专利名称：红侧耳灰白色变异新菌株的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种灰白色红侧耳变异食用菌菌株，属于食用真菌资源的开发与利用技术领域。本菌株是一种新选育的食用真菌、观赏真菌。
背景技术：
高温型食用菌菌种资源相对较少，平菇类食用菌中有鲍鱼菇、囊盖侧耳、榆黄侧 耳、普通红侧耳等。红平菇是一种国内外没有商业化生产、研究报道较少的珍稀蕈菌。其抗 杂菌能力强、适应环境广，耐粗放栽培，菌丝体生长速率快、分解能力强，子实体产量高，具 有较高的商业开发前景。但是红平菇子实体纤维素含量极高，一般平菇纤维素含量为8% 10%，红平菇则达到15%以上，口感差，成为限制红侧耳大规模商业化栽培的主要因素。文献报道红平菇自然风干的干品含水率为6. 36% ；脂肪含量为2. 63% ；蛋白质 含量为24. 69% ；酸度为0. 1873% ；总灰份含量为9. 43% ；还原糖含量为0. 507% ；氨基 酸总含量为17.6%，其中含有人体必需的氨基酸8种中的7种，包括异亮氨酸、亮氨酸、 苯丙氨酸、赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸，以及其它几种非必需氨基酸。每IOOg子实体 分别含有维生素BIO. 032mg、维生素B20. 469mg、维生素C 0. 20mg和维生素E701. 16mg大 量元素中钾含量1292mg/100g、磷含量为1206mg/100g、钠含量为38. 06mg/100g、钙含量 为151. 44mg/100g、镁含量为262. 25mg/100g ；微量元素中锌含量为161mg/100g、铁含量为 10. 89mg/100g、铜含量为15. 28mg/100g、锰含量为1. 46mg/100g。红平菇抗杂菌能力强、适 应环境广，耐粗放栽培，菌丝体生长速率快、分解能力强，子实体产量高，具有较高的商业开 发前景。为很好地利用其优良性状，必须通过育种途径，选育不同类型的菌株，如适口性好 的低纤维菌株，高纤维含量的膳食纤维菌株，子实体产量低、菌丝体纤维素、木质素降解能 力强的秸秆降解菌株，分别进行商业化开发利用。国内目前对红平菇的需求量较少，但是随 着对红平菇研究的深入，当红平菇的经济价值被彻底发现之后，其需求量必将有大幅度的 增加。
发明内容
1.发明目的本发明的目的是提供一种灰白色红侧耳变异食用菌菌株，生产该食用 真菌子实体，为中国特有高温型食用菌、观赏真菌的大规模开发利用服务。2.技术方案灰白色红侧耳变异食用菌新菌株，拉丁学名是Pleurotus djamor (Rumph. :Fr.) Boedi jn。该菌株已于2007年1月29日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生 物中心(简称CGMCC)，保藏编号CGMCC No. 1933，原始编号200606068。在四川都江堰二王 庙公园树林中的刺楸树干上采集到原始标本，寄主植物为刺楸(树龄100年左右)，通过 菌肉组织分离得到纯菌种，用人工栽培的子实体进行孢子弹射，得到单孢菌株，单孢菌株杂 交得到数十个灰白色变异新菌株，选择其中的高产、抗高温、子实体纤维素含量低的菌株为本发明的菌株，其特征是(a)形态特征子实体颜色为稳定的灰白色，通体晶莹透明，纤维素含量5% 12%，口感好，用 于高温季节的食用菌生产。