专利名称：一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法
技术领域：
本发明属于植物无性快繁技术领域，涉及继代芽育苗方法，尤其是涉及一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法。
背景技术：
任豆(Zeniainsignis)又名翅荚木，是苏木科落叶乔木，为我国特有树种，而且是稀有树种。任豆具有生长迅速、萌芽力强、根系穿透力强、适应性强等特点，分布于中亚热带与南亚热带之间的广西、广东、云南、湖南和贵州等省(区)，是西南和华南地区生态公益林建设中的一个重要树种，且成为石质山地造林、植被恢复重建的首选乡土树种之一。目前，任豆的繁殖方式主要有种子繁殖、扦插繁殖和组培繁殖三种。种子繁殖属于有性繁殖，遗传不稳定，培育苗木的质量差异较大，不利于良种的推广。扦插繁殖和组培繁 殖同属于无性繁殖，可以保持良种的优良性状，是目前应用范围较广的繁殖方式。扦插繁殖受季节影响大，要选择在冬末春初，穗条尚未萌芽前进行扦插较好，此时扦插有利于获得较高的生根成活率，扦插后40 50天开始生根[I]，生根时间较长，同时要求采用I 2年生的老枝条为插条较好，如果采用当年生嫩枝(顶芽)作插条，很难生根成活[I]。因此，为获得适宜扦插的老枝条，采穗圃至少要经过3年时间才能满足采穗要求，繁殖周期过长，繁殖系数不高，并且扦插又受到季节的限制，延迟良种的推广时机。组培繁殖受季节和地域的影响小，瓶内继代培养增殖速度快，继代芽生长快、宜生根、宜萌发，在合适的条件下，继代芽在生根培养基中培养10天左右即可生根[2] [3]，是较好的无性繁殖方法。但是，传统的组培繁殖在继代培养后，要经过生根培养的步骤，让组培继代芽在瓶内的培养基中生根，然后再移栽至基质中，工序复杂，瓶内生根培养要求严格的无菌操作才能保证育苗质量，而且成本相对较高，加之移栽培养，更需消耗较多的人力物力。对于任豆这种生长迅速、易生根的树种，其组培无性繁殖方法仍有改进的空间。参考文献[I],潘月芳，郝海坤，曹艳云，周全连，黄志玲，陆国导，任豆扦插育苗试验，林业科技开发 2006，20 (6):65 66[2],袁德义，邹锋，何小勇，帅波，龙洪旭，翅荚木组培快繁技术的研究，中南林业科技大学学报，2010. 30 (6) :60 63[3],邱运亮，翅荚木试管苗快速繁殖技术的研究，林业科技开发，2002，16 (6)14 1
发明内容
本发明的目的为了克服现有任豆无性繁殖方法的不足，提高繁殖速度，缩短育苗周期，提高育苗成活率并降低成本，而提供一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法。本发明的技术方案是利用任豆组培继代芽生长快、宜生根、宜萌发的特点，以组培方式繁殖继代芽，选用继代芽作为穗条经促根剂处理后，直接扦插至基质中，在经过育苗培养形成完整植株的任豆快速育苗方法。本发明是这样实现的一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法，包括任豆组培继代芽培养、基质准备、扦插、育苗和出圃5个步骤，其特征在于采用组培继代芽瓶外生根与扦插育苗两个步骤合二为一的方法，先以常规方法组培繁殖任豆组培继代芽，再选取任豆组培继代芽作为插穗，经促根剂处理并扦插至红心土基质中，育苗培养得到造林木苗，其操作步骤如下(I)组培继代芽培养选择健壮无病害任豆植株树冠外围中上部当年生的带有腋芽的嫩枝为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行增殖培养；(2)基质准备选择红心土做为基质，用碎土机粉碎后过80 100目筛，装入
7X 9cm内深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用3g/L 5g/L的高锰酸钾溶液消毒 24 36h，消毒后清水淋透基质及清洗药物备用；(3)扦插剪取生长健壮的继代芽作为穗条，将穗条剪切端用促根剂处理后，垂直插入塑料杯的基质中，插入深度占整个穗条的1/4 1/3，扦插后用清水淋透基质，扦插季节为当年9月至次年5月；(4)育苗育苗床上方用白色塑料薄膜搭建50 70cm高的保湿小棚，再盖上遮荫度75% 85%的遮荫网，培育扦插苗期间按常规方法淋水、除草、施肥和病虫害防治；(5)出圃苗高50cm以上，无病虫害出圃造林。以上步骤(3)所述的穗条是选择高> 5cm的继代芽，洗去培养基，并在末端节下3mm处剪切。以上步骤(3)所述的促根剂处理是将穗条剪切端浸泡在含有O. 3mg/L O. 5mg/LABT6的MS液体培养基中，浸泡部分占整个穗条长度的1/5 1/4，浸泡处理40 60min后清水冲洗处理用于扦插。