一种文冠果的无性快繁方法
【专利摘要】本发明涉及一种文冠果的无性快繁方法，通过合子胚的诱导接种、体细胞胚的继代与增殖培养、不定芽的继代培养、体细胞胚的萌发培养、不定芽旳生根培养、炼苗共六步骤实现；本发明提供一种文冠果的快速无性繁殖方法，从根本上解决文冠果种源不足的问题，实现快速繁殖，并能保持植株的优良性状，满足文冠果在经济、药用、观赏树种等各方面的应用需求。
【专利说明】一种文冠果的无性快繁方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及园艺领域，具体涉及一种文冠果的无性快繁方法。
【背景技术】
[0002]文冠果，无患子科文冠果属，一属一种，又名文冠木、文官果、土木瓜等。在垂直方向上文冠果分布广泛，原产于我国北方的黄土高原地区，栽培树林范围涉及广泛。文冠果在城市园林绿化的应用中，常常被培育成小乔木状，树型优美。文冠果非常适合栽种在庭院之中，做观赏树种，由于其长寿、吉祥的寓意。文冠果具有优美的树型，开阔的树冠，婆娑的干型，奇特的叶子，同时其花美，花期长，絢丽多彩。另外，经过人工控制后，文冠果的树形更加优美，能够创造效果出众的奇景，从而大大的增加文冠果的观赏价值。
[0003]现阶段，文冠果的繁殖生产主要还是靠种子进行有性繁殖，浪费土地的同时也耗费种源。文冠果的种子在未经任何处理的情况下，发芽率极低，同时，由于文冠果的坐果率非常之低，素称之“千花一果”，从而导致了种源的严重不足。自然生长状态下，主要靠根孽繁殖的文冠果植株后代的退化现象严重，且变异较大。嫁接、扦插等传统的无性繁殖方法，繁殖的系数低，且繁殖周期长，不利于文冠果的快速繁殖，也不能满足高速发展的生产和经济的需要。
【发明内容】
[0004]本发明主要解决的技术问题是提供一种文冠果的无性快繁方法，从根本上解决文冠果种源不足的问题，实现快速繁殖，并能保持植株的优良性状，满足文冠果在经济、药用、观赏树种等各方面的应用需求。
[0005]为解决上述技术问题，本发明的目的是这样实现的:
[0006](I)合子胚的诱导接种:将文冠果果实先用洗衣粉水清洗表面，多次喷洗和擦拭，用灭菌解剖刀将其切开，取出种子放在无菌培养皿内(垫有无菌滤纸)；用灭菌镊子和解剖刀去除种皮，取出其中的合子胚，切成0.3cm3小块，接种到含有不同植物生长调节剂6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L 的 MS 培养基中，暗培养；
[0007](2)体细胞胚的继代与增殖培养:将上述诱导的体细胞胚按照体细胞胚的发育情况，分别进行继代培养:体细胞胚发育良好的，切离外植体，继代在不含任何生长调节剂的MS培养基中；体细胞胚不易剥离的，连同外植体一起继代在其诱导率较高的新鲜培养中；暗培养28d，观察统计体细胞胚的继代生长情况；
[0008](3)不定芽的继代培养:将诱导培养获得的不定芽按照发育生长情况，分别进行继代培养:不定芽长势较好的连同外植体切成5cm3块小，转移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鲜培养基中；不定芽长势较弱的连同外植体切成5cm3小块，转移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培养基中；仅有芽点状突起的外植体，直接转入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鲜培养基中，继续进行诱导；
[0009](4)体细胞胚的萌发培养:将外观形态发育成熟的了叶胚，转入不加任何植物生长调节剂的1/2MS和MS培养基中进行萌发；
[0010](5)不定芽旳生根培养:选取生长较整齐一致的不定芽，切取2.5cm,接种在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA(0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培养基中诱导生根；
[0011](6)炼苗:选取生根的不定芽，在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的条件下，暗培养。
[0012]本发明的有益效果是:从体细胞胚发生这种途径，建立出一个成熟稳定的文冠果无性快繁再生技术，继代周期短，增殖倍数高。
【具体实施方式】
[0013]下面对本发明的较佳实施例进行详细阐述，以使本发明的优点和特征能更易于被本领域技术人员理解，从而对本发明的保护范围做出更为清楚明确的界定。
[0014]本发明实施例包括:
[0015]一种文冠果的无性快繁方法，其特征在于，包括以下步骤:
