专利名称:中药半夏蛋白的生物改性工艺的制作方法
技术领域:
本发明属于生物技术领域,尤其是涉及一种中药半夏蛋白的生物改性工艺。
背景技术:
半夏是天南星科植物半夏的块茎。半夏蛋白是一组分子量、空间结构及生物特征与理化特征都极为相似的蛋白质。一般认为半夏辛、温、有毒,入脾、胃经,具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结等作用。由于半夏有毒,常采用清洗浸漂;生姜切片煎汤;甘草片煎汤,半夏粬制等方法炮制去毒。但去毒的同时也将半夏蛋白质变性,因此半夏的药效降低。
201110147028. 4公开了一种半夏及其加工方法,该方法是将新鲜半夏经脱皮清洗,置于pH=l-6的酸性溶液中浸泡,冲洗,干燥即得。ZL201010175131. 5公开了一种中药半夏的炮制方法,该方法是用65_80%乙醇浸泡半夏而成。200810038228. 4公开了一种半夏饮片的制备方法,该方法是将半夏浸白矾溶液,烘干,拌入生姜汁,再烘干,筛选即得半夏饮片。ZL200610200918. 6公开了半夏提取物及其制备方法、药物组合物和用途,该方法是将新鲜半夏晾干,粉碎,有机溶剂萃取或水加热萃取,提取液浓缩烘干得半夏提取物。200610200920. 3公开了半夏水溶性指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱,本方法包括供试品溶液制备,对照品制备,高效液相色谱的测定,计算机数据和图谱处理得到半夏水溶性成分标准指纹图谱。长期以来,中药工作者研究中药用途的同时,用多种方法炮制半夏,但炮制过程也将药效降低,浪费了资源,因此,即降低半夏毒性,又充分利用中药资源是需要研究的课题。
发明内容
本发明的目的是提供一种能够既能降低半夏的毒性又能提高其药用范围的中药半夏蛋白的生物改性工艺。本发明的目的是通过以下技术方案实现的
I、中药材半夏粉碎与灭菌;2、谷物糠与半夏粉末混合并生成半夏蛆卵;3、半夏幼蛆培殖;4、半夏蛆虫培育;5、蛆虫分离、清理及灭活;6、蛆虫干燥;7、蛆虫包装。具体步骤如下(O中药材半夏粉碎后进行灭菌处理;
(2)生成半夏蛆卵配制半夏蛆卵培养液,保持温度25-55°C,时间48-240h,生成虫卵;
(3)半夏幼蛆培殖配制半夏幼蛆培养液,分装至15-25个三角烧瓶中,每个瓶中装入O. 1-1. Og前面培殖的虫卵,分别固定在摇床上,摇床l-100r/min,培殖12_48h,生成半夏幼蛆;
(4)半夏蛆虫培育配制半夏幼蛆培育液,加入上述含幼蛆培养液进行培育,培育出的半夏蛆虫由乳白色变为乳黄色,培育过程完成,培育参数pH=5. 5-8,搅拌速度l-20r/min,温度 25-45°C,通气量 O. 5-20L/min,时间 72_168h ;
(5)蛆虫分离、清理及灭活将培育液及培育出的半夏蛆虫一起放入分离机中虫液分离,用纯净水漂洗后再用热纯净水喷淋半夏蛆虫,半夏蛆虫被灭活;
(6)蛆虫干燥灭活的半夏蛆虫干燥,得到半夏蛆虫成品;
(7)干燥的半夏蛆虫用铝塑真空包装袋包装。中药半夏,味辛辣,麻舌而刺喉,是由半夏蛋白作用所致,通过生物改性,分子量由40KDa变为82Kda,特异甘露糖结合的活性蛋白经过重组蛋白后,等电点为8. 6,蛋白质氮含量13. 1%,脂肪含量O. 20%。取20. Og生半夏粉碎过120目筛,加水400mL煎IOmin成混悬液,取其上述混悬液喂食10只小鼠,每只服用10mL,20min后小鼠喉部有明显水肿和充血。半夏蛋白改性后,粉 碎喂食小鼠,每只每次O. 5-1. 0g,没有任何副作用。本发明以中药半夏为原材料,经过蛆种繁殖,幼蛆培殖及蛆虫培养,生成的半夏蛆虫不仅保留了半夏的药用功效,而且降低了半夏的毒性,扩大了半夏的药用范围。
具体实施例方式具体实施方式
一本实施方式的中药半夏蛋白的生物改性工艺包括如下步骤
(1)IOOOg中药半夏用常温膨化装置(ZL200520108339. X)膨化粉碎并用孔径O. 1-1. Omm的筛子分筛,收集筛下粉末状半夏,置于微波炉中以915 2450MHz、500_1000W加热处理I-IOmin灭菌;
