专利名称：利用二/四倍体嵌合体鲍进行多倍体育种的方法
技术领域：
本发明涉及一种鲍鱼多倍体的育种方法，具体说是利用二倍体/四倍体嵌合体鲍进行多倍体育种的方法。
背景技术：
鲍鱼的多倍体育种具有重要的生物学意义和生产意义。贝类三倍体具有生长优势、肉质好特点。培育鲍鱼多倍体的主要目的是产生不育的三倍体以供水产养殖之用，并可用于转基因研究以防止外源基因扩散进入野生种群。
目前人工直接诱导贝类三倍体的方法通常有化学方法(如细胞松弛素B、6-DMAP)和物理方法(如温度休克、水静压等)抑制第一或第二极体的释放。在生产中需要大量三倍体苗种，难以完全依靠人工诱导产生，并且诱导产生的三倍体比例不可能达到100％。产生三倍体的最佳方案是培育出四倍体亲本，然后通过四倍体与二倍体杂交产生100％的三倍体苗种，供应养殖生产。在上述物理或化学方法人工诱导鲍四倍体的研究，获得的四倍体胚胎或幼虫，数量很少，并且大都发生畸变死亡，不能发育到变态，虽然过程中会产生一定数量的二四倍体嵌合体，但传统诱导四倍体就认为是失败了。因此在诱导鲍鱼四倍体的研究中迄今尚无成功报道。
发明内容
本发明的目的是充分利用前述各种方法中产生的二/四倍体嵌合体(以下简称为嵌合体)，提供一种鲍鱼多倍体育种的新方法，以解决长期以来鲍鱼三倍体育种的难题。
本发明的方法，通过继续培养或利用前述各种方法中产生的嵌合体，养成到成体鲍。该方法首先将各种物理或化学诱导产生的嵌合体继续培养至性成熟(通常需要24～36个月)，并使其雌雄两两相互杂交，然后通过对子代进行倍性检测，并选取子代中是四倍体的亲鲍；或将性成熟的嵌合体鲍鱼与普通二倍体鲍进行杂交，选取子代中是三倍体的嵌合体亲鲍。这些鲍是性腺组织含有四倍体性母细胞的嵌合体鲍。同时子代中产生了完全可育的四倍体鲍。完全可育的四倍体鲍与正常的二倍体鲍进行杂交，产生100％的三倍体鲍鱼用于生产。另外将选出的性腺组织含有四倍体性母细胞的嵌合体鲍与普通二倍体鲍进行杂交，也可得到三倍体鲍鱼。
具体实施例方式
将利用包括水静压，6-DMAP，CB，咖啡因，温度休克，细胞移植法或核移植法等物理化学方法诱导产生的二四倍体嵌合体，不要丢弃，作为嵌合体的来源。
一、选种首先将各种物理或化学诱导产生的嵌合体继续培养至其性成熟的嵌合体鲍鱼，并选取性腺组织含有四倍体性母细胞的嵌合体鲍；二、杂交育种可选取两种方法方法A.是将上述成熟的嵌合体鲍鱼雌雄两两相互杂交，然后对子代进行倍性检测，并选取子代是可育的完全四倍体作为亲鲍，最后将可育的完全四倍体亲鲍与正常的二倍体鲍进行杂交，即可产生三倍体鲍鱼而用于生产。
方法B.是将上述成熟的嵌合体鲍鱼与普通二倍体鲍进行杂交，子代中产生三倍体鲍。其中三倍体鲍在子代中的比例达到25％以上，因此也有相当的经济价值，可直接用于生产。
综上所述，本方法能解决目前鲍鱼三倍体育种和生产需要的三倍体种苗，有望促进我国鲍鱼养殖业的良种化和多倍体优良品种的推广。
权利要求
1 利用二/四倍体嵌合体鲍进行多倍体育种的方法，其特征是首先将各种物理或化学诱导产生的嵌合体继续培养至其性成熟的嵌合体鲍鱼，并选取性腺组织含有四倍体性母细胞的嵌合体鲍；将上述成熟的嵌合体鲍鱼雌雄两两相互杂交，然后对子代进行倍性检测，并选取子代是可育的完全四倍体作为亲鲍，最后将可育的完全四倍体亲鲍与正常的二倍体鲍进行杂交，即可产生三倍体鲍鱼而用于生产。
2 利用二/四倍体嵌合体鲍进行多倍体育种的方法，其特征是将上述成熟的嵌合体鲍鱼直接与普通二倍体鲍进行杂交，即可产生三倍体鲍鱼而用于生产。
全文摘要
一种利用二/四倍体嵌合体鲍进行多倍体育种的方法。首先将各种物理或化学诱导产生的二四倍体嵌合体继续培养至性成熟的嵌合体鲍鱼，并使其雌雄两两相互杂交，然后对子代进行倍性检测，并选取子代是四倍体的亲鲍，确定性腺组织含有四倍体性母细胞的嵌合体鲍。最后将这种完全可育的四倍体鲍与正常的二倍体鲍进行杂交，即可产生100％的三倍体鲍鱼而用于生产；也可将上述成熟的嵌合体鲍鱼直接与普通二倍体鲍进行杂交，获得三倍体的子代鲍。本方法能解决目前鲍鱼三倍体育种的生产需要的三倍体种苗，有望促进我国鲍鱼养殖业的良种化和多倍体优良品种的推广。
文档编号A01K61/00GK1596627SQ200410024549
公开日2005年3月23日 申请日期2004年8月13日 优先权日2004年8月13日
发明者汪小龙, 包振民, 胡景杰, 陈刚, 张全启 申请人:中国海洋大学