[0016](I)合子胚的诱导接种:将文冠果果实先用洗衣粉水清洗表面，多次喷洗和擦拭，用灭菌解剖刀将其切开，取出种子放在无菌培养皿内(垫有无菌滤纸)；用灭菌镊子和解剖刀去除种皮，取出其中的合子胚，切成0.3cm3小块，接种到含有不同植物生长调节剂6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L 的 MS 培养基中，暗培养；
[0017](2)体细胞胚的继代与增殖培养:将上述诱导的体细胞胚按照体细胞胚的发育情况，分别进行继代培养:体细胞胚发育良好的，切离外植体，继代在不含任何生长调节剂的MS培养基中；体细胞胚不易剥离的，连同外植体一起继代在其诱导率较高的新鲜培养中；暗培养28d，观察统计体细胞胚的继代生长情况；
[0018](3)不定芽的继代培养:将诱导培养获得的不定芽按照发育生长情况，分别进行继代培养:不定芽长势较好的连同外植体切成5cm3块小，转移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鲜培养基中；不定芽长势较弱的连同外植体切成5cm3小块，转移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培养基中；仅有芽点状突起的外植体，直接转入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鲜培养基中，继续进行诱导；
[0019](4)体细胞胚的萌发培养:将外观形态发育成熟的了叶胚，转入不加任何植物生长调节剂的1/2MS和MS培养基中进行萌发；
[0020](5)不定芽旳生根培养:选取生长较整齐一致的不定芽，切取2.5cm,接种在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA(0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培养基中诱导生根；
[0021](6)炼苗:选取生根的不定芽，在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的条件下，暗培养。
[0022]以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的【技术领域】，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
【权利要求】
1.一种文冠果的无性快繁方法，其特征在于，包括以下步骤: (1)合子胚的诱导接种:将文冠果果实先用洗衣粉水清洗表面，多次喷洗和擦拭，用灭菌解剖刀将其切开，取出种子放在无菌培养皿内(垫有无菌滤纸)；用灭菌镊子和解剖刀去除种皮，取出其中的合子胚，切成0.3cm3小块，接种到含有不同植物生长调节剂6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L的MS培养基中，暗培养； (2)体细胞胚的继代与增殖培养:将上述诱导的体细胞胚按照体细胞胚的发育情况，分别进行继代培养:体细胞胚发育良好的，切离外植体，继代在不含任何生长调节剂的MS培养基中；体细胞胚不易剥离的，连同外植体一起继代在其诱导率较高的新鲜培养中；暗培养28d，观察统计体细胞胚的继代生长情况； (3)不定芽的继代培养:将诱导培养获得的不定芽按照发育生长情况，分别进行继代培养:不定芽长势较好的连同外植体切成5cm3块小，转移到6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的新鲜培养基中；不定芽长势较弱的连同外植体切成5cm3小块，转移到6-BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L培养基中；仅有芽点状突起的外植体，直接转入6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的新鲜培养基中，继续进行诱导； (4)体细胞胚的萌发培养:将外观形态发育成熟的了叶胚，转入不加任何植物生长调节剂的1/2MS和MS培养基中进行萌发； (5)不定芽旳生根培养:选取生长较整齐一致的不定芽，切取2.5cm，接种在含6-BA(0.4-1.0mg/L)、NAA (0.2-0.4mg/L)和 2%蔗糖的 1/2MS 培养基中诱导生根； (6)炼苗:选取生根的不定芽，在MS+6-BA0.2mg/L+NAA0.2mg/L的条件下，暗培养。
【文档编号】A01H4/00GK104160957SQ201410355211
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2014年7月25日 优先权日:2014年7月25日
【发明者】吴义师 申请人:合肥德美畜牧技术有限公司