专利名称：一种水产养殖的微生态制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种水产养殖的微生态制剂及其制备方法，属于生物菌制剂 技术领域。
技术背景近年来，随着人工养殖规模的不断扩大，养殖环境有日趋恶化的趋势， 疾病的爆发也越来越频繁，极大地抑制了水产养殖产量的增长和水产贸易的发展。抗生素作为饲料添加剂的应用开始于20世纪40年代，在抑制病原微 生物的繁殖，减少其代谢毒素对动物的毒害作用等方面都起到了积极的作用。 但长期使用抗生素，特别是滥用抗生素，其种种弊端也逐渐显露出来。如导 致动物胃肠道正常菌群失调，对动物机体免疫力产生不良影响，产生耐药性 和药物残留等副作用，给养殖动物和作为产品消费者的人类的健康都带来了 潜在危害。因此，欧盟、美国等许多国家和地区相继从立法上限制了抗生素 在水产养殖上的使用。开发安全、优质、营养的无公害绿色水产品已成为当 今社会的共识。用微生态制剂进行水产养殖动物病害的防治是近年发展起来的一种新方 法，具有无毒、无副作用、无残留的优点。微生态制剂是基于微生态平衡理 论、微生态营养理论及微生态防治理论而发展起来的微生物产品，它对动物 疾病的防治是一种主动形式的防治。但是现有的大多数微生物产品都是好氧 产品，在使用的同时必须要配合增氧产品的使用，否则会引起缺氧现象的产 生。且现有的微生物产品中菌种一般比较单一，不能很好地发挥不同菌种间 的协同作用。 发明内容本发明的目的在于克服上述不足之处，从而提供一种水产养殖的微生态 制剂及其制备方法，其具有微需氧分解有机物的特点，制剂中所含微生物繁 殖能力强，在养殖水体中易形成有益的优势菌。本发明的主要解决方案是这样实现的本发明水产养殖的微生态制剂其配方比例按重量百分数计 本发明取醋酸杆菌制剂为30 40%、枯草芽孢杆菌制剂为15 25%、
苏云金杆菌制剂为15 25%和梭状芽孢杆菌制剂为15 25%;将取醋酸杆菌制剂、枯草芽孢杆菌制剂、苏云金杆菌制剂和梭状芽孢杆菌制剂按比例混合均匀，并用1 39&醋酸调节PH值3 5即得水产养殖的微生态制剂。本发明水产养殖的微生态制剂的制备方法采用以下工艺步骤 本发明中液体培养基配方比例按重量百分数计(液体培养基W/W):1、醋酸杆菌制剂的制备 取葡萄糖为5 10%，酵母膏为1 5%，水为85 93%混合均匀，在 120 122。C条件下灭菌28 32分钟为灭菌培养基；在上述灭菌培养基上，以 1 5%V/V接种量接入活化的醋酸杆菌，在1吨发酵罐中30 35"C条件下发酵 48 72小时，得醋酸杆菌制剂待用。2、 枯草芽孢杆菌制剂的制备取葡萄糖为1 6%、蛋白胨为1 6%、酵母膏为0.2 0.6%、 KH2P04 为0. 2 0. 6%、 NaN03为:0. 2 0. 6%、 NaCl为:0. 2 0. 6%、 MgS04为0. 02 0.06%和水为87 97%，在120 122。C条件下灭菌28 32分钟为灭菌培养 基；在上述灭菌的培养基上，以1 5。/。V/V接种量接入活化的枯草芽孢杆菌， 在1吨发酵罐中35 4(TC条件下发酵24 36小时，得枯草芽孢杆菌制剂待 用。3、 苏云金杆菌制剂的制备取蛋白胨为0. 5 1.5%、酵母膏为0. 5 1.5%、 NaCl为0. 2 0. 6% 和水为97 98%,在120 122。C条件下灭菌28 32分钟为灭菌培养基；在 上述灭菌的培养基上，以1 5。/。V/V接种量接入活化的苏云金杆菌，在1吨发 酵罐中30 35。C条件下发酵24 36小时，得苏云金杆菌制剂待用。4、 梭状芽孢杆菌制剂的制备取葡萄糖为1 6%、蛋白胨为1 6%、酵母膏为0.2 0.6%、 KH2P04 为:0. 2 0. 6%、 NaN03为:0. 2 0. 6%、 NaCl为:0. 2 0, 6%、 MgS04为:0. 02 0. 06%和水为87 97%，在120 122r条件下灭菌28 32分钟为灭菌培养 基；在上述灭菌的培养基上，以1 5y。V/V接种量接入活化的梭状芽孢杆菌， 在1吨发酵罐中35 4(TC条件下发酵24 36小时，得梭状芽孢杆菌制剂待 用。5、水产养殖的微生态制剂的制备本发明水产养殖的微生态制剂其配方比例按重量百分数计
