一种树鼩行为学评价方法
【专利摘要】本发明是一种树鼩行为学评价方法。该方法是由利用食物隐藏盒隐藏树鼩食物的方法、实验用树鼩的选择与训练方法、学习记忆的评分方法组成。利用树鼩视觉发达的特点，将树鼩的食物隐藏于食物盒内，通过颜色标记，并且经过训练，整个实验在无刺激影响因素的情况下进行，通过实验前后多天的平均分进行树鼩行为变化的比较。本发明的方法能获取更为科学、全面和客观的评价结果。本发明使用材料低廉，制作简单；操作方便，评价方法科学。
【专利说明】一种树齣行为学评价方法
[0001]
【技术领域】
[0002]本发明涉及一种树駒行为学评价方法。
【背景技术】
[0003]目前，国内外毒理学、精神和神经药理学等科学研究大多以实验用大小鼠(转基因大小鼠)为主，其中行为学评价是一个重要的指标。行为学研究主要以自主活动度检测、协调运动的检测、学习记忆能力的检测结果进行评价。其具体方法有:旷场试验、足迹分析法、洞板试验、穿梭箱试验、Morris水迷宫、放射状迷宫、Y型迷宫、T迷宫、Barnes迷宫实验、高架十字迷宫等十余种方法。现有方法多数涉及到:食物剥夺；个体体质差异大，未进行动物的一致性选择；以及光、电、水等刺激因素，有悖于动物伦理学等问题，有的甚至还存在争议。并且，所有方法都是将动物移动到固定的检测系统内进行，无法解决的问题是离开笼具产生的应激、训练耗时、繁琐以及检测系统内余留动物的气味给检测结果带来影响。以至于大多数对啮齿类动物进行的认知实验均伴随混杂设计的应激因素(Hodges, 1996;Mizumori et al., 1996; Kaneto, 1997)。
[0004]树駒是一种小型哺乳动物，是目前多数学者认可的一种低等灵长类动物。树駒脑的k值(0.14)均大于鼠及兔的，而同猫的近似。k值的大小除能反映动物脑的演化水平外，尚能反映动物的智力水平。Liyesy (1970)指出:大鼠的k值为0.04，兔为0.07，猫为
0.13，在复杂的作业中， 兔比鼠强，猫比兔强。除大脑皮质外，树駒小脑发育也较好，Haines(1969)指出:树駒小脑后叶的发育甚至比婴猴(Galago)的还好，故运动灵活、行动诡秘、长期以捕食(偏好)会移动的昆虫为主而非静态的植物和水果。再加之昼夜节律与人类一致。
[0005]树駒作为神经疾病研究模型无疑是一个好的选择，但因行为学评价一直无一个好的方法。国内数十篇树駒脑损伤的文章中均未涉及行为学方面的实验研究。国内有的研究人员用穿梭箱改进的电刺激箱开展行为学实验(最终放弃)；还有的通过树駒游泳训练用水迷宫开展行为学研究；其他实验同样无法回避水、电、光的刺激，这些刺激因素足以让树鼠句产生强烈的应激反应，以至于在实验过程中发生不作为、不响应的情况。国外开展树駒行为学实验的有:新物体认识实验(Abbas Khani, 2012)洞板”式的应激条件认知能力实验(Frauke 0hl，1998)。同样面临新环境的应激和气味等因素对行为和记忆的影响。“洞板”试验就无法解决食物气味的问题，由于气味的存在，树駒可以依靠嗅觉直接找到食物，而不是靠已习得的记忆完成任务。
[0006]总之，利用树駒开展精神和脑疾病研究，必须解决行为学评价的关键技术。利用所有动物都有向往食物这一生物学特性，以食物诱导为基础，以科学设计符合树駒特点的实验方法为重点。特进行树駒行为学评价方法的发明研究。
【发明内容】
[0007]本发明的目的是提供一种长期以来国内外一直迫切需要的有效的树駒行为学评价方法。
[0008]树駒是一种小型哺乳动物，是目前多数学者认可的一种低等灵长类动物，由于其运动灵活性、行动诡秘、长期以捕食(偏好)会移动的昆虫为主而非静态的植物和水果。为了回避树駒对环境变化敏感、应激性强的问题，行为学实验在原饲养笼内完成，利用其视觉发达的特点，将树駒的食物隐藏于食物盒内，通过颜色标记，并且经过训练，整个实验在无刺激影响因素的情况下进行。本发明的方法是由利用食物隐藏盒隐藏树駒食物的方法、实验用树駒的选择与训练方法、学习记忆的评分方法组成，具体如下:
1)食物隐藏盒使用方法:
A、圆形食物隐藏盒的外直径为2.5-3.5cm,厚度为2.5-3.5cm;食物存储空间内直径为1.5-2.0cm,深度为 2-2.5cm ；