灰白色红侧耳变异菌株的菌丝体在PDA培养基上生长速度为5 6mm/d，在松针蛋 白胨葡萄糖酵母粉培养基上生长速度为6 9mm/d。菌落圆形、致密、白色、边缘放射状，气 生菌丝发达，菌丝体可以充满试管内的空间，可形成粗壮的菌丝束。子实体单生、丛生。菌 盖灰白色。菌盖幼时勺形或贝壳形，边缘内卷，后逐渐展开呈扇形，老后边缘上卷、波浪状， 直径3 20cm。菌肉白色，味香，纤维素含量低。菌柄侧生，长1 3cm。菌褶延生，中密， 白色，有分叉。菌丝有锁状联合。有缘囊体，无侧囊体。孢子印粉红色。孢子椭圆形、腊肠 形，光滑，6 10μπιΧ4 5μπι，淡红色。(b)生理、生化特征灰白色红侧耳菌株菌丝生长的温度范围是3 45°C，最适温度25 30°C;子实体 分化的温度范围18 35°C，最适温度20 30°C，是典型的高温型食用菌；孢子萌发的温度 范围是10 40°C，最适温度25°C ；菌丝能在pH 3 12范围内生长，最适pH6. 5 7. 5。(c)营养需求碳源、氮源的种类及碳氮比对灰白色红侧耳菌株菌丝生长、子实体分化与发育的 有显著影响。该菌能利用纤维素、木质素、淀粉、葡萄糖、蔗糖、果糖、玉米粉、乳糖和甘露糖 作碳源，其中葡萄糖和蔗糖为碳源生长势强、速度快；蛋白胨、酵母粉/膏、硫酸铵、硝酸铵、 尿素、黄豆粉、玉米粉和麦麸均可作为氮源，在麦麸、酵母粉等上生长速度快，长势旺盛；能 在c/N = 5/1 50/1的范围内生长，C/N为25/1 30/1时生长速度最快。在完全黑暗的 条件下不能形成子实体，需要lOOLux以上的散射光照射才能形成子实体，子实体生长允许 阳光直射。(d)栽培条件栽培原料可以使用秸秆、木屑、棉籽壳、玉米芯，麸皮、米糠、玉米粉等，培养料含水 量60% 63%，pH为6 9。栽培季节为3 11月，出菇温度20 35°C，空气相对湿度 为70% 90%。培养料可以是未灭菌的或灭菌的培养料。栽培方式为瓶栽、袋栽、床栽、地 栽。(四)说明书附1灰白色红侧耳菌株幼嫩和成熟子实体
具体实施例方式(a)菌丝体培养方法本发明采用的琼脂培养基配方(1)麦麸汁蔗糖培养基麦麸50 100g，蔗糖或葡萄糖20g，琼脂20g，水IOOOmL, PH自然。(2)松针汁葡萄糖蛋白胨培养基松针50 100g，葡萄糖或蔗糖20g，蛋白胨2 3g，琼脂 20g，水 IOOOmL, pH 自然。
(3)马铃薯加富培养基马铃薯200g，蔗糖或葡萄糖20g，蛋白胨3 5g，酵母粉2g，琼脂 20g，水 IOOOmL, pH 自然。液体培养基上述配方中不添加琼脂。将麦麸、松针、马铃薯等植物性原料切成小段，加水1200 1300mL，煮沸20min，过 滤，去滤液1000mL。在滤液中加入琼脂加热，使琼脂全部溶解，再加入其它成分，加热溶解， 定容。分装在试管、三角瓶中，封口灭菌，冷却后存放24h，即可使用。试管菌种接种后培养在25 30°C，菌丝体长满斜面的时间一般为5 7d。液体培养用三角瓶或输液瓶，分装1/3 1/2总体积的培养液，灭菌后冷却接种， 接种量为1 % 3%。25°C震荡培养，转速120 150r/m，培养7 10d，菌丝体产量为0. 5 1. 3g/100mL，菌丝球直径0. 8 1. 5cm，发酵液透明澄清。培养15d后菌丝体开始自溶。(c)无菌子实体培养方法把长满菌丝的琼脂培养基试管或培养皿、三角瓶等放在有散射光照，温度超过 20°C的环境中，7 IOd后在琼脂培养基上形成完整的子实体。