一种利用野生活树桩栽培桑黄的方法

一种利用野生活树桩栽培桑黄的方法
【专利摘要】一种利用野生活树桩栽培桑黄的方法，步骤如下：第一步，按传统的方法制作母种、原种、栽培种；第二步，培养桑树苗，栽培上100亩-1000亩的桑树林，待桑树长到直径达10cm粗时，用刀把1/5的桑树皮削去，既可生长又不至于死树；第三步，待削去的树皮处木质部有表面干燥时，用皮带冲或电钻打孔5.5-6cm深，孔与孔之间间隔16-18cm，然后把桑黄菌种接入孔中，用黄泥封口；一次接种，可摘桑黄数十年，直到桑树老死腐烂。本发明可以充分利用林地资源栽培桑黄产品，简单易行，产出的桑黄个体大，可以大量人工栽培，充分满足市场的需求。
【专利说明】一种利用野生活树粧栽培桑黄的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种栽培桑黄的方法，尤其涉及一种利用野生活树桩栽培桑黄的方法，属于中药培育【技术领域】。
【背景技术】
[0002]桑黄，猢狲眼、桑耳、针层孔菌，子实体无柄，菌盖扁半球形或马蹄形，2-12*3-21厘米，厚1.5-10厘米，木质，浅肝褐色至暗灰色或黑色，老时常龟裂，无皮壳，初期有细微绒毛，后变无毛，有同心环棱.边缘钝，深肉桂色至浅咖啡色，下侧无子实层，菌肉深咖啡色，硬，木质.菌管与菌肉近同色，多层，但层次不明显，年老的菌管层充满白色菌丝.管口锈褐色至酱色，圆形，每毫米4-5个.孢子近球形，光滑，无色，5-6*3-4微米.刚毛顶端尖锐，基部膨大，10-25*5-7微米.菌丝不分枝，无横隔，直径3-5微米。生于杨、柳、桦、栎等树干上，分布东北、华北、西北及四川、云南等地。
[0003]现代研究证实桑黄能够提高人体的免疫力，减轻抗癌剂的副作用，所以可用来辅助肿瘤病人的放疗和化疗，另外，桑黄对女性月经不调等妇科疾病也有疗效。
[0004]桑黄是已知高等真菌中抗癌效果最好的一种菌类，并且其抗癌机理也渐渐被人们所认识，故其市场前景非常乐观。在韩国桑黄的子实体一直作为名贵药材出售，其价格高达2300美元/公斤；在日本桑黄药用也开始进入市场。尽管我国应用桑黄治病已经有2000多年的历史，但其在市场化发展较慢，可能最主要的原因就是对其药理作用研究深度不够，以及栽培方法欠缺。

【发明内容】

[0005]本发明的目的是为了提供一种高效、节能、环保、利用生态野生活树桩栽培桑黄的方法。
[0006]一种利用野生活树桩栽培桑黄的方法，步骤如下:
第一步，按传统的方法制作母种、原种、栽培种；
第二步，培养桑树苗，栽培上100亩-1000亩的桑树林，待桑树长到直径达IOcm粗时，用刀把1/5的桑树皮削去，既可生长又不至于死树；
第三步，待削去的树皮处木质部有表面干燥时，用皮带冲或电钻打孔5.5-6cm深，孔与孔之间间隔16-18cm，然后把桑黄菌种接入孔中，用黄泥封口 ；一次接种，可摘桑黄数十年，直到桑树老死腐烂。
[0007]采用上述技术方案的有益效果是:
本发明可以充分利用林地资源栽培桑黄产品，简单易行，产出的桑黄个体大，可以大量人工栽培，充分满足市场的需求。
【具体实施方式】
[0008]一种利用野生活树桩栽培桑黄的方法，步骤如下:第一步，按传统的方法制作母种、原种、栽培种；
第二步，培养桑树苗，栽培上100亩-1000亩的桑树林，待桑树长到直径达IOcm粗时，用刀把1/5的桑树皮削去，既可生长又不至于死树；
第三步，待削去的树皮处木质部有表面干燥时，用皮带冲或电钻打孔5.5-6cm深，孔与孔之间间隔16-18cm，然后把桑黄菌种接入孔中，用黄泥封口 ；一次接种，可摘桑黄数十年，直到桑树老死腐烂。
[0009]所述第一步按传统的方法制作母种，方法如下:
1.1.1桑黄
桑黄子实体采自陕西省宁陕县自然保护区海拔约1800 m左右的桦树枯木上。选尚未木质化、无任何破损的子实体，用纸包好带回实验室。
[0010]1.1.2分离培养基
