专利名称：：一种促进大花黄牡丹种子萌发的方法
技术领域：
：本发明涉及一种促进大花黄牡丹种子萌发的方法。
背景技术：
：大花黄牡丹(尸aeo"i3Jwo7ow'i)是西藏特有的毛茛科(Ranunculacea)芍药属丛生灌木，仅分布于林芝八一镇至米林一带。大花黄牡丹株型高大，花大、黄色，具有很高的观赏价值，是重要的遗传育种资源；同时，根中含有丹皮酚，是传统藏药资源；因此，大花黄牡丹不仅具有很高的研究和保护价值，更是重要的经济植物资源。由于环境变迁和人为采掘，大花黄牡丹分布区域日益縮小，种群数量持续减少，处于濒危状态，被《中国物种红色名录》列为极危种。目前，由于大花黄牡丹种子获取难度较大，一般繁殖方法需要2年以上方可出苗，且出苗率非常低，多数种子在长时间的播种和贮藏过程中失去活力，种子损失严重。关于大花黄牡丹种子休眠解除和育苗还没有一个快速、高质量的萌发方法。
发明内容本发明的一个目的是提供一种促进大花黄牡丹种子萌发的方法。本发明所提供的促进大花黄牡丹种子萌发的方法，包括如下步骤将大花黄牡丹种子先在15'C条件下进行层积，至其胚根长度大于6cm后，再将其置于5'C条件下层积60-80天，得到萌发的种子。其中，所述层积的方法可以为将所述大花黄牡丹种子与层积基质混合，置于透气保湿装置中；所述大花黄牡丹种子与所述层积基质的质量配比可以为大花黄牡丹种子层积基质=1:1。所述层积基质可以为含水量为200%-400%的苔藓、含水量为40%—50%的珍珠岩和含水量为50%—70%的砂子中的至少一种；所述百分含量为质量百分含量。所述透气保湿装置可以为聚乙烯塑料编织袋。所述苔藓经过灭菌处理。在所述方法中，在所述15'C层积前还包括如下步骤将所述大花黄牡丹种子置于4(TC水中浸种24小时，再将所述大花黄牡丹种子用10%的次氯酸钠消毒10分钟;所述百分含量为质量百分含量。所述大花黄牡丹种子为当年大花黄牡丹荚果将要开裂或半开裂、种子颜色由黄变褐或黑时的成熟种子。所述种子在采集后、所述层积处理之前常温保持湿润。所述方法还包括胚芽萌发的步骤；所述胚芽萌发的温度可为10-25°C。所述胚芽萌发的温度可为15-20°C。上述任一所述方法在培育大花黄牡丹中的应用也属于本发明的保护范围。本发明方法通过控制采种时间保证了种子的成熟程度；应用清水浮选法选种保证了种子质量和活力；温水浸种，使种子充分吸涨；次氯酸钠消毒，防止种子霉变;15t:和5。C一定时间段的变温层积，有效地解除了大花黄牡丹种子上胚轴休眠，所用的层积基质，具有易消毒、不易霉变、持水量大，适于保温的特点，用双层聚乙烯塑料编织袋包装种子进行层积，能有效减少水分丧失，并保证良好的透气性。本发明方法能使种子出苗率上升到69.7%以上，出苗时间縮短l年，具有繁殖速度快、周期短、出苗率高的优点。本发明方法克服了大花黄牡丹萌发时间长、萌发率低、出苗不整齐的问题，可有效地提高出苗整齐度和实生苗质量，縮短苗木生产周期，将对保护高原野生濒危物种、可持续开发优良野生植物种质资源、为医药产业提供安全、稳定的植物材料奠定技术基础。图1为不同低温层积时间对种子萌发的影响。图2为不同温度对大花黄牡丹胚芽萌发的影响。图3为不同暖层积温度对胚根萌发长度的影响。图4为大花黄牡丹上胚轴萌发状况与温度。图5为2007年本发明方法处理大花黄牡丹种子得到幼苗与正常播种的容器。图6为2007年本发明方法处理大花黄牡丹种子得到的幼苗与正常播种的种子。具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明均为常规方法。实施例1、大花黄牡丹种子萌发一、选种本实施例中选取当年的种子进行实验。当大花黄牡丹荚果将要开裂或半开裂、种子已成熟、种子颜色由黄变褐或黑时，将种子取出，然后用清水浮选法去除杂质和瘪粒，选取健康成熟种子，种子净度为100%，采用TTC法(氯化三苯基四氮唑)测定种子活力95y。以上，常温保持种子湿润。二、浸种消毒将经步骤一选取的种子放置在40'C恒温水浴箱中浸种24小时，滤干种子表面水分，浸泡在浓度为10%的次氯酸钠(NaC10)溶液中消毒10分钟，无菌水冲洗3-4次，阴干种子表面水分后备用。三、变温层积将经过12(TC高温干燥消毒的苔藓作为层积基质，冷却至室温，加无菌水，使含水量保持在400%，将苔藓与步骤二获得的种子按l:l的质量配比充分混合，装入双层聚乙烯塑料编织袋，按照下列步骤进行变温处理第一步胚根萌发分别进行以下7种处理，每个处理重复三次，每个重复处理25粒种子。I:5。C恒温处理；II:l(TC恒温处理，III:15。C恒温处理，IV:20。C恒温处理，V:25X:恒温处理，VI:5TV15。C昼夜变温培养4周，之后在15'C条件下继续恒温处理，VII:5XVl5r昼夜变温培养8周，之后在15。C条件下继续恒温处理。实验结果取三次重复的平均值。结果表明，15°0恒温条件下暖层积30天胚根开始萌发，15'C层积处理90天后胚根萌发率可达85%(以胚根露出种皮2mm为萌发标准)，其它各种处理需要的时间长且萌发率低于40%(表l)。胚根萌发率的计算公式为胚根萌发率=生出胚根的种子数目/进行暖层积处理的种子总数。比较不同温度和时间条件下胚根生长状况。结果表明，10。C恒温和15。