把长满菌丝体的液体培养瓶净置在室内，有散射光照，温度超过20°C的环境中， 10 20d后在液体培养基表面直接形成子实体。该类子实体是无杂菌的子实体，用于遗传学研究、育种学及分子生物学等科学研 究和食用菌、菌物学、微生物学等课程的演示教学。(c)食用子实体栽培方法本发明采用的培养料配方秸秆节(1 10cm)或粉、棉籽壳、木屑、玉米芯等75% 80%，单一组分或多组分 任意比例；麦麸或米糠25% 20%，石膏1%，磷肥1%，含水量60% 63%。将各配方中的干原料混合均勻，在加入料水比为1 1 1.2的 2%石灰水 溶液，搅拌均勻，堆积，塑料薄膜覆盖，48h发酵。加入干原料总量0. 5 %的石灰粉，搅拌均 勻，堆积12h。生料栽培将处理好的培养料装入栽培袋内或铺放在菇床上，直接接种，接种量 5% 10%。在25 28°C条件下培养，空气相对湿度为60% 70%，经过20 30d，菌丝 体长满全部培养料，3 5d后出菇。熟料栽培将处理后的培养料装瓶或装袋，经过高压或常压灭菌后再接种。在 25 28°C条件下培养，空气相对湿度为60% 70%，经过15 30d，菌丝体长满全部培养 料，3 5d后出菇。在室内或大棚、树林、竹林、露地等环境中均可以出菇。气温为10 35°C，不超过 40°C。空气相对湿度保持在70% 90%，不超过95%。一定的散射光照，良好的通气，3 5d后开始在瓶口或菌袋两端、菌袋表面等处形成子实体原基。原基长到1 2cm大后可以 直接向子实体上轻轻喷水，每天2 3次。子实体先珊瑚状，后逐渐分化菌柄和菌盖，通体 白色透明，菌盖平展后开始弹射孢子。子实体生长时间为3 10d。边缘未平展时及时进行 采收。商业化生产采收4 5批。采收的子实体可以直接食用，或40 60°C烘干24h，包装销 售食用。(d)观赏子实体生产方法生产季节每年2 3月开始。3月下旬或4月上市销售。取直径5 15cm长10 20cm的阔叶树椴木，用1 %醋酸溶液浸泡24h，再用1 %石灰水浸泡12h。装入菌袋中常压或高压灭菌，冷却后接种，25°C培养20 30天，菌丝体长 满椴木内部后脱掉菌袋，在花盆中出菇。 普通花盆用2% 3%石灰水浸泡24h以上。在盆地铺5 IOcm厚的土壤，2 5cm的干树叶，把脱袋后的椴木放于其上，表面覆盖3 5cm厚的炭渣或土壤。保持土壤水 分含量在20% 23%，5 7天后出菇，子实体生长期5 7天为观赏期。子实体老后及时 采摘，去掉培养料表面的残余菌柄，重新覆盖，10天后可出第2次。共出5 6次，子实体大 小依次变小。
权利要求
一个红侧耳灰白色变异食用菌新菌株，该菌株是一种新选育的食用真菌、观赏真菌。
2.根据权利要求1所述的新菌株，分类学上属于红侧耳种，拉丁学名是Pleurotus djamor(Rumph. :Fr.)BoediJn0具有高产、抗高温、子实体纤维素含量低的特点，其特征是 子实体颜色为稳定的灰白色，通体晶莹透明，纤维素含量5% 12%，口感好，用于高温季 节的食用菌生产。其菌丝体在PDA培养基上生长速度为5 6mm/d，在松针蛋白胨葡萄糖酵 母粉培养基上生长速度为6 9mm/d。菌落圆形、致密、白色、边缘放射状，气生菌丝发达， 菌丝体可以充满试管内的空间，可形成粗壮的菌丝束。子实体单生、丛生。菌盖表面呈灰 白色。菌盖幼时勺形或贝壳形，边缘内卷，后逐渐展开呈扇形，老后边缘上卷、波浪状，直径 3 20cm。菌肉白色，味香，纤维素含量低。菌柄侧生，长1 3cm。菌褶延生，中密，白色， 有分叉。菌丝有锁状联合。有缘囊体，无侧生囊体。孢子印粉红色。孢子椭圆形、腊肠形， 光滑，6 10μπιΧ4 5μπι，淡红色。