本发明与现有技术相比的有益效果和显著进步(I)本发明的方法利用任豆组培继代芽宜生根、宜萌发，且生长快的特点，以任豆组培继代芽为插穗，经促根剂处理后的插穗扦插至红心土基质中，在搭建的小棚内培养下形成完整植株，扦插培养15 20天后开始生根，生根成活率高，达到85 95%。(2)本发明的方法直接将任豆组培芽作为插穗进行瓶外扦插，将组培苗的生根与移栽合并在一个步骤中，不需要在瓶内培养至生根再移栽，相比与传统的组培无性繁殖方法，进一步缩短了育苗时间，同时简化了工序，降低了成本，有助于在短期内实现规模化培育任豆组培苗。(3)本发明的方法选取任豆组培继代芽为插穗，采用组培的方法无性繁殖插穗，相比于传统采穗圃培育插穗的育苗方法，占地少，不受季节和地域限制，繁殖速度大大提高，且培育缩短周期，实现快速繁殖、规模培育。(4)扦插中应用含有O. 3mg/L O. 5mg/L ABT6的MS液体培养基作为促根剂，穗条浸泡处理40 60min，较长的浸泡时间可以加强促根剂的生根作用。而相比于传统的用水做为促根剂的溶剂，本方法中选用MS液体培养基作为促根剂的溶剂，可以避免在较长的浸泡处理中穗条受到组织内外离子浓度不平衡造成的影响，有助于穗条在处理后仍保持良好的状态利于扦插。
具体实施例方式下面结合实施例，对本发明的一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法进一步描述。实施例I :选择健壮无病害任豆植株树冠外围中上部当年生的带有腋芽的嫩枝为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养。在10月份时进行扦插，选择红心土做为基质，碎土机粉碎后过80 90目筛，装入7 X 9cm内深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用3g/L的高锰酸钾溶液消毒24h，消毒后清水淋透基质及清洗药物；选择生长健壮，高> 5cm的继代芽作为穗条，洗去培养基后，在末端节下3mm处剪切，将穗条末端浸泡在含有O. 3mg/L ABT6的MS液体培养基中，浸泡部分占整个穗条长度的1/5 1/4，浸泡处理50min后清水冲洗，垂直插入消毒处理后的基质杯中，插入深度占整个穗条的1/4 1/3，扦插当天扦插结束后，清水淋透基质，上方 用白色塑料薄膜搭建60cm高的保湿小棚，再盖上遮荫度75% 85%的遮荫网，棚内温度控制在15°C 35°C，湿度控制在80% 90%，及时淋水补充水分，温度过高要掀开薄膜通风降温。育苗20天后，可每天掀开薄膜通风60min。育苗20天后，扦插苗生根成活率87%。扦插苗继续培养期间及时淋水、除草、施肥并注意病虫害防治，苗高50cm以上，无病虫害可出圃造林。实施例2 选择健壮无病害任豆植株树冠外围中上部当年生的带有腋芽的嫩枝为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养。在3月份时进行扦插，选择红心土做为基质，碎土机粉碎后过90 100目筛，装入7 X 9cm内深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用5g/L的高锰酸钾溶液消毒36h，消毒后清水淋透基质及清洗药物；选择生长健壮，高> 5cm的继代芽作为穗条，洗去培养基，在末端节下3mm处剪切后，将穗条末端浸泡在含有O. 4mg/L ABT6的MS液体培养基中，浸泡部分占整个穗条长度的1/5 1/4，浸泡处理50min后清水冲洗，垂直插入消毒处理后的基质杯中，插入深度占整个穗条的1/4 1/3，扦插当天扦插结束后，清水淋透基质，上方用白色塑料薄膜搭建60cm高的保湿小棚，再盖上遮荫度75% 85%的遮荫网，棚内温度控制在15°C 35°C，湿度控制在80% 90%，及时淋水补充水分，温度过高要掀开薄膜通风降温。育苗20天后，可每天掀开薄膜通风40min。育苗18天后，扦插苗生根成活率93%。扦插苗继续培养期间及时淋水、除草、施肥并注意病虫害防治，苗高50cm以上，无病虫害可出圃造林。实施例3:选择健壮无病害任豆植株树冠外围中上部当年生的带有腋芽的嫩枝为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养。在4月份时进行扦插，选择红心土做为基质，碎土机粉碎后过80 100目筛，装入7 X 9cm内深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用5g/L的高锰酸钾溶液消毒24h，消毒后清水淋透基质及清洗药物；选择生长健壮，高> 5cm的继代芽作为穗条，洗去培养基，在末端节下3mm处剪切后，将穗条末端浸泡在含有O. 5mg/L ABT6的MS液体培养基中，浸泡部分占整个穗条长度的1/5 1/4，浸泡处理50min后清水冲洗，垂直插入消毒处理后的基质杯中，插入深度占整个穗条的1/4 1/3，扦插当天扦插结束后，清水淋透基质，上方用白色塑料薄膜搭建60cm高的保湿小棚，再盖上遮荫度75% 85%的遮荫网，棚内温度控制在15°C 35°C，湿度控制在80% 90%，及时淋水补充水分，温度过高要掀开薄膜通风降温。