取醋酸杆菌制剂为30 40%、枯草芽孢杆菌制剂为15 25%、苏云金杆菌制剂为15 25%和梭状芽孢杆菌制剂为15 25%;将取醋酸杆菌制剂、枯草芽孢杆菌制剂、苏云金杆菌制剂和梭状芽孢杆菌制剂按比例混合均匀，并用1 3%醋酸调节PH值3 5即得水产养殖的微生态制剂。本发明与已有技术相比具有以下优点本发明利用其中所含的醋酸杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金杆菌、梭状芽 孢杆菌四种微生物的厌氧、好氧特性，在增强水产动物抗病能力及养殖水体的水质净化方面发挥协同作用；具有微需氧分解有机物的特点，制剂中所含 微生物繁殖能力强，在养殖水体中易形成有益的优势菌；通过制剂中有益菌 群来调整动物体内在营养、免疫、生长刺激、生物拮抗等方面发挥着重要作 用的微生态平衡，抑制致病菌的生长，促进动物自身有益微生物的生长，增 强其微生态的自我调节能力，防治并减少疾病的发生，提高宿主健康水平； 在水产养殖中应用的微生态制剂，还能通过对水体有害物质的分解、病原菌 的抑制及水体有益菌群的培育，来改善水质，维持水体生态平衡。 本发明选用的菌株特性及功能如下1、 醋酸杆菌能使糖类氧化成醋酸等产物的短杆菌，可以在低氧的环境 中生长繁殖。2、 枯草芽孢杆菌具有淀粉酶和蛋白酶活性，生长过程中产生芽孢，耐 受高温，可以促进动物生长，提高饲料的利用率。3、 苏云金杆菌内生芽孢的革兰氏阳性土壤细菌，在芽孢形成初期会形 成杀虫晶体蛋白，对敏感昆虫有特异性的防治作用。4、梭状芽孢杆菌可以进入水产动物的肠道，调节肠道菌群，抑制病原 菌的生长，提高动物对疾病的抵抗能力，促进佴料的消化吸收。
具体实施方式
下面本发明将结合附图
中的实施例作进一步描述实施例一本发明中液体培养基配方比例按重量百分数计(液体培养基 W/W):1、醋酸杆菌制剂的制备取5%葡萄糖，2%酵母膏，93%水，在12rC条件下灭菌30分钟为灭菌的 培养基；在上述灭菌的培养基上，以WV/V接种量接入活化的醋酸杆菌，在 1吨发酵罐中30'C条件下发酵48小时，得醋酸杆菌制剂。2、枯草芽孢杆菌制剂的制备取2%葡萄糖，1%蛋白胨，0. 2%酵母膏，0. 2%KH2P04， 0. 2%NaN03， 0. 2%NaCl， 0.02%MgS04， 96. 18%水，在12rC条件下灭菌30分钟为灭菌的培养基；在上 述灭菌的培养基上，以WV/V接种量接入活化的枯草芽孢杆菌，在l吨发酵 罐中35'C条件下发酵24小时，得枯草芽孢杆菌制剂。3、 苏云金杆菌制剂的制备取1%蛋白胨，1%酵母膏，0. 2%NaCl， 97.8%水，在121。C条件下灭菌30 分钟为灭菌的培养基；在上述灭菌的培养基上，以19&V/V接种量接入活化的 苏云金杆菌，在1吨发酵罐中30。C条件下发酵24小时，得苏云金杆菌制剂。4、 梭状芽孢杆菌制剂的制备取2%葡萄糖，1%蛋白胨，0. 2%酵母膏，0. 2%KH2P04， 0. 2%NaN03， 0. 2%NaCl， 0.02%MgS04， 96. 18%水，在121。C条件下灭菌30分钟为灭菌的培养基；在上述灭菌的培养基上，以ly。v/v接种量接入活化的梭状芽孢杆菌，在l吨发酵罐中35'C条件下发酵24小时，得梭状芽孢杆菌制剂。