3.根据权利要求1所述的红侧耳灰白色变异食用菌新菌株，所述菌株的生理、生化特 征是菌丝生长的温度范围是3 45°C，最适温度25 30°C;子实体分化的温度范围18 35°C，最适温度20 30°C，是典型的高温型食用菌；孢子萌发的温度范围是10 40°C，最 适温度25°C ；菌丝能在pH 3 12范围内生长，最适pH6. 5 7. 5。
4.根据权利要求1所述的红侧耳灰白色变异食用菌新菌株，所述菌株的营养需求是 该菌能利用纤维素、木质素、淀粉、葡萄糖、蔗糖、果糖、玉米粉、乳糖和甘露糖作碳源，其中 葡萄糖和蔗糖为碳源生长势强；蛋白胨、酵母粉/膏、硫酸铵、硝酸铵、尿素、黄豆粉、玉米粉 和麦麸均可作为氮源，在麦麸、酵母粉等上生长速度快，长势旺盛；能在C/N = 5/1 50/1 的范围内生长，C/N为25/1 30/1时生长速度最快。在完全黑暗的条件下不能形成子实 体，需要lOOLux以上的散射光照射才能形成子实体，子实体生长允许阳光直射。
5.根据权利要求1所述的红侧耳灰白色变异食用菌新菌株，所述菌株的栽培条件是 可以使用秸秆、木屑、棉籽壳、玉米芯，麸皮、米糠、玉米粉等栽培原料，培养料含水量60% 63%，pH为6 9。栽培季节为3 11月，出菇温度20 35°C，空气相对湿度为70% 90%。培养料可以是未灭菌的或灭菌的培养料。栽培方式为瓶栽、袋栽、床栽、地栽。
6.根据权利要求1所述的红侧耳灰白色变异食用菌新菌株，所述菌株的菌丝体培养方 法是本发明采用的琼脂培养基配方(1)麦麸汁蔗糖培养基麦麸50 100g，蔗糖/葡萄糖20g，琼脂20g，水lOOOmL，pH自然。(2)松针汁葡萄糖蛋白胨培养基松针50 100g，葡萄糖/蔗糖20g，蛋白胨2 3g， 琼脂20g，水IOOOmL, pH自然。(3)马铃薯加富培养基马铃薯200g，蔗糖/葡萄糖20g，蛋白胨3 5g，酵母粉2g，琼 月旨20g，水IOOOmL, pH自然。液体培养基上述配方中不添加琼脂。将麦麸、松针、马铃薯等植物性原料切成小段，加水1200 1300mL，煮沸20min，过滤， 去滤液1000mL。在滤液中加入琼脂加热，使琼脂全部溶解，再加入其它成分，加热溶解，定 容。分装在试管、三角瓶中，封口灭菌，冷却后存放24h，即可使用。试管菌种接种后培养在25 30°C，菌丝体长满斜面的时间一般为5 7d。液体培养用三角瓶或输液瓶，分装1/3 1/2总体积的培养液，灭菌后冷却接种，接种量为1% 3%。25°C震荡培养，转速120 150r/m，培养7 10d，菌丝体产量为0. 5 1. 3g/100mL，菌丝球直径0. 8 1. 5cm，发酵液透明澄清。培养15d后菌丝体开始自溶。
7.根据权利要求1所述的红侧耳灰白色变异食用菌新菌株，所述菌株的无菌子实体 培养方法把长满菌丝的琼脂培养基试管或培养皿、三角瓶等放在有散射光照，温度超过 20°C的环境中，7 IOd后在琼脂培养基上形成完整的子实体。把长满菌丝体的液体培养瓶净置在室内，有散射光照，温度超过20°C的环境中，10 20d后在液体培养基表面直接形成子实体。该类子实体是无杂菌的子实体，用于遗传学研究和育种学及分子生物学等科学研究、 教学演示。
