专利名称：齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法
技术领域：
本发明涉及石斛种苗的繁殖方法，更具体地说，本发明是关于齿瓣石斛无性系种 苗繁殖方法。
背景技术：
石斛是我国传统的名贵中药材，齿瓣石斛是其中的一种，目前，齿瓣石斛种苗培 育主要是以种子为外植体，利用组织培养技术获得种子实生苗，各个阶段的培养技术已基 本成熟，建立了种子有性繁殖体系，但由于种源间的显著差异，导致种苗缺乏一致性和稳定 性，更难以保持母株的优良性状。
发明内容
为了克服现有齿瓣石斛种子种苗繁殖技术上的不足，本发明提供一种齿瓣石斛无 性系种苗繁殖方法，该方法培育出的种苗不仅保持母株的优良性状，而且保持高度一致性 和稳定性。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是以齿瓣石斛优质单株为材料，以茎 段作为外植体，经消毒处理后进行诱导培养，通过培养，茎节处可以抽出若干单芽，然后对 单芽进行增殖培养、生根培养，短期内可以获得大量完整植株苗。本发明有益效果是，该方法培育出的种苗不仅保持母株的优良性状，而且保持高 度一致性和稳定性，有利于齿瓣石斛种苗的工厂化生产，同时，亦可加快品种选育研究的进程。
具体实施例方式取齿瓣石斛优质单株为材料，以茎段为外植体，具体方法包括下述步骤(1)外植 体消毒选取茎段，用75%酒精表面灭菌30 60秒，再将其置于0. 升汞溶液中消毒 10 20分钟，然后用无菌水冲洗5 6次；(2)诱导培养将茎段接种在诱导培养基上，诱 导培养基为MS+6-BA 2 4毫克/升+NAA0. 01 0. 05毫克/升+椰子汁10 50毫升/ 升+抗坏血酸0. 01 0. 05毫克/升+马铃薯汁20 50克/升+蔗糖20 40克/升， 培养时间35 40天，此时茎节处可抽出许多单芽；(3)增殖培养将单芽从茎段上切下并 转接到增殖培养基中，增殖培养基为MS+6-BA 2 4毫克/升+NAA0. 1 1毫克/升+椰 子汁10 50毫升/升+抗坏血酸0. 01 0. 05毫克/升+马铃薯汁100 150克/升+ 蔗糖20 40克/升，培养时间40 50天，此时可以诱导出大量丛生芽；(4)生根培养将 丛生芽接种子生根培养基中，生根培养基为MS+NAA0. 1 1毫克/升+IBA0. 1 1. 0毫克/ 升+椰子汁10 50毫升/升+抗坏血酸0. 01 0. 05毫克/升+马铃薯汁50 100克/ 升+香蕉泥50 100克/升+活性炭1克/升+蔗糖20 40克/升，培养时间35 40 天，生根率可达90%以上；上述各阶段培养条件为温度25 士 2°C，光照强度1500 20001x， 光照12小时/天，环境噪声小于40分贝。
权利要求
一种齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，其特征是以齿瓣石斛优质单株为材料，以茎段作为外植体，经消毒处理后进行诱导培养，茎节处抽出若干单芽，然后对单芽进行增殖培养、生根培养以获得大量完整植株苗。
2.根据权利要求1所述的齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，其特征是，外植体消毒选取 茎段，用75%酒精表面灭菌30 60秒，再将其置于0. 1 %升汞溶液中消毒10 20分钟， 然后用无菌水冲洗5 6次。
3.根据权利要求1所述的齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，其特征是，诱导培养将茎段 接种在诱导培养基上，诱导培养基为MS+6-BA 2 4毫克/升+NAA0. 01 0. 05毫克/升 +椰子汁10 50毫升/升+抗坏血酸0. 01 0. 05毫克/升+马铃薯汁20 50克/升 +蔗糖20 40克/升，培养时间35 40天。
4.根据权利要求1所述的齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，其特征是，增殖培养将单芽 从茎段上切下并转接到增殖培养基中，增殖培养基为MS+6-BA 2 4毫克/升+NAA0. 1 1 毫克/升+椰子汁10 50毫升/升+抗坏血酸0. 01 0. 05毫克/升+马铃薯汁100 150克/升+蔗糖20 40克/升，培养时间40 50天。
5.根据权利要求1所述的齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，其特征是，生根培养将丛生 芽接种于生根培养基中，生根培养基为MS+NAA0. 1 1毫克/升+IBA0. 1 1. 0毫克/升+ 椰子汁10 50毫升/升+抗坏血酸0. 01 0. 05毫克/升+马铃薯汁50 100克/升+ 香蕉泥50 100克/升+活性炭1克/升+蔗糖20 40克/升，培养时间35 40天。
6.根据权利要求3、4、5所述的齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，其特征是诱导培养、增 殖培养、生根培养等各阶段培养条件为温度25士2°C，光照强度1500 20001x，光照12小 时/天，环境噪声小于40分贝。
全文摘要
本发明公开了一种齿瓣石斛无性系种苗繁殖方法，涉及生物工程技术领域。本发明通过下述技术方案予以实现以齿瓣石斛优质单株为材料，以茎段作为外植体，经消毒处理后进行诱导培养、增殖培养、生根培养，各培养阶段温度控制在25±2℃，光照强度1500～2000lx，光照12小时/天，环境噪声小于40分贝。该方法不仅使种苗保持母株的优良性状，而且还提高了种苗繁殖系数，为齿瓣石斛工厂化生产奠定基础。
文档编号A01H4/00GK101855993SQ20091013047
公开日2010年10月13日 申请日期2009年4月11日 优先权日2009年4月11日
发明者李守岭, 李泽生, 白燕冰, 耿秀英 申请人:云南省德宏热带农业科学研究所