人体维生素含量水平基因检测试剂盒的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及基因检测，具体涉及人体维生素基因检测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 维生素（vitamin)是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食物中获得的一类 微量有机物质。它的种类很多，化学结构各不相同，大多数是某些酶的辅酶(或辅基)的组成 成分，是维持机体正常生长(生长、健康、繁殖和生产机能）必不可缺的化合物，在体内起催 化作用，促进主要营养素(蛋白质、脂肪、碳水化合物等）的合成和降解，从而控制代谢。
[0003] 本发明主要涉及维生素 B6、B12、维生素 D和维生素 E。
[0004] 维生素 B6 ;帮助分解蛋白质，脂肪和碳水化合物。它有抑制呕吐、促进发育等功 能，缺少它会引起呕吐、抽筋等症状。是许多种有关氨基酸代谢酶的辅酶，故对氨基酸代谢 十分重要。
[0005] 维生素 B12,即抗恶性贫血维生素，又称钻胺素，含有金属元素钻，是维生素中唯 一含有金属元素的，抗脂肪肝，促进维生素 A在肝中的胆存；促进细胞发育成熟和机体代 谢。
[0006] 维生素 D于1926年由化学家卡尔首先从鱼肝油中提取。维生素 D的生理功能是 帮助人体吸收磯和巧，是造骨的必需原料，因此缺少维生素 D会得俩倭症。人体中维生素 D 的合成跟晒太阳有关，因此，适当地光照有利健康。
[0007] 维生素 E于1922年由美利坚合众国化学家伊万斯在麦芽油中发现并提取，本世纪 40年代已能人工合成。维生素 E是人体内优良的抗氧化剂，人体缺少它，男女都不能生育， 严重者会患肌肉萎缩症、神经麻木症等。
[0008] 维生素是小分子物质，人体本身并不能合成，主要靠外界摄入。但是其摄入和代谢 水平却跟人体自身基因息息相关，了解基因对其的影响，可W帮助我们适当的增加或减少 饮食当中的维生素，从而维持体内所需维生素的正常水平。
【发明内容】
[0009] 有鉴于此，本发明提供了一种维生素水平基因检测试剂盒，该试剂盒对受测者的 相关基因进行检测，分析得到其体内维生素水平，且PCR扩增反应在同一台PCR仪上同步进 行并具备检测的高效性、特异性。
[0010] 一种维生素水平基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试 剂包括： (1)针对4个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP rs2282679的引物组： 5' -CTTAATTATCTCACAA-3' 5> -TAAAAAATACCTGGCTG-3> 5' -GAGACGGGGTTTCACCATG-3' 5> -CTTCAACGAGTTTATG-3' 针对SNP rs964184的引物组： 5> -GATGTACTGTTTTCCTC-3> 5' -GAAAAATGACAATAAACAGATC-3, 5' -CAGCTTTGCCCAAATGTC-3' 5' -GCACTGGCCTCTGTATTG-3' 针对SNP rs4654748的引物组： 5' -GTGTGGGGTAATGTCC-3' 5> -CATTTTMTTTTGGGA-3' 5' -CAGATTCAAACAATATGACC-3' 5' -GAAGAGCATCGGTGGAG-3, 针对SNP rs492602的引物组： 5' -TTCCCCAGGCGGCCTATC-3' 5' -GTGGACGATCAATGCA-3' 5' -TCCTCCATCCAGTCGTTC-3' 5' -CATGGCCCACTTCATCCTC-3' (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0011] 本发明提供的维生素水平基因检测试剂盒的有益效果是：通过PCR引物的设计使 多个PCR扩增反应在同一台PCR仪上同步进行，对受测者的相关基因进行检测，并实现检测 的高效性、特异性，分析得到其维生素水平的遗传因素，评估相关的风险因素，从而为受测 者获得一个合适的饮食管理方案，指导日常生活习惯，采取相应的策略避免对其无效甚至 是有害的方法。
【附图说明】
[0012] 图1是反应产物琼脂糖凝胶电泳图。
【具体实施方式】
[0013] 维生素基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂包括： (1)针对4个基因SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP rs2282679的引物组： 5' -CTTAATTATCTCACAA-3' 5> -TAAAAAATACCTGGCTG-3> 5' -GAGACGGGGTTTCACCATG-3' 5> -CTTCAACGAGTTTATG-3' 针对SNP rs964184的引物组： 5> -GATGTACTGTTTTCCTC-3> 5' -GAAAAATGACAATAAACAGATC-3, 5' -CAGCTTTGCCCAAATGTC-3' 5' -GCACTGGCCTCTGTATTG-3' 针对SNP rs4654748的引物组： 5' -GTGTGGGGTAATGTCC-3' 5> -CATTTTMTTTTGGGA-3' 5' -CAGATTCAAACAATATGACC-3' 5' -GAAGAGCATCGGTGGAG-3, 针对SNP rs492602的引物组： 5' -TTCCCCAGGCGGCCTATC-3' 5' -GTGGACGATCAATGCA-3' 5' -TCCTCCATCCAGTCGTTC-3' 5' -CATGGCCCACTTCATCCTC-3' (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0014] 下面将结合实施例对本发明提供的方法予W进一步的说明。
[0015] 本实施例对测试者采用维生素水平基因检测试剂盒同时检测4个基因的SNP多 态位点，并根据基因分型结果，分析得到其维生素水平的遗传因素，评估相关的风险因素， 从而为受测者获得一个合适的饮食管理方案，采取相应的策略避免对其无效甚至是有害的 方法。
[0016] 使用到的维生素水平基因检测试剂盒内试剂由W下组成： (1)针对4个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP rs2282679的引物组： 5' -CTTAATTATCTCACAA-3' 5> -TAAAAAATACCTGGCTG-3> 5' -GAGACGGGGTTTCACCATG-3' 5> -CTTCAACGAGTTTATG-3' 针对SNP rs964184的引物组： 5> -GATGTACTGTTTTCCTC-3> 5' -GAAAAATGACAATAAACAGATC-3, 5' -CAGCTTTGCCCAAATGTC-3' 5' -GCACTGGCCTCTGTATTG-3' 针对SNP rs4654748的引物组： 5' -GTGTGGGGTAATGTCC-3' 5> -CATTTTMTTTTGGGA-3' 5' -CAGATTCAAACAATATGACC-3' 5' -GAAGAGCATCGGTGGAG-3, 针对SNP rs492602的引物组： 5' -TTCCCCAGGCGGCCTATC-3' 5' -GTGGACGATCAATGCA-3' 5' -TCCTCCATCCAGTCGTTC-3' 5' -CATGGCCCACTTCATCCTC-3' (2)PCR扩增试剂；lOXPCR缓冲液，该PCR缓冲液为lOOmM Tris-肥1 p册.3,500mM KCl，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，该dNTPs混合物为Η磯酸鸟嘿岭脱氧核巧酸dGTP，Η磯 酸腺嘿岭脱氧核巧酸dATP，Η磯酸胸腺嚼巧脱氧核巧酸dTTP，Η磯酸胞嚼巧脱氧核巧酸 dCTP四种核巧酸，各组分浓度为2. 5mM ;5υ/μ 1热启动Taq酶。
[0017] (3)琼脂糖凝胶电泳分析试剂谅脂糖、TAE缓冲液、DM分子量标准、Goldview 染色液和DM上样缓冲液，该缓冲液W漠酪藍为指示剂稀释至IX后使用。
[0018] 使用上述维生素水平基因检测试剂盒按如下步骤进行检测： (