专利名称：高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法
技术领域：
本发明属于海洋生物技术领域，系贝类遗传改良研究中结合选择育种和远缘杂交育种技术为一体的复合育种方案，具体是一种高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法技术背景扇贝是一直是我国海水养殖业的主要种类之一，多年来，我国扇贝养殖规模和产量均居世界首位。但自1997年夏季爆发栉孔扇贝大规模死亡以来，我国扇贝养殖的种类结构发生了重大的变化，目前海湾扇贝已代替昔日的栉孔扇贝占据了扇贝养殖产量的主导地位，近年来我国栉孔扇贝的养殖产量一直排洄在10万吨左右。栉孔扇贝是我国近海自然分布的地方扇贝种，较之引进的海湾扇贝有肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富等优点，符合我国人民的饮食习惯和风味，在国际市场也非常受到欢迎，曾是我国重要的出口水产品。栉孔扇贝养殖产业的复壮工作亟待开展，这对于改善我国人民饮食的营养结构，提高我国人民的生活水平以及增加出口创汇都有着重要意义。
在栉孔扇贝养殖过程中，有两大突出问题困扰着养殖户，严重挫伤了群众的养殖积极性，也就抑制了我国栉孔扇贝养殖业的发展和恢复。第一个突出问题是夏季死亡率高，大规模死亡现象连年发生。春夏季节，海区自然采苗苗种当年度夏死亡率在70％以上，次年养成度夏死亡率更是在90％以上。第二个突出问题是性状的遗传稳定性差，不便于生产的统一操作和管理。商品苗种生长慢、整齐度差、小个体比例大是其当年死亡率高达70％的重要原因，小型个体苗种对于高温的耐受力非常弱，入夏前5mm以下扇贝均很难渡夏。
生产中强烈要求有生长快速、性状一致度高和耐高温的养殖栉孔扇贝。
发明内容
本发明的目的是提供一种高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法，培育生长快速、性状一致度高、抗逆能力强的杂交扇贝苗种，以有效解决我国扇贝生产中存在的突出问题和矛盾，推动我国优势扇贝种类养殖的发展和产业复兴。
本发明是按照以下操作方法完成的首先培育CDS5母本系和ZHJ父本系，再调控双亲性腺同步发育和成熟，进行杂交受精，最后杂交一代苗种培育。
所述培育CDS5母本系方法为对栉孔扇贝长岛群体，以壳高指标，选取生长速度为4-7cm/年进行连续多代选择繁育得到。
培育ZHJ父本系方法为以CDS5系的栉孔扇贝和华贵栉孔扇贝远缘杂交后代中的雌贝为母本，再与栉孔扇贝胶南群体的选育群中的雄贝复交得到高产抗逆ZHJ系。
CDS5母本系和ZHJ父本系杂交受精制种过程中，ZHJ父本系个体数保证在100只以上。
调控双亲性腺同步发育和成熟方法为ZHJ父本系应较CDS5母本系先行一周入池培育，在三月中上旬先后入池，性腺促熟采用升温培育，入池水温与亲贝生境水温一致，稳定2-3后每天升温0.5-1℃，最终稳定在14-16℃培育亲贝，培养中期应经常观察性腺发育进度，采取调解温度、光照和投喂饵料等措施实现双亲同步成熟，待产前2-3天水温日变化0.5℃以内，禁止倒池和大换水，饵料投喂要轻缓，勤吸池底残余饵料和粪便；催产水温为20-22℃，应待较多ZHJ父本系排精后，再予向产卵池中加入精子，精子数量以显微镜检每个卵子周围有可见精子3-5个为宜；杂交一代苗种培育方法为杂交后受精卵经28h左右发育到D形幼虫时，进行选优转移到幼虫培养池中培养，幼虫培育水温应稳定在20-22℃，以金藻作为其开口饵料，培养中后期可搭配投喂金藻、硅藻和扁藻等单胞藻，杂交扇贝幼虫期间的其他管理同栉孔扇贝。
实践证明，采用多年累代选择育种培育的CDS5母本系，与经栉孔扇贝与华贵栉孔扇贝远缘杂交在与栉孔扇贝复交得到的ZHJ父本系杂交，通过采用选择育种策略，结合远缘杂交和复合杂交技术，得到的杂交扇贝形态和营养成分类似于自然海区种野生的栉孔扇贝，突出的优点是壳色鲜红、生长快速、性状一致度高、耐高温养殖。具有如下特点与已有技术对比，本发明技术育成的扇贝结合了生长基因累积和杂种优势的利用于一体；凭借对栉孔扇贝长岛群体连续多代的选择育种，获得了壳色鲜红、生长快速、繁殖力强、性状一致度高的母本系；在选择育种的基础上，通过栉孔扇贝和华贵栉孔扇贝远缘杂交和复合杂交技术，培育出壳色红艳、抗逆力强、生长快速、遗传一致度高的父本系；将获得的母本系和复本系杂交，可以方便地进行杂交扇贝的商品苗种生产，经70天左右的培育(从受精始)，所得商品苗种最小规格可达5mm，平均7mm以上。
