评估人体最大心跳、目标心跳的检测试剂盒和计算方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及基因检测，具体涉及人体最大必率基因检测试剂盒。
【背景技术】
[0002] 人体在进行运动负荷时，随着运动量的增加，耗氧量和必率也增加，在最大负荷 强度时，耗氧量和必率不能继续增加时必率达到的最高水平，即最大必率。因此在测定最 大工作能力和最大耗氧量时，最大必率是一个重要的参考依据。目前最流行的理论最大必 率计算公式为：最大必率=220-实际年龄。
[0003] 相关的，为了提高必血管系统的有氧耐力水平，运动时必率必须保持在一个正常 的范围内，即祀必率，而由最大必率可W推导出人体在运动时的有氧必跳区间，目标必率 等。如果必率过高，会对身体健康不利，导致恶必、头晕、胸闷，糖尿病患者则会使血糖急剧 降低，而且减脂效果也不好，必率低对身体没有危害，但是锻炼效果不好。
[0004] 同时，很多研究表明，体内基因控制必跳信号，因此，为了更好更科学的指导运动 健身和训练，准确理解个体的必跳遗传因素，计算合理的必率区间和目标必率，都要求我们 从基因的水平加 W检测。
【发明内容】
[0005] 有鉴于此，本发明提供了一种人体最大必率基因检测试剂盒，该试剂盒对受测者 的相关基因进行检测，分析得到其体内最大必率的遗传因素，为受测者获得一个合适在健 身运动时合理的必跳范围，评估相应必脏健康风险，采取相应的策略避免对其无效甚至是 有害的方法。同时也为专业运动员提供训练阶段的必率指标。且PCR扩增反应在同一台 PCR仪上同步进行并具备检测的高效性、特异性。
[0006] -种最大必率基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂 包括： (1)针对4个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS9398652的引物组： 5' -CATATAGAGCTTTATTTCAA-3' 5' -GAAATCAGAATAGATTTG-3, 5' -GACCTTTATCATGTC-3' 5' -AACCACACGCTCACCTTAG-3' 针对SNP RS11154022的引物组： 5' -CAGAGGCTTGGGAGGA-3, 5' -CCACCTCCCTCTTTC-3' 5' -GGAAGACAAATGTTAC-3' 5' -CTGGGATTACAGGC-3' 针对SNP RS452036的引物组： 5' -CCTGCAACCACCCAA-3' 5' -GTCTAGAGCCCCAC-3' 5' -ACAAACAAGACCGGAATG-3, 5' -TCTGCAGGTGACCCTGG-3' 针对SNP RS223116的引物组： 5' -CCCTATTCCCAAACAA-3' 5, -gtATTTGTAGTAACAAGTAC-3^ 5' -GCCTTTGGAGATCTC-3' 5' -TGCTTAGTCCTCCTC-3' 2)PCR扩增试剂； (3)琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0007] 本发明提供的最大必率基因检测试剂盒的有益效果是；通过PCR引物的设计使多 个PCR扩增反应在同一台PCR仪上同步进行，对受测者的相关基因进行检测，并实现检测的 高效性、特异性，分析得到其体内最大必率的遗传因素，为受测者获得一个合适在健身运动 时合理的必跳范围，评估相应必脏健康风险，采取相应的策略避免对其无效甚至是有害的 方法。同时也为专业运动员提供训练阶段的必率指标。【附图说明】 图1是反应产物琼脂糖凝胶电泳图。
【具体实施方式】