加富PDA培养基:马铃薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，KH2P031 g，MgS04 0.5g，维生素BllOmg,琼脂
20g,蒸懼 1000 mL, pH 自然。
[0011]1.2.3碳源测定基础培养基
蛋白胨 5g，KH2P041g，MgS040.5g，维生素 BllOmg，琼月旨 20g，蒸馏 1000mL, pH 自然。
[0012]1.2.4氮源测定基础培养基 葡萄糖208，腿2?0418，1%3040.58，维生素8110 mg,琼脂 20 g，蒸馏水 1000 mL，pH 自然。
[0013]1.1.5栽培培养基
桑树锯木屑培养基:桑树锯木屑100%，含水量609^62%。将新鲜无杂质的桑树锯木屑按比例加水，混合均匀至用手轻轻捏成团、指缝间有水而不流、触之即散，然后装入500mL广口瓶，每瓶装干料150g，瓶口用两层薄纸外加一层防潮塑料扎好，0.1 MPa灭菌2h。
[0014]鲜桑树枝木段培养基:取直径3~5cm的新鲜桑树枝，锯成4cm长的木段，每条劈两块，装入广口瓶(瓶口直径7.5 cm，高12 cm)，每瓶装12块，瓶口同样用两层薄纸外加一层防潮塑料扎好，0.1 MPa灭菌2h。
[0015]1.2 方法
1.2.1桑黄子实体处理
取新鲜桑黄子实体，用干净刷子刷去菇体表面的杂质，用75%的酒精擦洗固体外表面5次进行消毒，然后置于无菌烧杯中备用。
[0016]1.2.2桑黄组织分离法
将已处理消毒好的子实体在超净工作台上撕开，用已灭菌的解剖刀在菌片中央切取米粒大的组织I块，放入无菌平板培养皿表面，倒置于25°C恒温箱中培养，待长出菌丝后，取生长快、菌丝长的菌丝块，移入另一无菌平板培养皿表面培养，待长出菌丝后，取生长快、无杂菌污染的菌丝块，移入斜面培养基表面，25 °C培养12d、菌丝长满斜面且无杂菌，即为桑黄菌母种。
[0017]所述第一步按传统的方法制作原种，方法如下:原种是繁殖栽培中用的菌种，原种是由母种繁殖出来的。经过子实体组织分离获得的试管母种，生长再好也必须经过原种培养、观察、鉴定才能进一步作为扩大生产种的再生产，确定菌种的优良性和稳定性。一、原种培养基下面介绍几种原种培养基的不同配方。1.木屑培养基配方:锯木屑78%,石膏1%,麦麸20%，白糖1%。锯木屑一般采用阔叶树之类的锯木屑肩较好，其中以青岗树锯木屑为最好(松、柏、樟树和含芳香油的锯木屑不宜使用)，要求新鲜，无霉变。2.棉籽壳44%，木屑44%，麦麸I 0%，石膏粉1%，尿素0.5%:，过磷酸钙0.5%。3.棉籽壳78%~79%，玉米粉20%，石膏粉I %~2%，含水量65%。4.木屑73%，麸皮25%，糖I %，石膏粉1%。制作过程:将上述原料配方混合均匀，白糖用清水溶化后，加人培养料中充分拌匀，再加清水，使培养料含水量达55%~65%之间.含水量过高.培养料不透气，菌丝生长缓慢或不长，含水量过低，培养料湿度不够，菌丝也难生长，并且各种营养成分的转化必须要有一定的湿度才能进行。为了掌握好准确的含水量，最好边拌料，边喷水，边测定，以防用水过多。方法很简单，用手捏一把培养料，手指缝间见水不滴为宜(即含水量为65%)。二、灭菌原种培养基灭菌可采用高压灭菌或常压灭菌两种方法。一般原料最好采用高压灭菌，由于它数量不多，质量要求较高，首先灭菌必须严格彻底。高压灭菌将原料放入高压锅内，上紧锅盖螺丝，加足水位，然后升火加温，待压力表指针上升到0.5磅(I磅=0.453592千克)时，即开始打开放气阀，排除锅内的冷空气，使压力表指针自动退回原位时即关闭(一般高压锅压力针上升到0.5磅时会自动排冷气，自动关闭)，随后继续加温，使压力针上升到1.5磅时，保持1.5小时为宜，然后让它自动冷却后取出接种。三、接种桑黄接种可根据原种数量多少决定，数量多可采用接种室接种，数量少可采用接种箱接种。