专利名称：天然全元有机生物肥料菌种的提纯复壮方法
技术领域：
本发明涉及菌种培育，特别是关于有机生物肥料菌种的提纯复壯方法。无机化学肥料问世以来，为农作物增产丰收作出了巨大贡献。但长期大量施用化肥，也产生了不少弊端。例如板结土壤、砂化土地、污染地下水，破坏食物链平衡；造成以食为天的人类新陈代谢机制紊乱等等。这种情况已引起人们的普遍关注与担忧。无机化肥工业成本不断升高，致使农业生产投入与产出越来越不合算，农民难以承受。利用人畜禽排泄物、城市生活垃圾和某些工业废料，进行工业化生产有机肥料，虽然已有一定研究成果和应用，但是，它不但生产成本高，而且还会产生二次污染，即便如此，这种有机肥在发展中国家，短期内还难以普及应用。由本人提出的天然全元有机生物肥料，是从大自然中采集活性菌种，提纯复壮。在培养过程中，将共生、联合固氮菌科学组合，引进硅酸盐菌、解磷菌、纤维菌，交合为不拮抗的有益菌群，液态扩培中鳌入硼、镁、硒、锌、铁、锰等有益于植物生长的微量元素。再使其和泥炭、钾磷膨化矿粉和糖坭吸附，它是一种全营养型有机肥料。集益菌接种、调理土壤、平衡电位、降解污染、抑制病毒、预防虫害於一身，达到土壤改良，培肥地力的总体目的；它集固氮、溶钾、解磷，供给微量元素和加速秫秆腐熟等功效於一身，解决了各种农作物发育、生长、结实全程营养料的供应；还能促进农作物的光合作用，提高光合效率。提高农产品内在品质和产量，具有节省投入，使用方便，增产增收，改善品质，涵养地力，改良土壤，平衡生态等特点。用它所生产的农作物产品，首季都能达到AA级绿色食品的标准。据5年间多点多品种试验表明增产优势在11--36％。土壤有机质季递增0.7--0.9个百分点。微生物总量达到每克耕层土3.8×1014。土壤逐渐走向活化。每亩地用量5--7公斤。生产此种天然全元有机生物肥料关键工序之一是菌种的提纯复壯方法。
本发明的目的是提供一种用于生产天然全元有机生物肥料的菌种的提纯复壯方法。
本发明涉及的菌种为微生物的固氮、溶一解磷、溶一解钾的功能，培养和生产褐球固氮菌(Azotobactr Macrocytogtnts)、巨大芽孢杆菌(BacillnsMtgatn-Oeriam解磷菌)、大荚膜芽孢杆菌(Bacillna Mactilagino-Sas解钾菌)的活性干品和碳源干品。将这些干品与天然的氮素有机质(如泥碳)和磷素、钾素高含量矿土和微量元素按一定比例进行工艺混合，这种微生物、微生物载体及矿质素和微量元素的混合体咳以制取天然全元有机生物肥料。
菌种的提纯复壮方法和步骤(一)组合菌种的培养将从库中购得。的菌种(斜面单株)，妥善保存。
实验室进行复壮扩培(平板、摇床)。
培养基〔1)、蛋白胨10g牛肉膏 10g氯化钠50g琼脂 18g磷酸二氢钾0.09g 0.2％嗅麝香草酚兰液 20ml蒸溜水1000ml方法先将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠溶解于蒸溜水中，校正PH(7.5)。加入琼脂，加热溶解、过滤。加入指示剂，分装10个烧瓶，120℃高温灭菌20分钟。每个烧瓶加入蔗糖1克，溶解并冷却至50℃，倾注平板，接种，培养。将每个平板划成12份，备用。
(2) 蛋白胨 5g 硝酸钾 2.5g磷酸亚铁 1g 硫酸镁 0.5g1∶40的豆浆1000ml等量制成12份，高温灭菌，分装(1)的1份，摇床培养，PH7.5。即获工业种子。
(二)工业发酵(培养基、增菌液前人没有的；)先将实验室扩培的一级菌种，进入二级发酵罐，培养至旺盛期，大约24小时。校正PH(7.5)，采用120目的生磷矿粉校正。
培养基(发酵液)蛋白胨 1公斤蔗糖 2公斤磷酸二氢钾 130g磷酸氢二钠 120g硫酸亚铁10g 七叶苷 100g1∶100的豆浆1000公斤煮沸灭菌，冷却至40℃，密封供氧旋动发酵。准备进行固态发酵。所述的固氮菌为褐球固氮菌(Azotobactr Macrocytogtnts)、解磷为巨大芽孢杆菌(Bacillns Mtgatn-Oeriam)、解钾菌为大荚膜芽孢杆菌(BacillnaMactilagino-Sas)这三种菌种由“中国农业科学研究院国家中心菌库“中国农业科学研究院南京土壤研究菌库”保藏，公众均能买到。
权利要求
1.一种天然全元有机生物肥料菌种的提纯复壯方法，起特征是将从库中购得固氮菌为褐球固氮菌(Azotobactr Macrocytogtnts)、解磷为巨大芽孢杆菌(Bacillns Mtgatn-Oeriam)、解钾菌为大荚膜芽孢杆菌(BacillnaMactilagino-Sas)的菌种(斜面单株)，按如下方法进行复壮扩培(平板、摇床)，培养基〔1〕、蛋白胨10g 牛肉膏 10g氯化钠50g 琼脂 18g磷酸二氢钾0.09g 0.2％嗅麝香草酚兰液 20ml蒸溜水1000ml方法先将牛肉膏、蛋白胨、氯化钠溶解于蒸溜水中，校正PH(7.5)，加入琼脂，加热溶解、过滤；加入指示剂，分装10个烧瓶，120℃高温灭菌20分钟；每个烧瓶加入蔗糖1克，溶解并冷却至50℃，倾注平板，接种，培养；将每个平板划成12份，备用。
2.按照权利要求1所述的方法，其特征是，蛋白胨5g 硝酸钾2.5g磷酸亚铁 1g 硫酸镁0.5g1∶40的豆浆 1000ml等量制成12份，高温灭菌，分装(1)的1份，摇床培养，PH7.5，获工业种子。
3.按照权利要求1和2所述的方法，其特征是先将实验室扩培的一级菌种，进入二级发酵罐，培养至旺盛期，22～24小时，校正PH(7.5)，采用120目的生磷矿粉校正；培养基(发酵液)蛋白胨1公斤蔗糖 2公斤磷酸二氢钾130g 磷酸氢二钠120g硫酸亚铁 10g 七叶苷100g1∶100的豆浆 1000公斤煮沸灭菌，冷却至40℃，密封供氧旋动发酵。
全文摘要
一种天然全元有机生物肥料菌种的提纯复壮方法,将固氮菌为褐球固氮菌(Azotobactr Macrocytogtnts)、解磷为巨大芽孢杆菌(Bacillns Mtgatn－Oeriam)、解钾菌为大荚膜芽孢杆菌(Bacillna Mactilagino－Sas)的菌种(斜面单株),进行工业化提纯复壮,解决了全元有机生物肥料菌种工业化培育问题,为该种肥料的大规模生产创造了条件。
文档编号C05F11/08GK1357619SQ00131248
公开日2002年7月10日 申请日期2000年12月12日 优先权日2000年12月12日
发明者刘国军 申请人:刘国军