专利名称：美国红枫组织培养繁殖方法
技术领域：
本发明涉及植物繁殖领域，具体地说涉及美国红枫组织培养繁殖方法。
背景技术：
美国红枫又名红花槭、北方红枫、北美红枫、沼泽枫、加拿大红枫、红糖槭、猩红枫，原产于美国东北部。其树姿优美，枝叶繁茂，叶型纤秀，叶色秀丽，秋天变色最早，主色鲜红，副色橘黄，色艳如花，主要用于园林观赏和庭院绿，也是珍贵的家庭盆栽树种。美国红枫与其他彩叶植物一样，都可进行有性繁殖或无性繁殖。但采用种子繁殖的有性繁殖虽然方法简单，但繁殖系数大，生长周期长，不利于红枫的推广和生产。无性繁殖中采用嫁接繁殖或扦插繁殖，虽然产苗快，成苗快，但生根率始终不高，根系成型差，即使成活了，后期的培养和生长依然缓慢。
发明内容
发明目的本发明的目的是提供一种增值效果好的组织培养美国红枫的方法。技术方案为了实现上述发明目的一种美国红枫组织培养繁殖方法，其特征在于以美国红枫带3飞个芽的嫩茎作为外植体，消毒后切段并接种到MS+BA+NAA的培养基中，适宜条件下进行组织诱导培养，光照-黑暗的时间比例为3:1。本发明采用MS+BA+NAA的培养基组合，再加上一定的琼脂和蔗糖，从无机物、氮源、碳源，以及生长素各个条件都满足组织培养的条件。其中，NAA指萘乙酸。MS培养基是现在组织培养中常用到的无机物培养基，该培养基中含有大量的矿物质，满足外植体对无机物的需求。BA培养基是细胞生长素，诱导植物愈伤组织生根，发芽，分化。所述培养基为MS+2. Omg/L 6-BA+O. 2mg/L NAA培养基，每升培养基中加入20 25g蔗糖和l(Tl5g琼脂。所述培养菌在加入固化剂前采用121摄氏度高压蒸汽灭菌20分钟。其中NAA在蒸汽灭菌之后再加入。所述外植体是以健康的美国红枫带3飞个芽的嫩茎作为外植体。所述外植体的消毒方法是将外植体方法如4摄氏度50%的丙醇漂洗45 60秒，再用10%次氯酸消毒2 2. 5分钟，然后用10%双氧水再消毒2 2. 5分钟，再用无菌水清洗多遍。所述外植体切段后每段长0. 5^1. 4cm。作为本发明的优选方案，所述外植体的长度为 0. 8cm。所述组织诱导培养是在pH 5. 8^6. 2, 22^25 °C的环境下进行，光照强度为1000^2000勒克斯。作为本发明的优选方案，所述pH为6，光照强度为1500勒克斯。有益效果组织培养快繁是一种有效的繁殖方式，本发明通过建立科学的培养基，辅以合理的技术手段，实现了增值效果好，质量高的组织培养繁殖。利用本发明的培养基培养外植体不会出现外植体褐化的情况，从而提高了组织的存活率。具体实施例方式以美国红枫带3飞个芽的嫩茎作为外植体，消毒后切段并接种到MS+BA+NAA的培养基中，适宜条件下进行组织诱导培养，光照-黑暗的时间比例为3:1。本发明采用MS+BA+NAA的培养基组合，再加上一定的琼脂和蔗糖，从无机物、氮源、碳源，以及生长素各个条件都满足组织培养的条件。培养基为MS+2. Omg/L 6-BA+O. 2mg/L NAA培养基，每升培养基中加入20 25g蔗糖和l(Tl5g琼脂。培养菌在加入固化剂前采用121摄氏度高压蒸汽灭菌20分钟。其中NAA在蒸汽灭菌之后再加入。外植体是以健康的美国红枫带3飞个芽的嫩茎作为外植体。外植体的消毒方法是将外植体方法如4摄氏度50%的丙醇漂洗45 60秒，再用 10%次氯酸消毒2 2. 5分钟,然后用10%双氧水再消毒2 2. 5分钟，再用无菌水清洗多遍。外植体切段后每段长0. 5^1. 4cm。作为本发明的优选方案，外植体的长度为
0.8cm。组织诱导培养是在pH 5. 8飞.2，22^250C的环境下进行，光照强度为1000 2000勒克斯。作为本发明的优选方案，PH为6，光照强度为1500勒克斯。下面通过对比试验证明本发明的增值效果。上述实施例为试验组，对照组与试验组的步骤相似，每升培养基中加入20g蔗糖和IOg琼脂，在pH为6，22 25°C环境下，光照为1500勒克斯，进行诱导培养，所不同的在于培养基是 MS+0. 6mg/L 6-BA+O. 3mg/L IAA, IAA 是吲哚乙酸。对照组经过I个月的培养，其中褐化苗数达到总量的36%，而本试验组没有出现褐化苗。另一方面，试验组的生根率为89. 5%，而对照组的生根率为82. 5%。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
权利要求
1.一种美国红枫组织培养繁殖方法，其特征在于以美国红枫带3飞个芽的嫩茎作为外植体，消毒后切段并接种到MS+BA+NAA的培养基中，适宜条件下进行组织诱导培养，光照-黑暗的时间比例为3:1。
2.根据权利要求I所述的一种美国红枫组织培养繁殖方法，其特征在于所述培养基为MS+2. Omg/L 6-BA+O. 2mg/L NAA培养基，每升培养基中加入20 25g蔗糖和10 15g琼脂。
3.根据权利要求I所述的一种美国红枫组织培养繁殖方法，其特征在于所述外植体是以健康的美国红枫带3飞个芽的嫩茎作为外植体。
4.根据权利要求I或3所述的一种美国红枫组织培养繁殖方法，其特征在于所述外植体的消毒方法是将外植体方法如4摄氏度50%的丙醇漂洗45 60秒，再用10%次氯酸消毒2 2. 5分钟,然后用10%双氧水再消毒2 2. 5分钟,再用无菌水清洗多遍。
5.根据权利要求I所述的一种美国红枫组织培养繁殖方法，其特征在于所述外植体切段后每段长0. 5^1. 4cm0
6.根据权利要求I所述的一种美国红枫组织培养繁殖方法，其特征在于所述组织诱导培养是在pH 5. 8^6. 2，22 25°C的环境下进行，光照强度为1000 2000勒克斯。
全文摘要
本发明公开了一种美国红枫组织培养繁殖方法，该方法以美国红枫带3~6个芽的嫩茎作为外植体，消毒后切段并接种到MS+BA+NAA的培养基中，适宜条件下进行组织诱导培养，光照-黑暗的时间比例为3:1。本发明通过建立科学的培养基，辅以合理的技术手段，实现了增值效果好，质量高的组织培养繁殖。利用本发明的培养基培养外植体不会出现外植体褐化的情况，从而提高了组织的存活率。
文档编号A01H4/00GK102715087SQ20121022166
公开日2012年10月10日 申请日期2012年6月30日 优先权日2012年6月30日
发明者吴昌海 申请人:吴昌海