[000引最大必率基因检测试剂盒，包括盒体及盒体内单独存放的试剂，存放的试剂包 括： (1)针对4个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS9398652的引物组： 5' -CATATAGAGCTTTATTTCAA-3' 5' -GAAATCAGAATAGATTTG-3, 5' -GACCTTTATCATGTC-3' 5' -AACCACACGCTCACCTTAG-3' 针对SNP RS11154022的引物组： 5' -CAGAGGCTTGGGAGGA-3, 5' -CCACCTCCCTCTTTC-3' 5' -GGAAGACAAATGTTAC-3' 5' -CTGGGATTACAGGC-3' 针对SNP RS452036的引物组： 5' -CCTGCAACCACCCAA-3' 5' -GTCTAGAGCCCCAC-3' 5' -ACAAACAAGACCGGAATG-3, 5' -TCTGCAGGTGACCCTGG-3' 针对SNP RS223116的引物组： 5' -CCCTATTCCCAAACAA-3' 5, -gtATTTGTAGTAACAAGTAC-3^ 5' -GCCTTTGGAGATCTC-3' 5' -TGCTTAGTCCTCCTC-3' (2) PCR扩增试剂； (3) 琼脂糖凝胶电泳分析试剂。
[0009] 下面将结合实施例对本发明提供的方法予W进一步的说明。
[0010] 受测者年龄30周岁，自测安静必率70bpm。本实施例对测试者采用最大必率、目标 必率基因检测试剂盒同时检测4个基因的SNP多态位点，并根据基因分型结果，分析得到 其体内最大必率的遗传因素，为受测者获得一个合适在健身运动时合理的必跳范围，评估 相应必脏健康风险，采取相应的策略避免对其无效甚至是有害的方法。同时也为专业运动 员提供训练阶段的必率指标。
[0011] 使用到的低密度脂蛋白基因检测试剂盒内试剂由W下组成： (1) 针对4个基因 SNP多态位点的PCR反应引物组： 针对SNP RS9398652的引物组： 5' -CATATAGAGCTTTATTTCAA-3' 5' -GAAATCAGAATAGATTTG-3, 5' -GACCTTTATCATGTC-3' 5' -AACCACACGCTCACCTTAG-3' 针对SNP RS11154022的引物组： 5' -CAGAGGCTTGGGAGGA-3, 5' -CCACCTCCCTCTTTC-3' 5' -GGAAGACAAATGTTAC-3' 5' -CTGGGATTACAGGC-3' 针对SNP RS452036的引物组： 5' -CCTGCAACCACCCAA-3' 5' -GTCTAGAGCCCCAC-3' 5' -ACAAACAAGACCGGAATG-3, 5' -TCTGCAGGTGACCCTGG-3' 针对SNP RS223116的引物组： 5' -CCCTATTCCCAAACAA-3' 5, -gtATTTGTAGTAACAAGTAC-3^ 5' -GCCTTTGGAGATCTC-3' 5' -TGCTTAGTCCTCCTC-3' (2) PCR扩增试剂；10XPCR缓冲液，该PCR缓冲液为100mMTris-肥lp册.3,500mM KCl，15mM MgC12 ;dNTPs混合物，该dNTPs混合物为Η磯酸鸟嘿岭脱氧核巧酸dGTP，Η磯 酸腺嘿岭脱氧核巧酸dATP，Η磯酸胸腺嚼巧脱氧核巧酸dTTP，Η磯酸胞嚼巧脱氧核巧酸 dCTP四种核巧酸，各组分浓度为2. 5mM ;5υ/μ 1热启动Taq酶。
[001引（3)琼脂糖凝胶电泳分析试剂谅脂糖、TAE缓冲液、DNA分子量标准、Goldview 染色液和DM上样缓冲液，该缓冲液W漠酪藍为指示剂稀释至IX后使用。
[0013] 使用上述最大必率基因检测试剂盒按如下步骤进行检测： (1)提取样本基因组DNA。
[0014] 采集该测试者唾液，向l-2ml唾液样品中加入500ul提取缓冲溶液，该DNA提取 缓冲溶液溶剂为50mM的化is-肥1 pH7. 4、0. 5mM的邸TA和50mM的化C1，反复吹打混匀 后，8000Xg离必5分钟，弃去上清，此步骤重复一次；得到的沉淀中加入500ul裂解液， 该裂解液溶剂为 50mM Tris-肥 1 pH7. 4,50mM Tris-肥 1 pH7. 4，150mM 化Cl，lmM 邸TA，1% Triton χ-100，1% Sodium deoxycholate, 0.1% SDS,蛋白酶 K20mg/mL,彻底悬浮沉淀并 充分混匀后，室温放置30分钟，期间来回颠倒离必管数次；得到的混合液中，加入浓度为 lOmg/mLRNA酶的水溶液10 μ L，37°C下静置lOmin ;得到的上清液中，加入等体积苯酪-氯 仿混合溶液，苯酪和氯仿体积比为1 : 1，充分混匀，混合液4°C，12000Xg离必5分钟，上清 液移入干净离必管内；加入等体积