组合物， 该组合物能够有效提高机体免疫力，促进人体健康。
[0004] 本发明的另一目的在于提供上述具有提高免疫力功能的益生菌组合物的制备方 法。
[0005] 本发明的再一目的在于提供上述具有提高免疫力功能的益生菌组合物的应用。
[0006] 为实现上述目的，本发明提供的具有提高免疫力功能的益生菌组合物，包含如下 按质量百分比计的组分:益生菌干粉60~70%，黄芪提取物粉20~30%，枸杞提取物粉10~ 20% 〇
[0007] 优选的，所述的具有提高免疫力功能的益生菌组合物包含如下按质量百分比计的 组分:益生菌干粉70 %，黄芪提取物粉20 %，枸杞提取物粉10 %。
[0008] 进一步地，所述的益生菌干粉由由婴儿双歧杆菌、乳杆菌两种按1:1的比例组成。
[0009] 本发明还提供一种的具有提高免疫力功能的益生菌组合物的制备方法，它包含如 下步骤：
[0010] (1)选料步骤为:选取含有婴儿双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、凝结芽孢杆菌的益生菌干 粉，优质黄苗提取物粉、枸杞提取物粉；
[0011] (2)过筛步骤为:将选好的益生菌干粉、黄芪提取物粉、枸杞提取物粉分别过80~ 100目筛；
[0012] (3)配料步骤为:将过筛后的益生菌干粉、黄芪提取物粉、枸杞提取物粉称量备用； 所述各组分质量百分比为益生菌干粉60~70%，黄芪提取物粉20~30%，枸杞提取物粉10 ~20% ;
[0013] (4)混合步骤为：将配好的原料于三维混合机中混合至色泽均匀一致，无色差，即 得到具有提高免疫力功能的益生菌组合物。
[0014] 所述的益生菌干粉可以通过购买上市的原料或自行摸索制备工艺的方式获得。本 发明对所选的益生菌干粉的制备工艺进行了优化;所述的益生菌干粉制备方法步骤如下：
[0015] 1)分别将婴儿双歧杆菌、乳杆菌经培养基活化后，接种于发酵培养基中，振荡培 养，使菌体浓度达到对数生长期0.5~1.0 X 109cfu/ml;
[0016] 2)将步骤1)中各菌种发酵液混合后离心，弃上清，菌体沉淀洗涤，离心，灭菌，得菌 泥；
[0017] 3)配制干粉保护剂;所述的干粉保护剂的配方组成为:β-环状糊精10g、乳糖2-5g、 海藻糖〇 · 5-2g、酵母膏0 · 5-2g、维生素EO · 05-0 · lg、蒸馏水IOOmL;
[0018] 4)将干粉保护剂和菌泥混合，进行成膜反应，然后，将混合物预冻，再冷冻干燥，制 成具有包埋层的活性益生菌干粉。
[0019]本发明还提供一种具有提尚免疫力功能的益生菌组合物在制备提尚免疫力食品/ 保健品中的应用。
[0020]优选地，所述具有提高免疫力功能的益生菌组合物使用在粉剂、片剂、胶囊剂、颗 粒、冲剂、果冻、饮料、乳制品、酸奶或小点心烘烤品中；所述保健品为粉剂、片剂、胶囊剂、液 体剂、悬浮液、乳剂、口服液、果冻或冲剂中任一种。
[0021 ]上述具有提尚免疫力功能的益生菌组合物在制备提尚免疫力食品/保健品中的应 用，该组合物可以加一种或多种药学上可接受的载体制成片剂、胶囊、颗粒、口服液等剂型。 [0022]本发明还提供一种提尚免疫力食品/保健品，它包含上述具有提尚免疫力功能的 益生菌组合物。
[0023] 黄芪能增强和调节机体免疫功能，对干扰素系统有促进作用，可提高机体的抗病 力；对流感病毒等多种病毒所致细胞病变有轻度抑制作用，对流感病毒感染小鼠有保护作 用;有较广泛的抗菌作用。枸杞子含有18种氨基酸，其中8种氨基酸是人体必需氨基酸。矿物 质除含有钙，磷，铁等外，还含有一定数量的有机锗。含维生素也较全面和丰富，包括维生素 Bl的，维生素 B2，C，尼古酸和胡萝卜素等，具有增强免疫功能，对人体健康极其有益。两者均 具有毒副作用小、材料容易获得且可长期服用等优势。
[0024] 促进益生菌在肠道中的增殖，同时抑制有害菌生长，继而发挥对机体多种重要的 生理作用，人们己有着切身的体会。特别是益生菌的增强免疫力作用己被广泛认同：正常人 消化道粘膜的表面积有300m 2,这与3/4个篮球场的面积相当，消化道因相关的淋巴组织 (GALT)作用而被变为人体内最大的免疫器官。人体胃肠道容纳大约IO14个微生物，人体自身 的细胞有1〇 13个，占微生物细胞的10%。每米小肠内存在1〇1()个可产生免疫球蛋白的细胞， 约占人体所有产生免疫球蛋白细胞的80%。因而消化道不同部位的免疫细胞可激发多种免 疫反应，部分乳杆菌和双歧杆菌属细菌在不同程度上被认为是免疫刺激剂或"生物反应调 节剂"。因此，益生菌制剂可以作为一种提高免疫力的新方法，并且具有来源安全、效果显 著、无任何毒副作用等优点。
[0025] 传统上中药的使用，绝大多数以方剂的形式通过口服吸收而发挥作用，中药中的 有效成分在进入肠道之后不可避免地与肠道菌群发生关联，某些成分经相应细菌的作用发 生生物转化后被吸收，因此，体内环境中肠道菌群是完成中药有效成分生物转化的重要因 素之一。有益菌和中药是两类国际公认的益生物质，两者在基本理论观点上极为相似、一脉 相通;在作用机理上显示极大的统一性;在具体使用过程中也能完美互补，共同发挥优势。 因而中药对于有益菌而言，是绝佳的益生元。本发明将益生菌与中药完美结合，找出了具有 明显提高免疫力效果的益生菌组合物配方。