将上述制备的醋酸杆菌制剂30%、枯草芽孢杆菌制剂25%、苏云金杆菌制 剂25%和梭状芽孢杆菌制剂20%混合均匀，用2%醋酸调节pH至4。实施例二本发明中液体培养基配方比例按重量百分数计(液体培养基W/W):1、醋酸杆菌制剂的制备取7%葡萄糖，3%酵母膏，90%水，在121"C条件下灭菌30分钟为灭菌的 培养基；在上述灭菌的培养基上，以3。/。V/V接种量接入活化的醋酸杆菌，在 1吨发酵罐中32'C条件下发酵60小时，得醋酸杆菌制剂。2、 枯草芽孢杆菌制剂的制备取1%葡萄糖，2%蛋白胨，0. 3%酵母膏，0. 3%KH2P04， 0. 3%歸03， 0. 3%NaCl， 0. 03%MgS04， 95. 77%水，在121'C条件下灭菌30分钟；在上述灭菌的培养基 上，以3呢V/V接种量接入活化的枯草芽孢杆菌，在1吨发酵罐中38'C条件下 发酵30小时，得枯草芽孢杆菌制剂。3、 苏云金杆菌制剂的制备取O. 5%蛋白胨，0. 5%酵母膏，0. 4%NaCl， 98. 6%水，在121。C条件下灭 菌30分钟；在上述灭菌的培养基上，以3。/。V/V接种量接入活化的苏云金杆 菌，在1吨发酵罐中32。C条件下发酵30小时，得苏云金杆菌制剂。4、梭状芽孢杆菌制剂的制备取1%葡萄糖，2%蛋白胨，0. 3%酵母膏，0. 3%KH2P04， 0. 3%NaN03， 0. 3%NaCl， 0.03%MgS04， 95. 77%水，在121。C条件下灭菌30分钟；在上述灭菌的培养基 上，以3。/。V/V接种量接入活化的梭状芽孢杆菌，在1吨发酵罐中38。C条件下 发酵30小时，得梭状芽孢杆菌制剂。本实施例中水产养殖的微生态制剂包括上述醋酸杆菌制剂35%、枯草芽孢 杆菌制剂25%、苏云金杆菌制剂20%和梭状芽孢杆菌制剂20%，用1. 5%醋酸调 节pH至4. 5。实施例三本发明中液体培养基配方比例按重量百分数计(液体培养基W/W):1、 醋酸杆菌制剂的制备取10%葡萄糖，5%酵母膏，85%水，在12rC条件下灭菌30分钟；在上述 灭菌的培养基上，以5y。V/V接种量接入活化的醋酸杆菌，在1吨发酵罐中35 'C条件下发酵72小时，得醋酸杆菌制剂。2、 枯草芽孢杆菌制剂的制备取5%葡萄糖，5%蛋白胨，0. 6%酵母膏，0. 60/oKH2P04， 0. 6%歸03， 0. 6%NaCl， 0.06%MgS04， 87.54 %水，在121。C条件下灭菌30分钟；在上述灭菌的培养 基上，以5呢V/V接种量接入活化的枯草芽孢杆菌，在1吨发酵罐中4(TC条件 下发酵36小时，得枯草芽孢杆菌制剂。3、 苏云金杆菌制剂的制备取1.5%蛋白胨，1.5%酵母膏，0. 6%NaCl， 96.4 %水，在121'C条件下灭 菌30分钟；在上述灭菌的培养基上，以5%V/V接种量接入活化的苏云金杆菌， 在1吨发酵罐中35'C条件下发酵36小时，得苏云金杆菌制剂。4、 梭状芽孢杆菌制剂的制备取5%葡萄糖，5%蛋白胨，0. 6%酵母膏，0. 6%KH2P04， 0. 6%NaN03， 0. 6%NaCl， 0.06%MgS04， 87.54 %水，在条件下121。C灭菌30分钟；在上述灭菌的培养 基上，以5%V/V接种量接入活化的梭状芽孢杆菌，在1吨发酵罐中4(TC条件 下发酵36小时，得梭状芽孢杆菌制剂。本实施例中水产养殖的微生态制剂包括上述醋酸杆菌制剂40%、枯草芽孢 杆菌制剂20%、苏云金杆菌制剂20%和梭状芽孢杆菌制剂20%，用30/。醋酸调节 pH至3。
上述各组分的制备所用菌株均为现有菌种。本发明三个实施例中制备的的微生态制剂，按照300-400mL/亩的用量 (每7-IO天用一次)，在养殖过程中可全程使用。可以高效分解塘底污染、 排泄废物、残余饵料、动植物残体等对水产动物有害的物质，净化水质，改 善养殖水体环境，抑制病原菌的生长。
权利要求