8.根据权利要求1所述的红侧耳灰白色变异食用菌新菌株，所述菌株的食用子实体栽 培方法是本发明采用的培养料配方秸秆节(1 IOcm)或粉、棉籽壳、木屑、玉米芯等75% 80%，单一成分或多成分任意 组合；麦麸或米糠25% 20%，石膏1%，磷肥1%，含水量60% 63%。将各配方中的干原料混合均勻，在加入料水比为1 1 1.2的 2%石灰水溶液， 搅拌均勻，堆积，塑料薄膜覆盖，48h发酵。加入干原料总量0. 5%的石灰粉，搅拌均勻，堆积 12h。生料栽培将处理好的培养料装入栽培袋内或铺放在菇床上，直接接种，接种量5% 10%。在25 28°C条件下培养，空气相对湿度为60% 70%，经过20 30d，菌丝体长满 全部培养料，3 5d后出菇。熟料栽培将处理后的培养料装瓶或装袋，经过高压或常压灭菌后再接种。在25 28°C条件下培养，空气相对湿度为60% 70%，经过15 30d，菌丝体长满全部培养料， 3 5d后出菇。在室内或大棚、树林、竹林、露地等环境中均可以出菇。气温为10 35°C， 不超过40°C。空气相对湿度保持在70% 90%，不超过95%。一定的散射光照，良好的通 气，3 5d后开始在瓶口或菌袋两端、菌袋表面等处形成子实体原基。原基长到1 2cm 大后可以直接向子实体上轻轻喷水，每天2 3次。子实体先珊瑚状，后逐渐分化菌柄和菌 盖，通体白色透明，菌盖平展后开始弹射孢子。子实体生长时间为3 10d。边缘未平展时 及时进行采收。商业化生产采收4 5批。采收的子实体可以直接食用，或40 60°C烘干 24h，包装销售食用。
9.根据权利要求1所述的红侧耳灰白色变异食用菌新菌株，所述菌株的观赏子实体生 产方法是生产季节每年2 3月开始。3月下旬或4月上市销售。取直径5 15cm长10 20cm的阔叶树椴木，用醋酸溶液浸泡24h，再用石灰 水浸泡12h。装入菌袋中常压或高压灭菌，冷却后接种，25°C培养20 30天，菌丝体长满椴 木内部后脱掉菌袋，在花盆中出菇。普通花盆用2 0Z0 3%石灰水浸泡24h。在盆底部铺5 IOcm厚的土壤，2 5cm的干 树叶，把脱袋后的椴木放于其上，表面覆盖3 5cm厚的炭渣或土壤。保持土壤水分含量在 20% 23%，5 7天后出菇，子实体生长期5 7天为观赏期。子实体老后及时采摘，去 掉培养料表面的残余菌柄，重新覆盖，10天后可出第2次。共出5 6次，子实体大小依次 变小。
全文摘要
本发明涉及一种食用菌新菌株，属食用真菌资源的开发利用技术领域。红侧耳灰白色变异食用菌新菌株Pleurotus djamor(Rumph.Fr.)Boedijn，是通过单孢杂交育种技术选育的一株食用菌新菌株，在CGMCC的编号是No.1933。菌种的特征在于子实体颜色为稳定的灰白色，通体晶莹透明，纤维素含量5％～12％，口感好，用于高温季节的食用菌生产。菌丝体生长较快，抗杂菌能力强，气生菌丝发达。菌丝具锁状联合。菌丝生长温度3～45℃；子实体分化温度18～35℃，是典型的高温型食用菌。栽培原料用秸秆、木屑、麸皮等。栽培季节3～11月。规模化生产的培养料不需要高压或常压灭菌，子实体产量15％～25％。本菌株是一种新选育的食用真菌，在食用菌领域、观赏真菌领域有应用价值。
文档编号C05G3/00GK101836597SQ200910058629
公开日2010年9月22日 申请日期2009年3月18日 优先权日2009年3月18日
发明者侯大斌, 张婷婷, 林琦, 竹文坤, 苏珏, 贺新生 申请人:西南科技大学