专利名称：一种四倍体结球甘蓝的培育方法
技术领域：
本发明为一种四倍体结球甘蓝的培育方法，属于植物新品种培育方法技术领域， 专用于四倍体结球甘蓝品种。
二背景技术：
传统上结球甘蓝无论是采用自交不亲和还是雄性不育手段选育的杂交种都是二 倍体类型，主要是用于炒熟食用，国内品种及亚洲品质较好、但球叶较薄、抗病性 较差；欧洲品种球叶厚实、抗逆性强，但品质较差。难有球叶厚实、脆嫩、抗逆性 强、品质好适合生食的品种。四倍体不结球小白菜品种证明它在产量、叶片厚度和 品质上较二倍体品种有明显优势。利用染色体加倍方法育成的四倍体结球甘蓝细胞 质雄性不育系，由不育系形成的四倍体杂交种将符合生食要求。
三、
发明内容
技术问题
本发明针对现有技术中结球甘蓝品种球叶脆度不够，不能满足生食要求等问题， 提供一种四倍体结球甘蓝的培育方法，选育出一批四倍体结球甘蓝品种材料。
技术方案
本发明所提供的一种四倍体结球甘蓝的培育方法，包括
选用常规二倍体结球甘蓝品种，采用浓度为质量体积比0.15%的秋水仙素溶液， 在子叶期每天上午8时 9时，下午2时 3时各处理一次。处理方法是用微量注射器 在二倍体结球甘蓝的茎尖生长点上滴2滴秋水仙素溶液，连续处理5天。处理阶段 环境气温为昼20~25°C /夜16~18°C。经过细胞学染色体数检验，获得染色体数为36 的第一代四倍体结球甘蓝突变株。质量体积比0.15%的秋水仙素溶液配制秤取秋水 仙素lg， 5ml95。/。酒精助溶，加蒸馏水666ml，完全溶解后装入棕色玻璃瓶。 有益效果
3用以上方法获得的结球甘蓝四倍体胞质型雄性不肓系AnandCMS和相应的保持 系金早生，与二倍体相比在植株生长的各个阶段出现了变异，四倍体的根、茎、叶 等营养器官和花器、果实等生殖器官都表现出多倍体的巨大性，平均单株重增加15% 左右，叶片厚度增加39% 52%，统计分析显示，在球重、叶厚等主要性状上差异极 显著(P=0. 01)。外叶叶色深绿，球叶脆嫩，品质变好。四倍体雄性不育系雄蓝退 化彻底，不育率和不育度均为100%。保持系花期亲和指数为6~10。四倍体胞质雄性 不育系育性上与二倍体相同，保持系花期和蕾期亲和性明显降低。四倍体不育系与 四倍体父本杂交形成四倍体杂交种。
四具体实施方式
实施例1
以细胞质雄性不育系Anand CMS(公知公用。T.Cardi E D Earie，Production of new CMS Brassica oleraca by transfer of 'Anand' cytoplasm from B. rapa through protoplast fosion. Theory Application Genetics, (1997) 94: 204-212))和相应的保持系金早 生(公知公用。方智远，孙培田，刘玉梅，杨丽梅.北方地区早熟春甘蓝新品种'中 甘ll号，的选育，中国蔬菜，(1987)4: 1~4;黄真诒，徐鹤林，丁万霞，王爱民.南 方地区早熟春甘蓝新品种"春丰"的选育，中国蔬菜，(1991) 4: 5~7)为材料，采 用化学药剂秋水仙素诱变四倍体的产生。所用的秋水仙素溶液浓度为0.15% (g/ml， 下文同)，在子叶期用微量注射器在二倍体结球甘蓝胞质雄性不育系及相应的保持 系(2n==2x=18)的茎尖生长点上滴2滴秋水仙素溶液，每天2次，上午8时~9时， 下午2时~3时各进行1次，连续处理5天，处理阶段环境气温为昼20~25°C /夜 16~18°C，经过细胞学染色体数检验，获得第一代四倍体结球甘蓝胞质雄性不育系突 变株和保持系突变株，细胞学镜检突变株体细胞的染色体数为36条，四倍体Anand CMS得率6.8%，四倍体保持系金早生得率11.2%。与各自的二倍体相比在植株生长 的各个阶段出现了变异，四倍体的根、茎、叶等营养器官和花器、果实等生殖器官 都表现出多倍体的巨大性，主侧根粗度增大，不育系平均单株重增加12.5%,叶片厚 度增加39.6%左右，球叶脆嫩，紧实度差异不明显。薹径增粗30%左右，高度降低 26%左右，茎出叶变厚，叶色变深。花期延迟约5天，花瓣颜色变淡，荚长没有显著 变化，但荚的直径变粗。保持系主侧根增粗，叶片增厚46%左右，单株重增加27.2%， 球叶紧实度有所增加，薹径增粗33%左右，高度降低16%左右，茎出叶变厚，叶色