原种一般数量都不太多，最好用接种箱接，因为接种箱虽然操作困难，接种速度慢，但不易被杂菌感染，成活率高。接种箱消毒，接种前预先将接种箱打扫干净，用75%的酒精或高锰酸钾溶液擦洗一遍，再把菌种瓶，及其他用具都擦洗一遍放人接种箱。消毒方法可采用两种方法同时进行。紫外灯照射、高锰酸钾和甲醛混合进行气化消毒30分钟接种。接种时，双手先用75%的酒精消毒后，再伸入接种箱，点燃酒精灯，把接种针放在火焰上烧红晾凉后使用。母种试管的棉塞表皮可在酒精火焰上烧一下，再拔掉棉塞，用接种钩把试管内的母种培养基挑取蚕豆大的一块，放在原种瓶内的培养基上，长有菌丝的那面培养基应朝上，有利于菌丝发育接触木屑培养基，接种后塞上棉塞，再进行第二瓶操作。每支试管母种可接原种5~8瓶。4-24四、培养接种后的原种放在25°C — 28°C左右的恒温条件下培养5— 7天后，就可看到培养基的表面白母种块上长出白色的绒毛菌丝，向培养基深部或四周扩散发展。此时应随时检查是否感染杂菌，若出现杂菌应及时淘汰`，直到菌丝布满培养基表面为止。原种接种后，在正常的温度下，一般在25天左右可长满瓶底，I 7— I 8天左右菌丝长到培养基的一半时，表面会出现子实体原基。作为原种的菌种不管子实体如何生长都不能拔掉瓶塞，以免杂菌进入瓶口内。菌丝在生长过程中，因呼吸作用要散发一定的热量，往往瓶温高于室温或自然温度2V~3°C，因此，菌种瓶在发菌时不宜堆叠过高或过挤，以免温度过高，而使菌种质量F降。五、原种的保存桑黄原种菌丝长满瓶后，应及时使用，不宜存放过久，在常温下可保存一个月左右，只要子实体未停止生长。没有枯干的都可作扩种使用，总之菌龄尽量缩短为好。原种的保存方法一般采用低温下避光保存较好，温度控制在5 °C~7°C保存为宜，有条件的地方可用电冰箱保存。4-25所述第一步按传统的方法制作栽培种，方法如下:
栽培种是用原种扩制直接用于栽培的菌种。栽培种有两种制作方法，一种是锯木屑之类的菌种，另一种是木块菌种。锯木屑的菌种用于瓶栽和塑料袋栽比较适宜，木块菌种用于段木栽培，栽培种的选料和操作方法与原种制作基本相似。一、木块、玉米芯培养基由于桑黄的栽培基本采用段木栽培，因此，以下介绍木块栽培种的原料配方。木块、玉米芯培养基配方:木块1000千克，过磷酸钙2千克，玉米芯I 8千克，pH6~6.5，麦麸10千克，水适量，石膏2千克。这种培养基配方含糖量较高，不需另加白糖，以防偏酸，，后期子实体发育不良。具体操作:将原料按选择的配方比例混合均匀后，再加入用清水溶化的白糖拌匀，保持培养料含水量为65%。含水量的测定方法同原种测定相同，然后再用氢氧化钠或稀盐酸调至所需要的PH范围。二、装瓶方法把拌好的料装入瓶中，边装边将菌种瓶上下抖动，使培养料逐步紧实，但不能太紧。不能用其他东西将培养料往瓶内挤压以免造成松紧不匀，要求整个瓶中的培养料松紧适合，上下一致。一般来说培养料装得过松，菌丝生长快，但很稀、出现子实体迟；培养料过紧，菌丝生长慢，紧密，出现子实体原基较早。松紧不匀的培养料会加剧菌丝畸形生长。培养料装至瓶口后，再用铁铲将培养基表面压平，用水洗去瓶壁内外黏附的培养基，塞上棉塞，进行高温灭菌。一般来说最好当天装的瓶当天就进行高温灭菌，因为培养料中有很多微生物不断地进行活动，不及时进行高温灭菌，其他杂菌就会繁殖，影响培养基的正常营养成分。三、灭菌方法生产栽培种和原种灭菌一样，但是一般栽培种数量较大，高压灭菌锅装的数量少，最好采用土甑灭菌。土甑大小可根据生产量多少来决定，一般采用砖和水泥即可建成，土甑灭菌要求密封比较严密。土甑制作采用方形比圆形好，方形土甑便于放瓶子或袋子，一般宜深不宜浅。一立方密度的空间可装750克的瓶800个左右，塑料袋大约250袋左右，瓶子和塑料袋的放法都采角平放，竖放缝隙太大。不要在一个大甑内放几十瓶进行高温消毒，数量过少，甑内空隙过大，再加上土甑没有一定的高压装置，就不能达到彻底灭菌的目的。灭菌时，从水煮沸起应保持足够的火力4飞小时，要求甑内空间温度达到100。