一种花脸香蘑菌丝体的人工培养方法及其培养基的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种花脸香蘑菌丝体的人工培养方法及其培养基，培养基配方组分按重量份为：松针30-50份、蛋白胨5-12份、酵母浸粉6-12份、葡萄糖2.5-10份、琼脂15-20份；其人工培养方法为：将松针清洗放入水中煮沸20-30分钟，过滤取汁；将松汁定容至1000ml，然后依次加入蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、琼脂，煮沸混匀；将配制好的培养基分装于试管中，盖上胶塞，在120-130℃条件下灭菌20-30分钟；后取出培养基，自然冷却至20℃-30℃，制成斜面培养基，在无菌条件下，接入经过纯化的花脸香蘑菌种；将接好种的培养基置于恒温培养箱里，20-30℃培养5-10天，直至菌丝长满试管后冷藏，本发明操作简单，缩短培养周期短，无污染无废弃物，菌丝体产量高。
【专利说明】一种花脸香蘑菌丝体的人工培养方法及其培养基
[0001]【技术领域】:
本发明涉及一种花脸香蘑菌丝体的人工培养方法及其培养基，属于属于生药学【技术领域】。
[0002]【背景技术】:
花脸香蘑属于真菌界Fungi,担子菌门Basidiomycota,伞菌纲Agaricomycetes、伞菌目Agaricales、口蘑科Tricholomataceae、香蘑属Zepisia的大型真菌。其鲜嫩甜美，香味浓郁，口感极好，素有“一家食其味，十家闻其香”的美誉。在欧洲，花脸香蘑的受欢迎程度能够与松茸和牛肝菌齐名，在法国被视为上等的食材，具有很高的食用价值。
[0003]此外，花脸香蘑不仅味道鲜美，而且含有许多人体必需的维生素和氨基酸以及丰富的蛋白质，例如苏氨酸、丙氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、谷氨酸、缬氨酸、亮氨酸、天冬酰胺酸、天门冬氨酸和甘氨酸[8]。此外花脸香蘑的子实体还含有甘露醇、阿拉伯糖醇、葡萄糖、甘油、果糖和海藻糖，其中海藻糖的含量是最高的。
[0004]在药用价值方面，据元朝的《日用草本》和清代黄官绣的《本草术经》记载，长期食用花脸香蘑能够有效地防止血管硬化，可以治疗肝硬化、糖尿病、肾脏病、胆结石等。到目前为止，国外关于花脸香蘑的药用价值的研究主要还是集中在它的抗氧化活性和抗菌活性两方面上。花脸香蘑的子实体还含有丰富的维生素BI，能够调节生物体正常的糖代谢，促进神经传导，对预防脚气有很好的效果。花脸香蘑子实体的热水提取物具有显著的抗癌活性，其药理试验证明花脸香蘑子实体提取物对小白鼠艾氏瘤和肉瘤S180的抑制率分别为100%和90%。而子实体煎煮的汁能够帮助治疗脓肿、砂眼和伤口。
[0005]近年来，花脸香蘑逐渐被世人所认识了解，对它的市场需求不断增加，从而导致野生资源逐年减少，很难再满足市场的需求，对花脸香蘑进行人工驯化栽培势在必行，花脸香蘑菌丝体培养过程中生长速度慢，菌丝稀疏，不健壮，是制约花脸香蘑人工驯化栽培的一个技术难题。目前，香蘑类菌丝体的人工培养大都采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA );马铃薯综合培养基(CPDA);麸皮葡萄糖琼脂培养基(麸皮50-70 g、葡萄糖20 g、琼脂18-20g);玉米粉综合培养基(玉米粉20-30 g、葡萄糖20 g、磷酸二氢钾2 g、硫酸镁0.5 g、琼脂18-20 g);堆肥浸出液培养基【堆肥(干)100 g、葡萄糖20 g、琼脂18-20 g】等，这些培养基用于花脸香蘑菌丝培养过程中，生长速度慢，菌丝末端产生分支菌丝较多，稀疏。
[0006]
【发明内容】
:
本发明的目的在于克服上述已有技术的不足而提供一种操作简单，缩短培养周期短，无污染无废弃物，菌丝体产量高的花脸香蘑菌丝体的人工培养方法及其培养基。
[0007]本发明的目的可以通过如下措施来达到:一种用于培养花脸香蘑菌丝体的培养基，其特征在于其配方组分按重量份为:松针30-50份、蛋白胨5-12份、酵母浸粉6-12份、葡萄糖2.5-10份、琼脂:15-20份。
[0008]为了进一步实现本发明的目的，其配方组分按重量份为:松针36份、蛋白胨8份、酵母浸粉6份、葡萄糖4份、琼脂:18份。
[0009]一种花脸香蘑菌丝体的人工培养方法，其特征在于具体工艺步骤为:(1) 松针前处理:
将收集到的松针进行清洗,放入1000ml水中，煮沸20-30分钟，过滤取汁；
(2)培养基制备:
将松汁定容至1000ml，然后依次加入蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、琼脂，煮沸混匀，然后进行分装；
(3)培养基分装，灭菌:
将配制好的培养基分装于试管中，盖上胶塞，在120-130°C条件下灭菌20-30分钟；
(4)冷却，接种:
灭完菌后取出培养基，自然冷却至20°C _30°C，制成斜面培养基，在无菌条件下，接入经过纯化的花脸香蘑菌种；