育苗20天后，可每天掀开薄膜通风60min。育苗15天后，扦插苗生根成活率91%。扦插苗继续培养期间及时淋水、除草、施肥并注意病虫害防治，苗高50cm以上，无病虫害可出圃造林。实施例4 选择健壮无病害任豆植株树冠外围中上部当年生的带有腋芽的嫩枝为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行继代增殖培养。在12月份时进行扦插,选择红心土做为基质,碎土机粉碎后过80 100目筛，装入7 X 9cm内深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用5g/L的高锰酸钾溶液消毒36h，消毒后清水淋透基质及清洗药物；选择生长健壮，高> 5cm的继代芽作为穗条，洗去培养基，在末端节下3mm处剪切后，将穗条末端浸泡在含有O. 5mg/L ABT6的MS液体培养基中， 浸泡部分占整个穗条长度的1/5 1/4，浸泡处理50min后清水冲洗，垂直插入消毒处理后的基质杯中，插入深度占整个穗条的1/4 1/3，扦插当天扦插结束后，清水淋透基质，上方用白色塑料薄膜搭建60cm高的保湿小棚，再盖上遮荫度75% 85%的遮荫网，棚内温度控制在15°C 35°C，湿度控制在80% 90%，及时淋水补充水分，温度过高要掀开薄膜通风降温。育苗25天后，可每天掀开薄膜通风40min，育苗20天后，扦插苗生根成活率85%。扦插苗继续培养期间及时淋水、除草、施肥并注意病虫害防治，苗高50cm以上，无病虫害可出圃造林。
权利要求
1.一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法，包括任豆组培继代芽培养、基质准备、扦插、育苗和出圃5个步骤，其特征在于采用组培继代芽瓶外生根与扦插育苗两个步骤合二为一的方法，先以常规方法组培繁殖任豆组培继代芽，再选取任豆组培继代芽作为插穗，经促根剂处理并扦插至红心土基质中，育苗培养得到造林木苗，其操作步骤如下 (1)组培继代芽培养选择健壮无病害任豆植株树冠外围中上部当年生的带有腋芽的嫩枝为外植体，消毒接种至无菌培养基进行芽诱导培养，获得无菌芽后，将无菌芽转移到继代培养基上进行增殖培养； (2)基质准备选择红心土做为基质,用碎土机粉碎后过80 100目筛,装入7X9cm内深IOcm的塑料杯中，置于育苗床上，扦插前用3g/L 5g/L的高锰酸钾溶液消毒24 36h，消毒后清水淋透基质及清洗药物备用； (3)扦插剪取生长健壮的继代芽作为穗条，将穗条剪切端用促根剂处理后，垂直插入塑料杯的基质中，插入深度占整个穗条的1/4 1/3，扦插后用清水淋透基质，扦插季节为当年9月至次年5月； (4)育苗育苗床上方用白色塑料薄膜搭建50 70cm高的保湿小棚，再盖上遮荫度75% 85%的遮荫网，培育扦插苗期间按常规方法淋水、除草、施肥和病虫害防治； (5)出圃苗高50cm以上，无病虫害出圃造林。
2.根据权利要求I所述的一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法，其特征在于步骤(3)所述的穗条是选择高> 5cm的继代芽，洗去培养基，并在末端节下3mm处剪切。
3.根据权利要求I所述的一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法，其特征在于步骤(3)所述的促根剂处理是将穗条剪切端浸泡在含有O. 3mg/L O. 5mg/L ABT6的MS液体培养基中，浸泡部分占整个穗条长度的1/5 1/4，浸泡处理40 60min后清水冲洗处理用于扦插。
全文摘要
本发明公开了一种任豆组培继代芽瓶外扦插育苗方法，是采用组培继代芽瓶外生根与扦插育苗两个步骤合二为一的方法，先以常规方法组培繁殖任豆组培继代芽，再选取任豆组培继代芽作为插穗，经促根剂处理并扦插至红心土基质中，育苗培养得到造林木苗出圃。本方法采用任豆组培继代芽直接作为穗条进行瓶外扦插，繁殖速度快，且不受季节和地域限制；同时瓶外生根与扦插育苗两个步骤合二为一，方法简单、操作容易，扦插培养15～20天后开始生根，并且成活率高，生根成活率85～95%。本方法克服了现有任豆无性繁殖方法的不足，缩短育苗周期，提高育苗成活率，降低了育苗成本，有利于加快推进任豆无性系育苗的发展。
文档编号A01G1/00GK102823414SQ201210345948
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月18日 优先权日2012年9月18日
发明者陈博雯, 蔡玲, 刘海龙, 陈晓明, 覃子海, 王鹏良 申请人:广西壮族自治区林业科学研究院