C以上，注意火力大小与时间长短结合安排。无论采用高压灭菌或土法灭菌，灭菌压力不能过高或时间过长，压力过高或时闻过长会破坏营养基中的养分，使酸碱度下降，不利于桑黄菌丝生长。灭菌时间过短或温度过低，培养基中的杂菌以及其他微生物未杀死，将来就会繁殖，给生产带来严重损失。一定要掌握灭菌的温度压力和时间。灭菌后，不要马上取出，最好在锅中闷一夜，第二天取出待瓶温下降到30。C后，再进行接种。四、接种生产种接种数量大，采用接种箱接种速度太慢，最好采用接种室接种，接种室首先要求清洁迎生，空气不流动，这样有利于彻底消毒灭菌。接种室消毒:在接种前一天，预先把接种室打扫干净，再用自来水把接种室的四周墙壁冲洗干净，使室内湿度增大，空气为静止状态。再用甲醛和高锰酸钾混合消毒，用药量按每立方米的空间需要甲醛10毫升、高锰酸钾5克计算。消毒时，应关闭门窗闷一天 或一夜，第二天放人灭菌的瓶子、原种、用其等。放好后再进行药物消毒一次，同时可采用紫外灯照射半小时后接种。接种工作准备:工作人员应在接种室外边的缓冲间预先换好接种衣，戴上口罩、乳胶手套、帽子等，再进入接种室接种。接种室接种操作比接种箱方便，速度较快。接种室空气条件差，氧气少，接种工作时间太长，对人体呼吸有影响，因此进入接种室一定要抓紧时间操作.接种操作:先点燃酒精灯，再将原种瓶棉塞拔掉，把原种表面一层约I厘米厚的培养基表层去掉，再用接种钩挑取手指头大的I一2块迅速放在生广种培养基上，塞上棉塞。每瓶原种大约可接栽培种100瓶左右。接完后，打开门窗，将接种后的瓶子搬到培养室去培养。五、培养栽培种在培养过程中，主要的工作是温度管理和杂菌观察。若是采用5~9月份的自然气温培养，就不需要人工加温或降温，若是当年9月份至第二年4月份生产，自然气温过低不能满足桑黄所需要的温度，就必须进行人工加温。桑黄菌丝虽然在3°C~4°C均能生长，但最好把温度控制在20°C~30°C左右，这样有利于菌丝的正常生长。接种后的杂菌观察，一般桑黄菌丝开始萌发时杂菌也就开始生长。杂菌的生长原因由多种因素引起，有接种室空间消毒不严，有操作时带进的杂菌，有高温灭菌不彻底的原因而造成杂菌感染，还有原种是否有杂菌感染等。这些原因都可以鉴别出来，若是高温灭菌不彻底，整个菌种培养基的杂菌是从瓶子中部或底部发生；若是原种本身有杂菌，接种后菌种培养料表面全是杂菌，但不会从瓶底部或中部发生杂菌；若是接种操作不当，只是部分瓶子表面滋生杂菌，这种情况不会全部感染杂菌。还有另一种情况，接种后的种块既不长杂菌，又不萌发菌丝，这类情况要从多方面检查:菌种是否老化，接种温度是否过高，培养基酸碱度是否合适，培养温度是否正常，培养基营养成分是否符合要求，使用的原种是否可靠等，这些都会造成菌丝不萌发。桑黄纯菌丝生长速度不快不慢、生长整齐均匀，纯白色，菌丝健壮，一般菌丝长到I / 3时，培养基表面就会出现子实体原基，原基不断生长扩大。菌丝长到瓶底时，子实体可长到瓶口棉塞处，但不能让它长出棉塞，以免过多的分解培养基中的营养。一般从接种到菌丝生长结束大约需要25~30天左右，长满后，放在低 温下妥善保存备用。
【权利要求】
1.一种利用野生活树桩栽培桑黄的方法，其特征在于:步骤如下: 第一步，按传统的方法制作母种、原种、栽培种； 第二步，培养桑树苗，栽培上100亩-1000亩的桑树林，待桑树长到直径达10cm粗时，用刀把1/5的桑树皮削去，既可生长又不至于死树； 第三步，待削去的树皮处木质部有表面干燥时，用皮带冲或电钻打孔5.5-6cm深，孔与孔之间间隔16-18cm，然后把桑黄菌种接入孔中，用黄泥封口 ；一次接种，可摘桑黄数十年，直到桑树老死腐烂。
【文档编号】A01G1/04GK103493685SQ201310476360
【公开日】2014年1月8日 申请日期:2013年10月14日 优先权日:2013年10月14日
【发明者】张礼珍 申请人:贵州省施秉县民生天麻科技有限公司