本发明养成过程中管理方便，当年度夏存活率(对春苗)在70％以上(常规的苗种≤30％)，次年度夏存活率可达30-40％(常规的苗种≤10％)；14月龄扇贝壳高可达6.5cm以上，部分海区可达7cm以上(常规的苗种在3～6cm范围变异，平均≤5cm)。
具体实施例方式
最佳实施例具体操作工艺过程关键的操作工艺过程包括亲贝培养、杂交受精、幼虫培养。
母本CDS5系、父本ZHJ系的亲贝可从国家“863”项目扇贝原种培育基地(烟台和青岛)购买。
1亲贝培养亲贝应在计划产卵前15到25天入池培养，因ZHJ父本系性腺发育较迟缓，故宜在CDS5母本系先行一周入池。
1)培养条件(1)培育池水泥池或玻璃钢水槽，10～30m3，水深1.1～1.5m；(2)水质水源符合GB 11607的规定，培育用水符合NY 5052的规定；(3)水温从其所在的生境水温逐步提升至14～16℃培育；(4)盐度25～32；(5)光照500～10001x；(6)培育密度100～120个/m3，采用多层网笼或单层浮式网箱为培育容器。
2)日常管理(1)亲贝入池处理亲贝入池前，应清除贝壳上的附着生物和浮泥。入池前应对性别做初步挑选，剔除明确可辨的SDS5母本系中的雄贝和ZHJ父本系中的雌贝。培养过程中期应再集中挑取一次SDS5母本系中的雄贝雄贝和ZHJ父本系中的雌贝并予剔除。(2)投饵投喂硅藻、金藻或扁藻等单胞藻或淀粉、螺旋藻粉、蛋黄等代用饵料。水温低于10℃时，日投喂量(12-15)×104细胞/ml；10℃以上，逐步增加投喂量，到14℃时每天为(35-40)×104细胞/ml。每天分6-12次投喂。在亲贝培育中后期，应根据双亲的发育进度适当调节投喂量以达到父母本同步成熟。(3)换水早期和中期每天2-3次，日换水量100％；晚期每天换水1-2次，日换水量1/3，要有条件尽量从池底进排水，水温保持恒定。(4)倒池早期和中期隔天倒池清底一次；临近采卵前不倒池。(5)吸底早期和中期每天早、晚各吸底一次；晚期适当增加吸底次数。(6)升温亲贝入池后，在接近亲贝生境水温中稳定2-3d，而后每天升高0.5～1.0℃至14-16℃，稳定在此温度下进行培养。(7)充气连续微量充气。(8)有效积温稳定培养阶段有效积温范围150-200℃·日。
2杂交受精为保持扇贝的遗传多样性水平，规模杂交生产过程中参与繁殖受精的的ZHJ父本系的数量应保证在100只以上。；ZHJ父本系应较CDS5母本系先行一周入池培育，一般宜在三月中上月先后入池(可保证扇贝在四月得卵)；性腺促熟采用升温培育，入池水温与亲贝生境水温相当，稳定2-3后每天升温0.5-1℃，最终稳定在14-16℃培育亲贝，培养中期应经常观察性腺发育进度，采取调解温度、光照和投喂饵料等措施实现双亲同步成熟，待产前2-3天水温日变化0.5℃以内，禁止倒池和大换水，饵料投喂要轻缓，勤吸池底残余饵料和粪便；催产水温为20-22℃，应待较多ZHJ父本系排精后，再予向产卵池中加入精子，精子数量以显微镜检每个卵子周围有可见精子3-5个为宜。产卵当日，在阴干时对亲贝性别可再作一次精确挑选，舍弃SDS5母本系中的雄贝或可疑雌贝和ZHJ父本系中的雌贝或可疑雄贝。
3.幼虫培养杂交胚胎经28h左右发育到D形幼虫，应及时进行选优转移到幼虫培养池中培养，幼虫培育水温应稳定在20-22℃，以金藻作为其开口饵料，培养中后期可搭配投喂金藻、硅藻和扁藻等单胞藻。其他管理方法同栉孔扇贝。
CDS5母本系和ZHJ父本系的培育及杂交扇贝生产试验结果CDS5母本系选育过程对栉孔扇贝长岛野生群体进行扇贝高产和抗逆性状的选择育种，形成具备高产、抗逆、壳色红等性状，和基本稳定的遗传性能的扇贝群系。
ZHJ父本系培育过程对部分栉孔扇贝选育群系与华贵栉孔贝的远缘杂交后代选育出表现生长快速，抗逆性强，壳色红的特异生产性状的个体，。再与胶南选择群进行了复杂，通过对子代选育，建立了复合杂交父本群体(ZHJ复杂父本系)。