(5)培养:
将接好种的培养基置于恒温培养箱里，20-30°C培养5-10天，直至菌丝长满试管；
(6)菌种保藏:将培养好的菌种放于4°C的冰箱中进行保藏。
[0010]本发明同已有技术相比可产生如下积极效果:花脸香蘑是一种珍稀、优质野生菌种，在野生状态下，数量少，产量低、但其色泽优美，气味浓香，味道鲜嫩，营养价值和药用价值极高，且价格昂贵。目前，适合花脸香蘑菌种优良培养基研究甚少，本发明培养基所使用的原料无污染，不会产生任何垃圾，简单实用，缩短培养周期，一般缩短4天左右，并且较其他培养基菌丝体长稠密、粗壮，呈淡紫色，生活力旺盛，可促使花脸香蘑菌丝体快速生长，为花脸香蘑实现大规模工业化生产及医药事业的发展都具有非常重要的意义。
[0011]【具体实施方式】:
下面对本发明的【具体实施方式】作详细说明:
实施例1:
(1)松针前处理:
将收集到的30g松针进行清洗，放入1000ml水中，煮沸20-30分钟，过滤取汁；
(2)培养基制备:
将松汁定容至1000ml,然后依次加入5g蛋白胨、6g酵母浸粉、2.5g葡萄糖、15g琼脂，煮沸混匀，然后进行分装；
(3)培养基分装，灭菌:
将配制好的培养基分装于试管中，盖上胶塞，在120-130°C条件下灭菌20-30分钟；
(4)冷却，接种:
灭完菌后取出培养基，自然冷却至20°C _30°C，制成斜面培养基，在无菌条件下，接入经过纯化的花脸香蘑菌种；
(5)培养:
将接好种的培养基置于恒温培养箱里，20-30°C培养5-10天，直至菌丝长满试管；
(6)菌种保藏:将培养好的菌种放于4°C的冰箱中进行保藏。
[0012]实施例2:
Cl)松针前处理:
将收集到的36g松针进行清洗，放入1000ml水中，煮沸20-30分钟，过滤取汁；
(2)培养基制备:将松汁定容至1000ml,然后依次加入8g蛋白胨、6g酵母浸粉、4g葡萄糖、18g琼脂,煮沸混匀，然后进行分装；
(3)培养基分装，灭菌:
将配制好的培养基分装于试管中，盖上胶塞，在120-130°C条件下灭菌20-30分钟；
(4)冷却，接种:
灭完菌后取出培养基，自然冷却至20°C _30°C，制成斜面培养基，在无菌条件下，接入经过纯化的花脸香蘑菌种；
(5)培养:
将接好种的培养基置于恒温培养箱里，20-30°C培养5-10天，直至菌丝长满试管；
(6)菌种保藏:将培养好的菌种放于4°C的冰箱中进行保藏。
[0013]实施例3:
Cl)松针前处理:
将收集到的50g松针进行清洗，放入1000ml水中，煮沸20-30分钟，过滤取汁；
(2)培养基制备:
将松汁定容至1000ml，然后依次加入12g蛋白胨、12g酵母浸粉、IOg葡萄糖、20g琼脂，煮沸混匀，然后进行分装；
(3)培养基分装，灭菌:
将配制好的培养基分装于试管中，盖上胶塞，在120-130°C条件下灭菌20-30分钟；
(4)冷却，接种:
灭完菌后取出培养基，自然冷却至20°C _30°C，制成斜面培养基，在无菌条件下，接入经过纯化的花脸香蘑菌种；
(5)培养:
将接好种的培养基置于恒温培养箱里，20-30°C培养5-10天，直至菌丝长满试管；
(6)菌种保藏:将培养好的菌种放于4°C的冰箱中进行保藏。
[0014] 以上的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
【权利要求】
1.一种用于培养花脸香蘑菌丝体的培养基，其特征在于其配方组分按重量份为:松针30-50份、蛋白胨5-12份、酵母浸粉6-12份、葡萄糖2.5-10份、琼脂:15-20份。
2.根据权利要求1所述的一种用于培养花脸香蘑菌丝体的培养基，其特征在于其配方组分按重量份为:松针36份、蛋白胨8份、酵母浸粉6份、葡萄糖4份、琼脂:18份。
3.一种花脸香蘑菌丝体的人工培养方法，其特征在于具体工艺步骤为: (1)松针前处理: 将收集到的松针进行清洗,放入1000ml水中，煮沸20-30分钟，过滤取汁； (2)培养基制备: 将松汁定容至1000ml，然后依次加入蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、琼脂，煮沸混匀，然后进行分装； (3)培养基分装，灭菌: 将配制好的培养基分装于试管中，盖上胶塞，在120-130°C条件下灭菌20-30分钟； (4)冷却，接种: 灭完菌后取出培养基，自然冷却至20°C -30°C，制成斜面培养基，在无菌条件下，接入经过纯化的花脸香蘑菌种； (5)培养: 将接好种的培养基置于恒温培养箱里，20-30°C培养5-10天，直至菌丝长满试管； (6)菌种保藏:将培养好的菌种放于4°C的冰箱中进行保藏。
【文档编号】A01G1/04GK103947454SQ201410192113
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2014年5月8日 优先权日:2014年5月8日
【发明者】刘宇, 王建瑞, 姜德凯, 图力古尔, 程显好, 董洪新 申请人:鲁东大学