4变深。花期延迟约3天，花瓣颜色变深，荚长变化不大，荚的直径变粗。统计分析 显示，四倍体不育系和保持系与各自的二倍体相比，在单株重、叶厚、薹径和薹高 上均存在极显著差异(P=0. 01)。四倍体雄性不育系雄蕊退化彻底，不育率和不育 度均为100%。保持系花期亲和指数为6 10，四倍体胞质雄性不育系育性上与二倍体 相同。保持系花期亲和指数为3~4，亲和性却明显降低，(P=0. 01)。 实施例2
以黄苗品种(公知公用。殷玉华，朱宗元，杂种一代秋甘蓝——浙丰1号，农业 科技通讯，1989， 6: 45;严慧玲，农杆菌介导的甘蓝遗传转化体系的研究，西北农 林科技大学硕士研究生论文，2003)采用化学药剂秋水仙素诱变四倍体的产生。所 用的秋水仙素溶液浓度为0.15% (g/ml，下文同)，在子叶期用微量注射器在金早生 二倍体植株(2n = 2x=18)的茎尖生长点上滴2滴秋水仙素溶液，每天2次，上午8 时-9时，7午2时~3时各1次，连续处理5天，处理阶段环境气温为昼20~25°C / 夜I6 IS'L',经过细胞学染色体数检验，获得第一代四倍体结球甘蓝金早生突变株， 突变株体细胞的染色体数为36。四倍体得率13.7%。该突变株与二倍体相比，在植 株生长的各个阶段出现了变异，四倍体的根、茎、叶等营养器官和花器、果实等生 殖器官都表现出多倍体的巨大性，主侧根粗大，长度变化不明显。外叶叶色深绿， 叶片厚度增加48.1%左右。平均单株重增加17.2%。球叶紧实度稍紧，变脆。薹径增 粗36%左右，高度降低19%左右，茎出叶增厚，叶色变深。花期延迟约7天，花蕾 直径和横径变大，花瓣增大，花色变深。荚长变化不显著，荚明显变粗。统计分析 显示，单株重、叶片厚度、花蕾长度和荚粗等性状差异极显著(P=0. 01)。 实施例3
以地方品种鸡心(生产公用。黄真诒，徐鹤林，丁万霞，王爱民.南方地区早熟 春甘蓝新品种"春丰"的选育，中国蔬菜，(1991)4: 5~7)采用化学药剂秋水仙素 诱变四倍体的产生。所用的秋水仙素溶液浓度为0.15% (g/ml，下文同)，在子叶期 用微量注射器在鸡心二倍体结球甘蓝植株(2n=2x=18)的茎尖生长点上滴2滴秋 水仙素溶液，每天2次，上午8时 9时，下午2时 3时各1次，连续处理5天，处 理气温为昼20 25'C/夜16 18'C，经过细胞学染色体数检验，获得第一代四倍体结 球甘蓝品种鸡心的突变株，其体细胞染色体数为36。四倍体得率10.2%。与二倍体 相比在植株生长的各个阶段出现了变异，四倍体的根、茎、叶等营养器官和花器、 果实等生殖器官都表现出多倍体的巨大性，主侧根粗度变大，长度有所变长。平均单株重增加15%，外叶片厚度增加52%左右，叶色有所加深。球叶厚度增加38%左 右，球叶脆嫩。薹径增粗31%左右，高度降低35%左右，茎出叶变厚，叶色变深。 花期延迟约3天，统计分析，四倍体在单株重、球叶厚、薹径、薹高等性状上与二 倍体差异极显著(P=0. 01)。
权利要求
1、一种四倍体结球甘蓝的培育方法，包括选用常规二倍体结球甘蓝品种或雄性不育株系，选用质量体积比0.15％秋水仙素溶液在子叶期每天上午8时～9时，下午2时～3时各处理一次，处理方法是用微量注射器在二倍体结球甘蓝的茎尖生长点上滴2滴秋水仙素溶液，连续处理5天，处理阶段环境气温为昼20～25℃、夜16～18℃，经过细胞学染色体数检验，获得染色体数为36的第一代四倍体结球甘蓝突变株。
2、 根据权利要求l所述一种四倍体结球甘蓝的培育方法，其特征在于，质量体积比0.15%秋水仙素溶液配制为称取秋水仙素lg， 5ml体积比95。/。酒 精助溶，加蒸馏水666ml，完全溶解后装入棕色玻璃瓶备用。
全文摘要
本发明涉及一种四倍体结球甘蓝的培育方法，属于植物育种技术领域。选用常规二倍体结球甘蓝，采用秋水仙素溶液浓度为质量体积比0.15％，在子叶期每天上午8时～9时，下午2时～3时各处理一次。处理方法是用微量注射器在二倍体结球甘蓝的茎尖生长点上滴2滴秋水仙素溶液。连续处理5天，处理阶段环境气温为昼20～25℃/夜16～18℃。经过细胞学染色体数检验，可以获得染色体数为36的第一代四倍体结球甘蓝突变株。与二倍体相比，根、茎、叶等营养器官和花器、果实生殖器官都表现出多倍体巨大性，根系和薹径增粗，单株重增加，叶片变厚、变脆，叶色加深。花蕾、花瓣变大。一些生育性状改变，抽薹期延后，可育株结荚率和结籽数减少。
文档编号A01H1/08GK101647390SQ20091003465
公开日2010年2月17日 申请日期2009年9月7日 优先权日2009年9月7日
发明者严继勇, 宋立晓, 曾爱松, 兵 高 申请人:江苏省农业科学院