B、树駒偏好的食物(不同饲养条件会形成不同的偏好，可以灵活确定)放于统一的食物隐藏盒内，用红色胶带封闭标记；
C、树駒日常饲喂的颗粒饲料放于统一的食物隐藏盒内，用绿色胶带封闭标记；
D、没有食物的食物隐藏盒用黄色胶带封闭标记；
2)、实验用树駒的选择与训练:
A、先将一个空的食物隐藏盒放入树駒笼内，选择I小时内玩弄和啃咬食物隐藏盒的树鼠句进行食物获取的学习训练；
B、树駒不同颜色标记的食物盒内食物获取的学习训练:训练期间推迟每天上午8点和下午5点添加饲料的时间，分别推迟到9点和下午6点，更好地反映每只树駒一天的总体状态；每次将3种颜色的4-6个食物盒同时放入实验树駒笼内，实验人员离开前，开启电子记录仪(或录像机)，每天两次分别记录树駒在30至40分钟内寻找和获取食物时间、以及在获取食物之前啃咬黄色胶带的食物隐藏盒次数；连续训练观察和记录3至6天；
C、根据影像记录结果，按照本发明的“学习记忆的评分方法”进行评分，最终选择:实验前连续观察3至6天的总平均分相差不超过3分的树駒，用于正式实验，即学习行为一致性好的树駒用于脑损伤或神经药物评价实验；
3)学习记忆的评分方法:
A、找到红色标记的食物隐藏盒和获取食物的计分为:30分+发现所用时间(分钟)+5分+发现红色食物隐藏盒后，用于吃完食物的时间(分钟)；
B、找到绿色标记的食物隐藏盒和获取食物的计分为:20分+发现所用时间(分钟)+5分+发现绿色食物隐藏盒后，用于吃完食物的时间(分钟)；
C、啃咬黄色食物隐藏盒的计分为:-0.5分/次X在获取食物之前的次数；
D、以上A、B、C、3项上下午两次分值之和的平均值为当天的评分；通过实验前后多天的平均分进行树駒行为变化的比较；
本评分办法可以根据实验需要连续进行多天，获取更为科学、全面和客观的评价结果。
[0009]本发明是利用食物盒内加入食物诱导树駒学习记忆的方法，通过对树駒发现食物和食物获取过程动作协调性两方面的能力进行评价。其特点是:食物隐藏盒用胶带密封，并且为一次性使用，回避了气味对记忆行为的影响；利用记录仪记录，树駒在日常居住的饲养笼内开展学习记忆的行为学评价，同时食物盒体积小，不受树駒笼具大小的影响，解决树鼠句应激强的问题；选择一致性好的树駒进行行为学评价实验，食物隐藏盒可以灵活增减，即评价难度可以调整，评分办法除了评价记忆，同时还有行为协调能力的评价；行为学评价采取一天两次和灵活的连续多天进行评价，能获取更为科学、全面和客观的评价结果。该发明使用材料低廉，制作简单；操作方便；评价方法科学。
【具体实施方式】
[0010]实施例1:
1)食物隐藏盒使用方法:
根据树駒牙齿比较细小，啃咬力量较啮齿类动物差的特点，食物盒制作材料的选择不能太硬，保证树駒发现食物盒后取食不太难；同时要有一定密度和硬度，保证盒内食物气味不外逸，防止树駒凭借嗅觉直接找到食物。经过反复试验，最终选择密度为:0.94—
0.98g / cm3白色塑料泡沫制作的食物盒。圆形食物盒的外直径为2.5-3.5cm，厚度为
2.5-3.5cm;食物存储空间内直径为1.5-2.0cm,深度为2_2.5cm ;树駒偏好的食物放于统一的塑料泡沫盒内，用红色胶带封闭标记；树駒日常饲喂的颗粒饲料放于统一的塑料泡沫盒内，用绿色胶带封闭标记；没有食物的塑料泡沫盒，用黄色胶带封闭标记；
2)实验用树駒的选择与训练:
A、首先，将一个空的塑料泡沫食物盒放入树駒笼内，选择I小时内玩弄和啃咬泡沫食物盒的树駒进行颜色和食物的学习训练；
B、树駒不同颜色标记的 食物盒内食物获取的学习训练:训练将每天上午8点和下午5点添加饲料的时间，分别推迟到9点和下午6点加入I个红色、I个绿色以及2个黄色标记的食物盒，实验人员离开前开启电子记录仪(或录像机)，每天两次分别记录树駒在30至40分钟内寻找和获取食物时间、以及在获取食物之前啃咬黄色胶带的食物盒次数；连续训练观察记录3天；
C、根据影像记录结果，严格按照本发明的“学习记忆的评分方法”进行评分，最终选择:连续观察3天的总平均分相差不超过3分的树駒，用于正式实验，即用于脑损伤或神经药物评价。