(2)10. Og灭菌半夏加入O. 5-2L去离子水搅拌后形成半夏糊状物,加入20-50g麦麸、O. 1-0. 5gK2HP04&0. 5 2g蛋白胨搅拌均匀,保持温度25 38°C,时间48_240h,生出虫卵,用孔径O. 筛子分筛出虫卵备用;
(3)取IOOg 半夏粉、2-5g 葡萄糖、O. 2-1. Og 蛋白胨、O. 2-1. Og ΚΗ2Ρ04、O. 01-0. 05gMgS04,加入O. 5-1. OL去离子水,加热80 100 °C,时间10_30min,冷却至25-35°C,分装至15-20个三角烧瓶中,每个瓶中装入O. 1_0. 5g前面培殖的虫卵,分别固定在摇床上,摇床l-100r/min,培殖12_48h,生成半夏幼蛆;
(4)取500-800g 半夏粉、20-100g 葡萄糖、O. 5g_10g 蛋白胨、10_20g KH2PO4,O. 1-0. 5gNaCl,加入2-5L去离子水混合均匀,加热80-100°C,时间10_30min,然后冷却至25-35°C,加入含幼蛆培养液O. 5-1L进行培育,培育的半夏蛆虫由乳白色变为乳红色,培育过程完成;
培育参数;PH=5. 5-8,搅拌速度10-20r/min、温度25-45°C、通气量10_20L/min、时间72-168h ;
(5)将培养液及培育出的半夏蛆虫放入离心机中以转速550-1250r/min虫液分离;
(6)用10-20L纯净水漂洗半夏蛆虫2-3次,并用80-100°C热水喷淋半夏蛆虫1-lOmin,半夏蛆虫被灭活;
(7)灭活的半夏蛆虫用真空冷冻烘干机在温度_30°C 30°C,真空度5(T200KPa,时间5-25h,干燥至含水分5 8%得到成品。(8)干燥的半夏蛆虫用铝塑真空包装袋包装。
具体实施方式
二 本实施方式的中药半夏蛋白的生物改性工艺包括如下步骤
(1)IOOOg干燥半夏用粉碎机以250-1250r/min粉碎至O. 05-0. 5mm,并用O. 05-0. 2mm孔径筛子分筛,收集粉末状物料;
(2)粉末状物料加入5-20L纯净水搅拌均匀成糊状物;
(3)糊状物在80-120°C杀菌10-30min,降温至25_30°C备用;
(4)取IOOg谷糠、20-50g糊状物、5-10g蛋白胨、5-10gKH2PO4混合均匀,喷洒10_15mL纯净水,保持温度25-55°C,时间48-120h,生成虫卵,用孔径O. 1-2. Omm筛子筛出虫卵备用;
(5)取200-300g半夏糊状物、5-10g酵母抽提粉、2_5gNaCl、l_2mL氨水,加入O.5-1. OL 纯净水混合均匀,分装于20-25个三角瓶中,每瓶分别装入O. 2-1. Og前面培殖的虫卵,摇床
1-10次/min,培育12-48h,生成含幼蛆培养液;
(6)5-8L去离子水中加入1000-2000g半夏茎块粉、20-80g酵母抽提粉、2-5gK2S04、O. 01-0. 05gNaCl、20-100gNa2HP04、0· 01-0. 05gCaCl2,搅拌均匀成培养液,用 10000-15000 高斯磁感强度处理培养液3-5min,处理2次后加入含幼蛆培养液500-1OOOmL进行培育,培育出的半夏蛆虫由乳白色变为乳黄色,培育过程完成;
培育参数PH=5. 5-8,搅拌速度l-10r/min。温度25_35°C,通气量O. 5_20L/min,时间72-148h ;
(7)将培育液及培育出的半夏蛆虫一起放入分离机中以转速550-1250r/min虫液分离,用10-20L纯净水漂洗2-3次,用80-100°C热纯净水喷淋半夏蛆虫l_10min,半夏蛆虫被灭活;
(8 )灭活的半夏蛆虫用真空冷冻干燥机在温度-3(Γ30 V、时间12-24h、真空度
10-100kPa、干燥至含水分5-8%得到半夏蛆虫成品;
(9)半夏蛆虫用铝塑真空包装袋真空包装。
权利要求
