专利名称：一种蛭形轮虫大量培养的方法
技术领域：
本发明涉及一种蛭形轮虫的大量培养的方法，属蛭形轮虫新的培养方法及新型饵料加工及 使用技术领域。
背景技术：
蛭形轮虫(bdelloid rotifer)广泛存在于净水以及污水生态环境中其特征为尾部末端有分 叉的趾，趾内的腺体可分泌粘液，使其能够粘着在其它固体(活性污泥、生物膜)的表面以 营附着生活。因其具有强有力的摄食悬浮固体的能力而受到广泛的关注。在污水生物处理反 应器中常见的蛭形轮虫有旋轮属(户Mo&"a)、轮虫属(/ oton'")、以及宿轮属(#a&ofracto) 轮虫。蛭形轮虫不仅可通过摄食悬浮固体达到净化水体和减少剩余污泥量的作用，同时对活 性污泥或生物膜的形成、细菌的活性也有促进作用。目前对轮虫培养方法的研究甚多，但主 要以臂尾轮虫属(3rao^"omy)、晶囊轮虫属0^; /""c/2朋)，椎轮虫属(JVo/ow;w to)等一些浮游 生活型轮虫为主。而对污水生物处理中有着重要作用的蛭形轮虫的研究为数不多。
传统用于培养蛭形轮虫的饵料以生物饵料细菌和藻类为主。细菌和藻类虽能满足轮虫捕 食的需要，但细菌培养周期长，同吋细菌溶液需要新鲜配置使用不方便，培养中也极易絮凝 不宜捕食。而藻类虽营养很高，但通常粒径过大不适宜蛭形轮虫捕食，同时藻类作为牛物体 也需要一定的培养条件，因此使用不太方便同时提高了培养的费用。
发明内容
本发明目的是提供一种用非生物饵料——小麦面粉进行大量培养蛭形轮虫的方法。
本发明是一种蛭形轮虫大量培养的方法，其特征在于具有以下的步骤和特征
a、 利用非生物饵料溶液作为蛭形轮虫生长的食物。其制备过程如下取一定量的小麦面 粉作为饵料原料，首先将小麦面粉灭菌处理，再加入一定量的无菌水，小麦面粉与无菌水的
重量体积比为0.75~0.85g/100mL，即每100mL的蒸馏水中加入0.75~0.85g的小麦面粉；将配 置好的溶液再经超声波破碎，在超声波破碎过程中要适当的降温，以免破碎过程中产生大量 的热量使小麦面粉溶液呈糊状；将破碎后的面粉溶液沉降1小时后弃去底部沉淀的面粉，以 去除大粒径的面粉颗粒，并保证其粒度均匀；再次沉降24h后取其上清液，最终得到的饵料 溶液即面粉悬浊液的浓度在5xl()S粒/mL左右，且粒径分布在0.2~0.3pm范围内；最后将培养 液的pH值调节至5~7范围内；将配制好的饵料溶液保存于冰箱中待用。
b、 将上述制得的非生物佴料溶液加入于事先准备好的无菌的培养皿中，每毫升培养液中投加10~100|aL所述饵料溶液。
c、在上述培养液中接种蛭形轮虫，接种的初始密度为lind/mL。将其置于25'C恒温培养 箱中培养，培养12天后，培养皿中轮虫的密度可达100~200ind/mL。 本发明的优点和特点如下所述
本发明的特点是采用便宜易得的小麦面粉作为培养蛭形轮虫的饵料，饵料的制作过程简 单可行，制成的饵料使用方便、不易变质、易于保存，即可降低培养成本。而且普通的小麦 面粉中含有大量的矿物元素，氨基酸，维生素和特定的多糖能提供充足的营养能满足轮虫生 长的各种需要。经培养，培养皿中的轮虫密度可达100-200ind/mL。
此外，实验研究得出，蛭形轮虫生长最适合的面粉溶液的pH值范围为5 7，生长最佳的 pH值为6。在此条件下，轮虫生长健康，繁殖快。
图1为传统用混合细菌为饵料时轮虫的种群密度变化曲线图。 图2为以本发明的面粉溶液作为培养饵料时轮虫的种群密度变化曲线图。 图3为本发明面粉溶液用于培养轮虫与传统的混合细菌培养轮虫时的比生长速率大小比 较图。
具体实施例方式
现将本发明的具体实施例叙述于后。 实施例1
本实施例中的蛭形轮虫培养过程和步骤如下