再用CDS5母本系与ZHJ父本系杂交，杂种子代具有生长快速，抗逆性能突出，壳色鲜红特点，遗传稳定性达95％以上。CDS5母本系与ZHJ系的杂交受精率为90％以上，孵化率为85％以上。杂交子代性状优良，壳色鲜红，该杂交贝被养殖户称为海大蓬莱红扇贝。2003-2004年试验结果见表1、表2。
表1杂交扇贝生产育苗附着60天对照试验结果比较(2003)
对照为烟台套子湾海区自然采苗获得的苗种，壳色为1000粒个体结果，壳高是随机观测100粒个体的统计结果表2杂交扇贝生产对照养成试验观测结果比较(2003-2004)
对照为烟台套子湾海区自然采苗苗种养成的，壳色为1000粒个体结果，壳高、活体重是随机观测100粒个体均值，为14月龄记录结果。死亡率随机观测十个扇贝养成笼
权利要求
1.一种高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法，其特征在于首先培育CDS5母本系和ZHJ父本系，再调控双亲性腺同步发育和成熟，进行杂交受精，最后杂交一代苗种培育。
2.根据权利要求1所述的高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法，其特征是培育CDS5母本系方法为对栉孔扇贝长岛群体，以壳高指标，选取生长速度为4-7cm/年，进行连续多代选择繁育得到。
3.根据权利要求1所述的高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法，其特征是培育ZHJ父本系方法为以CDS5系的栉孔扇贝和华贵栉孔扇贝远缘杂交后代中的雌贝为母本，再与栉孔扇贝胶南群体的选育群中的雄贝复交得到高产抗逆ZHJ系。
4.根据权利要求1所述的高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法，其特征在于CDS5母本系和ZHJ父本系杂交受精制种过程中，ZHJ父本系个体数保证在100只以上。
5.根据权利要求1所述的高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法，其特征在于调控双亲性腺同步发育和成熟方法为ZHJ父本系应较CDS5母本系先行一周入池培育，在三月中上旬先后入池，性腺促熟采用升温培育，入池水温与亲贝生境水温一致，稳定2-3后每天升温0.5-1℃，最终稳定在14-16℃培育亲贝，培养中期应经常观察性腺发育进度，采取调解温度、光照和投喂饵料等措施实现双亲同步成熟，待产前2-3天水温日变化0.5℃以内，禁止倒池和大换水，饵料投喂要轻缓，勤吸池底残余饵料和粪便；催产水温为20-22℃，应待较多ZHJ父本系排精后，再予向产卵池中加入精子，精子数量以显微镜检每个卵子周围有可见精子3-5个为宜；
6.根据权利要求1所述的高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法，其特征在于杂交一代苗种培育方法为杂交后受精卵经28h左右发育到D形幼虫时，进行选优转移到幼虫培养池中培养，幼虫培育水温应稳定在20-22℃，以金藻作为其开口饵料，培养中后期可搭配投喂金藻、硅藻和扁藻等单胞藻，杂交扇贝幼虫期间的其他管理同栉孔扇贝。
全文摘要
一种高产抗逆杂交扇贝品种的育成方法，主要是通过连续多代选择育种获得高产栉孔扇贝CDS5母本系，经栉孔扇贝和华贵栉孔扇贝远缘杂交再与栉孔扇贝JNR群复交得到高产抗逆ZHJ父本系。利用CDS5母本系与ZHJ父本系杂交，解决亲贝培育，实现父母本性腺同步发育和成熟，并掌握杂交子一代苗种培育技术，培育出具有高产、抗逆特性的杂交子一代。本发明可适用于扇贝大规模生产，培育出的杂交子一代，经养成试验，与常规栉孔扇贝生产用种相比较，生长速度提高35％，成活率提高200％以上，该项技术的开发和应用，将使扇贝养殖产量在现有条件下提高30－50％。
文档编号A61D19/00GK1895037SQ20061007694
公开日2007年1月17日 申请日期2006年4月11日 优先权日2005年10月9日
发明者包振民, 陈刚, 胡景杰, 汪小龙, 王师, 孙长森 申请人:中国海洋大学