1.中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述生物改性工艺包括如下步骤 (1)中药材半夏粉碎后进行灭菌处理; (2)生成半夏蛆卵配制半夏蛆卵培养液,保持温度25-55°C,时间48-240h,生成虫卵; (3)半夏幼蛆培殖配制半夏幼蛆培养液,分装至三角烧瓶中,每个瓶中装入前面培殖的虫卵,分别固定在摇床上,摇床l-100r/min,培殖12_48h,生成半夏幼蛆; (4)半夏蛆虫培育配制半夏幼蛆培育液,加入上述含幼蛆培养液进行培育,培育出的半夏蛆虫由乳白色变为乳黄色,培育过程完成,培育参数pH=5. 5-8,搅拌速度l-20r/min,温度 25-45°C,通气量 0. 5-20L/min,时间 72_168h ; (5)蛆虫分离、清理及灭活将培育液及培育出的半夏蛆虫一起放入分离机中虫液分离,用纯净水漂洗后再用热纯净水喷淋半夏蛆虫,半夏蛆虫被灭活; (6)蛆虫干燥灭活的半夏蛆虫干燥,得到半夏蛆虫成品。
2.根据权利要求I所述的中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述半夏蛆卵培养液由10. Og半夏、0. 5-2L去离子水、20-50g麦麸、0. 1-0. 5gK2HP04及0. 5 2g蛋白胨混合rfu 。
3.根据权利要求I所述的中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述半夏蛆卵培养液由IOOg谷糠、20-50g半夏糊状物、5-10g蛋白胨、5-10g KH2PO4混合而成。
4.根据权利要求I所述的中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述半夏幼蛆培养液由 IOOg 半夏粉、2-5g 葡萄糖、0. 2-1. Og 蛋白胨、0. 2-1. Og KH2P04、0. 01-0. 05gMgS04、0.5-1. OL去离子水混合而成。
5.根据权利要求I所述的中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述半夏幼蛆培养液由200-300g半夏糊状物、5-10g酵母抽提粉、2-5gNaCl、l-2mL氨水、0. 5-1. OL纯净水混合而成。
6.根据权利要求I所述的中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述半夏幼蛆培育液由 500-800g半夏粉、20-100g葡萄糖、0. 5g_10g蛋白胨、10_20g KH2P04、0. 1-0. 5gNaCl、2-5L去离子水混合而成。
7.根据权利要求I所述的中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述半夏幼蛆培育液由5-8L去离子水、1000-2000g半夏茎块粉、20_80g酵母抽提粉、2_5gK2S04、0.01-0. 05gNaCl、20-100gNa2HP04、0. 01-0. 05gCaCl2 混合而成。
8.根据权利要求I所述的中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述培育液及培育出的半夏蛆虫一起放入分离机中以转速550-1250r/min虫液分离,用10-20L纯净水漂洗2-3次,用80-100°C热纯净水喷淋半夏蛆虫1-lOmin,半夏蛆虫被灭活。
9.根据权利要求I所述的中药半夏蛋白的生物改性工艺,其特征在于所述灭活的半夏蛆虫用真空冷冻干燥机在温度-3(T30°C、时间12-24h、真空度10-100kPa、干燥至含水分5-8%得到半夏蛆虫成品。
全文摘要
中药半夏蛋白的生物改性工艺,属于生物技术领域。本发明的目的是提供一种能够既能降低半夏的毒性又能提高其药用范围的中药半夏蛋白的生物改性工艺。本发明的目的是通过以下技术方案实现的1、中药材半夏粉碎与灭菌;2、谷物糠与半夏粉末混合并生成半夏蛆卵;3、半夏幼蛆培殖;4、半夏蛆虫培育;5、蛆虫分离、清理及灭活;6、蛆虫干燥;7、蛆虫包装。本发明以中药半夏为原材料,经过蛆种繁殖,幼蛆培殖及蛆虫培养,生成的半夏蛆虫不仅保留了半夏的药用功效,而且降低了半夏的毒性,扩大了半夏的药用范围。
文档编号A01K67/033GK102792922SQ20121031554
公开日2012年11月28日 申请日期2012年8月31日 优先权日2012年8月31日
发明者徐华民, 赵荣华, 赵艳琨, 徐萌 申请人:哈尔滨工业大学