[0026]本发明的有益效果在于:本发明的益生菌组合物以益生菌干粉、黄芪提取物粉、枸 杞提取物粉为原料直接投料，按重量科学配比而成。其含有维生素K，维生素B12、吡哆醇、生 物素、叶酸、烟酸和硫胺素等营养成分，制备工艺简单，避免了提取时造成的药物损失和由 于原药材质量差异造成的不同产品质量差异较大的缺点，使产品纯度更高，杂质少，安全性 更高，且不同批次间质量差异小，质量更均匀稳定。通过传统中药与益生菌合理配伍用药， 经药学实验证明，药效优于单独使用任何一种原料，各有效成分呈协同作用，具有提高免疫 力、促进机体健康等功效。 【【具体实施方式】】
[0027]下面结合实施例对本发明做进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0028] 实施例1
[0029] (1)选料
[0030] 制备益生菌干粉：
[0031] 1)分别将婴儿双歧杆菌、乳杆菌经培养基活化后，接种于发酵培养基中，振荡培 养，使菌体浓度达到对数生长期0.5~1.0 X 109cfu/ml;
[0032] 双歧杆菌种子液的制备:取出菌种保藏管，用双歧杆菌固体培养基划平板进行复 苏，37度厌氧培养72小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升双歧杆菌培养基中，在培养箱 中37度厌氧培养48小时。种子采用5 %的接种量，接种至IOL大三角瓶中（装液量为9.5L)，37 度厌氧培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过10亿/毫升，即可作为双歧杆菌液体菌 种接种。其中所述的双歧杆菌培养基:蛋白胨5. Og/L，酵母提取物5g/L，牛肉膏5. Og/L，胰蛋 白胨10.0 g/L，葡萄糖10.0 g/L，醋酸钠5. Og/L，柠檬酸二铵2. Og/L，吐温-801.0ml/L，硫酸镁 〇. lg/L，硫酸锌0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，固体培养基中加入琼脂2 %。培养基灭菌的条件 为:0.10-(hl5MPa，12rC 灭菌 30 分钟。
[0033] 乳杆菌种子液的制备:取出菌种保藏管，用MRS固体培养基划平板进行复苏，37度 厌氧培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种250毫升MRS培养基中，在培养箱中37度厌氧 培养24小时。种子采用5%的接种量，接种至10L大三角瓶中（装液量为9L)，37度厌氧培养 20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过100亿/毫升，即可作为乳杆菌液体菌种接种。其中 所述的MRS培养基：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，牛肉膏10g/L，葡萄糖20g/L，醋酸钠5g/ U柠檬酸二铵2g/L，吐温-801ml/L，硫酸镁0.6g/L，硫酸锰0.05g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂 20g/L，碳酸钙20g/L，固体培养基中加入琼脂2%。其中所述的乳酸菌种子培养基：葡萄糖 5%，蛋白胨1.5%，牛肉膏0.75%，氯化钠0.1%，硫酸锰0.001%，硫酸镁0.02%，醋酸钠 0.05 %，碳酸钙1 %，pH6.0。各培养基灭菌的条件为:0.10-0.15MPa，121°C灭菌30分钟。 [0034]黄芪提取物粉为豆科植物蒙古黄芪的根提取物。多年生草本，高50-100厘米。主根 肥厚，木质，常分枝，灰白色。茎直立，上部多分枝，有细棱，被白色柔毛。多年生草本，高50-100厘米。产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地。黄芪的药用迄今已有2000多年的历史，具有 增强免疫力，增强能量，抗疲劳，抗突变，保肝，抑制破骨细胞的作用。黄芪多糖具有降血脂， 即降低胆固醇和甘油三酯、升高高密度脂蛋白的作用;能够预防和治疗心脑血管疾病，如动 脉粥样硬化、冠状动脉病变、周围血管病变以及高脂血症等。另有研究表明，12.5%的黄芪 对双歧杆菌有明显的促进生长作用。
[0035] 枸杞提取物粉为是茄科枸杞属的枸杞果实提取物。多分枝灌木植物，国内外均有 分布。枸杞全身都是宝，枸杞子富含枸杞蛋白多糖、维生素C、磷、铁等多种营养成分。枸杞果 皮中富含的有效成分之一一一枸杞多糖(LBP)对骨髓造血功能和各项细胞免疫指标有明显 的增强作用，能明显提高机体血液、肝和肌组织的超氧化歧化酶(SOD)的活性含量，从而有 利于活性氧的清除，延缓衰老和抗疲劳;增加抗体形成细胞的数量，提高抗体效果。
[0036] 本发明中使用的黄芪提取物粉、枸杞提取物粉为中药原料经水提后的产物，其均 已在