1、一种水产养殖的微生态制剂，其特征是配方比例按重量百分数计取醋酸杆菌制剂为30～40％、枯草芽孢杆菌制剂为15～25％、苏云金杆菌制剂为15～25％和梭状芽孢杆菌制剂为15～25％；将取醋酸杆菌制剂、枯草芽孢杆菌制剂、苏云金杆菌制剂和梭状芽孢杆菌制剂按比例混合均匀，并用醋酸调节PH值即得成品。
2、根据权利要求l所述的一种水产养殖的微生态制剂的制备方法，其特征是采用以下工艺步骤配方比例按重量百分数计(1) 、醋酸杆菌制剂的制备取葡萄糖为5 10%，酵母膏为1 5%，水为85 93%混合均匀，在 120 122'C条件下灭菌28 32分钟为灭菌培养基；在上述灭菌培养基上，以 1 5%V/V接种量接入活化的醋酸杆菌，在30 35。C条件下发酵48 72小时， 得醋酸杆菌制剂待用。(2) 、枯草芽孢杆菌制剂的制备取葡萄糖为1 6%、蛋白胨为1 6%、酵母膏为0.2 0.6%、 KH2P04 为0. 2 0. 6%、 Na腦3为0. 2 0. 6%、 NaCl为0. 2 0. 6°/。、 MgS04为0. 02 0.06%和水为87 97%，在120 122'C条件下灭菌28 32分钟为灭菌培养 基；在上述灭菌的培养基上，以1 5。/。V/V接种量接入活化的枯草芽孢杆菌， 在35 4(TC条件下发酵24 36小时，得枯草芽孢杆菌制剂待用。(3) 、苏云金杆菌制剂的制备取蛋白胨为0. 5 1.5%、酵母膏为0. 5 1.5%、 NaCl为0. 2 0. 6% 和水为97 98%，在120 122'C条件下灭菌28 32分钟为灭菌培养基；在 上述灭菌的培养基上，以1 5%V/V接种量接入活化的苏云金杆菌，在30 35'C条件下发酵24 36小时，得苏云金杆菌制剂待用。(4) 、梭状芽孢杆菌制剂的制备取葡萄糖为1 6%、蛋白胨为1 6%、酵母膏为0.2 0.6%、 KH2P04 为0. 2 0. 6%、腳03为:0. 2 0. 6%、 NaCl为0. 2 0. 6%、 MgS。4为:0. 02 0.06%和水为87 97%，在120 122。C条件下灭菌28 32分钟为灭菌培养 基；在上述灭菌的培养基上，以1 596V/V接种量接入活化的梭状芽孢杆菌， 在35 40'C条件下发酵24 36小时，得梭状芽孢杆菌制剂待用。 (5)、水产养殖的微生态制剂的制备 取醋酸杆菌制剂为30 40%、枯草芽孢杆菌制剂为15 25%、苏云金杆菌制剂为15 25%和梭状芽孢杆菌制剂为15 25%;将取醋酸杆菌制剂、枯草芽孢杆菌制剂、苏云金杆菌制剂和梭状芽孢杆菌制剂按比例混合均匀，并用醋酸调节ra值即得成品。
3、根据权利要求2所述的一种水产养殖的微生态制剂的制备方法，其特 征在于所述的醋酸调节量为1 3%。
4、根据权利要求2所述的一种水产养殖的微生态制剂的制备方法，其特 征在于所述的PH值为3 5。
全文摘要
本发明涉及一种水产养殖的微生态制剂及其制备方法，属于生物菌制剂技术领域。特征是先分别制备醋酸杆菌制剂、枯草芽孢杆菌制剂、苏云金杆菌制剂和梭状芽孢杆菌制剂待用；然后取醋酸杆菌制剂、枯草芽孢杆菌制剂、苏云金杆菌制剂和梭状芽孢杆菌制剂按比例混合均匀，并用醋酸调节pH值即得成品。本发明具有微需氧分解有机物的特点，制剂中所含微生物繁殖能力强，在养殖水体中易形成有益的优势菌；通过制剂中有益菌群来调整动物体内在营养、免疫、生长刺激、生物拮抗等方面发挥着重要作用的微生态平衡，抑制致病菌的生长，促进动物自身有益微生物的生长，增强其微生态的自我调节能力，防治并减少疾病的发生，提高宿主健康水平。
文档编号A23K1/16GK101147529SQ20071013451
公开日2008年3月26日 申请日期2007年10月31日 优先权日2007年10月31日
发明者黄忠平 申请人:无锡中顺生物技术有限公司