C恒温条件下层积60天胚根长度大于6cm的种子不足10%;15。C恒温条件下层积90天后，胚根长度大于6cm的种子可达到58.5%;10'C恒温条件下层积90天，胚根长度大于6cm的种子仅为12%(表2和图3)。将15"C恒温条件下，当胚根长度大于6cm的种子达58.5。/。时，将胚根长度大于6cm的种子进行下一步的破除胚芽休眠处理。表l、不同处理下种子胚根萌发结果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>*W:为变温处理周数；A、B、C、D、E代表差异显著性。字母不同，则差异显著;字母相同，则差异不显著。表2、不同处理下胚根萌发率及胚根长度变化<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>第二步破除胚芽休眠将按照步第一步所述方法所得到的种子(即15。C恒温条件下暖层积90天、胚根长度大于6cm的种子)分别进行5"C恒温条件下低温层积20、40、60、80天的不同处理，每个处理重复三次，每次重复处理25粒种子；层积结束后，将不同处理的种子取出，均在15。C、相对湿度为47%-50%的环境中培养12天，比较5。C低温层积处理不同时间的胚芽萌发率。胚芽萌发率=胚芽萌发的种子数目/用于处理的种子总数。结果表明5'C低温层积40天以内的种子，其胚芽萌发率不足50%;低温层积60-80天的种子，可以被完全解除上胚轴休眠，其胚芽萌发率达到最大值82%(图1)。四、胚芽萌发最适温度的选择将上述经过15'C恒温暖层积90天和5'C低温层积60天的种子，分别进行5、10、15、20、25'C恒温培养，培养环境的相对湿度为47%-50°%;培养12天后，统计各培养温度下的胚芽萌发率，实验设三次重复，每次重复处理25粒种子。结果表明，12天后，除5'C条件下胚芽不萌发外，其余温度(10'C、15°C、20°C、25°C)胚芽萌发率均为80%左右；15°C、20。C时，萌发势高于其它温度(图2和图4)。五、播种选经过暖层积和低温层积处理的25粒种子进行盆播，盆播的方法为选择排水良好、土质疏松的栽培基质，盆播覆土深度约1-1.5cm，在20。C、相对湿度为47%-50%的条件下进行培养。同时以未经变温层积处理的种子作为对照。实验设三次重复，结果取其平均数。结果表明，15天后，经变温层积处理过的种子的成苗率为70%(图5和图6)。成苗率的计算公式为成苗率=成苗的种子数目/播种的种子总数。权利要求1、一种促进大花黄牡丹种子萌发的方法，包括如下步骤将大花黄牡丹种子先在15℃条件下进行层积，至其胚根长度大于6cm后，再将其置于5℃条件下层积60-80天，得到萌发的种子。2、根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述层积的方法为将所述大花黄牡丹种子与层积基质混合，置于透气保湿容器中；所述大花黄牡丹种子与所述层积基质的质量配比为大花黄牡丹种子层积基质=1:1。3、根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述层积基质为含水量为200%-400%的苔藓、含水量为40%—50%的珍珠岩和含水量为50%—70%的砂子中的至少一种；所述百分含量为质量百分含量。4、根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于所述透气保湿装置为聚乙烯塑料编织袋。5、根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于所述方法中，在所述15t:层积前还包括如下步骤将所述大花黄牡丹种子置于4(TC水中浸种24小时，再将所述大花黄牡丹种子用10%的次氯酸钠消毒10分钟；所述百分含量为质量百分6、根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于所述大花黄牡丹种子为当年大花黄牡丹荚果将要开裂或半开裂、种子颜色由黄变褐或黑时的成熟种子。7、根据权利要求6所述的方法，其特征在于所述种子在采集后、所述层积处理之前常温保持湿润。8、根据权利要求7所述的方法，其特征在于所述方法还包括胚芽萌发的步骤；所述胚芽萌发的温度为10-25°C。9、根据权利要求8所述的方法，其特征在于所述胚芽萌发的温度为15-20°C。10、权利要求1-9中任一所述方法在培育大花黄牡丹中的应用。全文摘要本发明公开了一种促进大花黄牡丹种子萌发的方法。本发明所提供的促进大花黄牡丹种子萌发的方法包括如下步骤将大花黄牡丹种子先在15℃条件下进行层积，至其胚根长度大于6cm后，再将其置于5℃条件下层积60-80天，得到萌发的种子。本发明方法克服了大花黄牡丹萌发时间长、萌发率低、出苗不整齐的问题。本发明方法能使种子出苗率上升到70％以上，出苗时间缩短1年，具有繁殖速度快、周期短、出苗率高的优点。文档编号A01C1/02GK101288360SQ200810114440公开日2008年10月22日申请日期2008年6月5日优先权日2008年6月5日发明者志何,唐宇丹,涓姚,普布次仁,雷石申请人:中国科学院植物研究所