(1) 称取经灭菌处理的小麦面粉3.8克，加入于500毫升的无菌水中，然后将该溶 液经超声波破碎，在超声波破碎中适当降温，以免产生大量的热量使小麦面粉 溶液呈糊状；将破碎后的面粉溶液沉降l小时后弃去底部沉淀的面粉，以去除 大粒径的面粉颗粒，并保证其粒度均匀；再次沉降24h后取其上清液，最终得 到的饵料溶液即面粉悬浊液的浓度在5xl06粒/mL左右，且粒径分布在 0.2~0.3nm范围内；最后将培养液的pH值调节至5~7范围内；将配制好的馆 料溶液保存于冰箱中待用。
(2) 将上述制得的非生物饵料溶液加入于事先准备好的无菌的培养皿中，每毫升培 养液中投加不同量的所述饵料溶液。即分别加入IO、 50、 IOO微升的饵料溶液 组成三组平行样。(3)将上述三组试样分别置于25。C恒温培养箱中培养。经12天培养后，轮虫的平 均密度可达102.7ind/mL。
对比实验
将本发明的面粉溶液与传统混合细菌作为培养轮虫的饵料时的对比实验结果如附图中图 1、图2和图3所示。
图1表示以混合细菌为饵料时轮虫的种群密度变化图，由图中可以得出，轮虫以混合细 菌为饵料的培养时可以达到最大种群密度为34.33ind/mL。图2表示本发明面粉溶液用于培养 时轮虫的种群密度变化图，由图中可以得出，轮虫以本发明面粉溶液为饵料的培养下可以达 到最大种群密度为102.7ind/mL。图3表示本发明面粉溶液用于培养轮虫与以混合细菌为饵料 时轮虫的比生长速率大小比较图，由图可以得出，以本发明面粉溶液为饵料的培养下轮虫的 比生长速率大小为0.6109d—、以混合细菌为饵料的培养下，轮虫的比生长速率大小为 0.3231d-1。
由图l， 2， 3比较得，本发明饵料溶液十分有利于蛭形轮虫种群的增长，在其培养下，轮虫 的种群密度以及比生长速率远远大于以混合细菌为饵料培养下的情况，可见，本发明作为蛭 形轮虫的饵料不仅是可行的，而且具有较好的培养效果。
权利要求
1、一种蛭形轮虫大量培养的方法，其特征在于具有以下的步骤和特征a、利用非生物饵料溶液作为蛭形轮虫生长的食物；其制备过程如下取一定量的小麦面粉作为饵料原料，首先将小麦面粉灭菌处理，再加入一定量的无菌水，小麦面粉与无菌水的重量体积比为0.75～0.85g/100mL，即每100mL的蒸馏水中加入0.75～0.85g的小麦面粉；将配置好的溶液再经超声波破碎，在超声波破碎过程中要适当的降温，以免破碎过程中产生大量的热量使小麦面粉溶液呈糊状；将破碎后的面粉溶液沉降1小时后弃去底部沉淀的面粉，以去除大粒径的面粉颗粒，并保证其粒度均匀；再次沉降24h后取其上清液，最终得到的饵料溶液即面粉悬浊液的浓度在5×106粒/mL左右，且粒径分布在0.2～0.3μm范围内；最后将培养液的pH值调节至5～7范围内；将配制好的饵料溶液保存于冰箱中待用；b、将上述制得的非生物饵料溶液加入于事先准备好的无菌的培养皿中，每毫升培养液中投加10～100μL所述饵料溶液；c、在上述培养液中接种蛭形轮虫，接种的初始密度为1ind/mL；将其置于25℃恒温培养箱中培养，培养12天后，培养皿中轮虫的密度可达100～200ind/mL。
全文摘要
本发明涉及一种蛭形轮虫的大量培养的方法，属蛭形轮虫新的培养方法及新型饵料加工及使用技术领域。本发明提供了一种用非生物饵料——小麦面粉作为饵料大量培养蛭形轮虫的方法，其特点是采用灭菌处理后的小麦面粉加入于一定量的无菌水中，小麦面粉与无菌水的重量体积比为0.75～0.85g/100mL，即每100毫升无菌水中加入0.75～0.85克的小麦面粉，然后经超声波破碎，再将其静置沉降24小时，取其上清液，调节pH值至5～7。将该饵料溶液放入事先准备好的轮虫培养液中，并置于25℃恒温培养箱中培养12天，结果轮虫的密度可达100～200ind/mL。本发明饵料来源广泛，制作方便，可简化培养过程，降低成本。
文档编号A01K67/00GK101455192SQ20091004482
公开日2009年6月17日 申请日期2009年1月4日 优先权日2009年1月4日
发明者丁国际, 汪烨蕊, 沈成媛, 薛素娇, 惠 许 申请人:上海大学