[0011]3)学习记忆的评分方法:
实验统一在每天上午9点和下午6点分别进行两次实验，更好地反映每只树駒一天的总体状态。每次将3种颜色的4个食物盒，其中红色和绿色各I个，黄色2个，同时放入实验树鼠句笼内，实验人员及时离开实验房间，开启电子记录仪(或录像机)记录30至40分钟后，恢复树駒正常的饲养管理工作，根据记录仪的结果，按照本发明的评分办法，对每一只树鼠句进行评分。
[0012]具体评分办法如下:
A、找到红色标记的塑料泡沫食物盒和获取食物的计分为:30分+发现所用时间(分钟)+ 5分+发现红色食物盒后，用于吃完食物的时间(分钟)；
B、找到绿色标记的塑料泡沫食物盒和获取食物的计分为:20分+发现所用时间(分钟)+ 5分+发现绿色食物盒后，用于吃完食物的时间(分钟)；
C、啃咬黄色标记食物盒的计分为:-0.5分/次X在获取食物之前啃咬黄色标记食物盒的次数；D、以上3项上下午分值之和的平均值为当天的评分，实验前后均以3天的平均分进行比较。
[0013]实例2:
树駒偏好食物隐藏盒的颜色可以改变为绿色或其他颜色进行标记，如蓝色、黑色等；
将塑料泡沫食物隐藏盒增加为6个，即:红色和绿色各I个，黄色4个，增加树駒选择难
度； 评分办法中，实验前后均以6天的平均分进行比较。
[0014]其余方法均与实施例1相同。
【权利要求】
1.一种树駒行为学评价方法，其特征在于:该方法是由食物盒隐藏树駒食物的方法、实验用树駒的选择与训练方法、学习记忆的评分方法组成，具体如下: 1)食物隐藏盒使用方法: A、圆形食物隐藏盒的外直径为2.5-3.5cm,厚度为2.5-3.5cm;食物存储空间内直径为1.5-2.0cm,深度为 2-2.5cm ； B、将树駒偏好的食物放于统一的食物隐藏盒内，用红色胶带封闭标记； C、将树駒日常饲喂的颗粒饲料放于统一的食物隐藏盒内，用绿色胶带封闭标记； D、没有食物的食物隐藏盒用黄色胶带封闭标记； 2)、实验用树駒的选择与训练: A、先将一个空的食物隐藏盒放入树駒笼内，选择I小时内玩弄和啃咬食物隐藏盒的树鼠句进行食物获取的学习训练； B、树駒不同颜色标记的食物盒内食物获取的学习训练:训练期间推迟每天上午8点和下午5点添加饲料的时间，分别推迟到9点和下午6点，更好地反映每只树駒一天的总体状态；每次将3种颜色的4-6个食物隐藏盒同时放入实验树駒笼内，实验人员离开前，开启电子记录仪或录像机，每天两次分别记录树駒在30至40分钟内寻找和获取食物时间、以及在获取食物之前啃咬黄色胶带的食物隐藏盒次数；连续训练观察和记录3至6天； C、根据影像记录结果，按照本发明的“学习记忆的评分方法”进行评分，最终选择:实验前连续观察3至6天的总平均分相差不超过3分的树駒，用于正式实验，即学习行为一致性好的树駒用于脑损伤或神经药物评价实验； 3)学习记忆的评分方法: A、找到红色标记的食物隐藏盒和获取食物的计分为:30分+发现所用时间，分钟+5分+发现红色食物隐藏盒后用于吃完食物的时间，分钟； B、找到绿色标记的食物隐藏盒和获取食物的计分为:20分+发现食物隐藏盒所用时间，分钟+ 5分+发现绿色食物隐藏盒后用于吃完食物的时间，分钟； C、啃咬黄色食物隐藏盒的计分为:-0.5分/次X在获取食物之前的次数； D、以上A、B、C、3项上下午两次分值之和的平均值为当天的评分；通过实验前后多天的平均分进行树駒行为变化的比较。
2.根据权利要求1所述的树駒行为学评价方法，其特征在于:食物隐藏盒选择密度为:0.94—0.98g / cm3塑料泡沫制作。
3.根据权利要求1所述的树駒行为学评价方法，其特征在于:用三种不同胶带纸封闭标记食物隐藏盒为I个红色、I个绿色、2-4个黄色。
4.根据权利要求1所述的树駒行为学评价方法，其特征在于:树駒偏好食物隐藏盒的颜色包括蓝色、黑色、 绿色。
【文档编号】A01K67/02GK103598144SQ201310644407
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年12月5日 优先权日:2013年12月5日
【发明者】郑红, 李进涛, 角建林, 何保丽, 李波, 王丽梅 申请人:昆明医科大学