一种川桂的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明涉及一种川桂的快速繁殖方法，包括外植体的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导和炼苗移栽。本发明的川桂组培方法操作简便，生长周期短，增殖系数高，成活率高，可以短期内获得大量的川桂幼苗，进行大规模栽种。
【专利说明】 一种川桂的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及川桂组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]川桂，Cinnamomum乔木,樟科,产陕西、四川、湖北、湖南、广西、广东及江西。生于山谷或山坡阳处或沟边，疏林或密林中，海拔(30-300) 800-2400米。枝叶和果均含芳香油，油供作食品或皂用香精的调合原料。川桂树皮入药，功效补肾和散寒祛风，治风湿筋骨痛、跌打及腹痛吐泻等症。川桂皮在西方古代被用作香料。中餐里用它给炖肉调味，是五香粉的成份之一。目前关于川桂的种植栽培尚未见报道，组培技术是)11桂快速繁殖的有效方法之一，可以有效提高川桂的资源开发和充分利用。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种川桂的快速繁殖方法，由该方法所制备得到的川桂组培方法简便，生长周期短，增殖系数高，成活率高，可以短期内获得大量的川桂幼苗，进行大规模栽种。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取川桂带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗1.5h，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.lmg/L+2iplmg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，诱导出来的芽放入增殖培养基 WPM+2，4，5-T0.lmg/L+KT0.3mg/L+lmg/LABA,附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x ;增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.lmg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物，将试管苗长约5cm的幼苗去掉封口膜，放入培养室照射5d，取出试管苗，高锰酸钾溶液浸根，栽植椰子壳:泥炭土:珍珠岩=2:0.5:0.5基质中，培养30d统计成活率。
[0005]采用本发明制备的川桂成活率为94%，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
[0007]实施例1
取川桂带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗1.5h，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.05mg/L+2ip0.5mg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，诱导出来的芽放入增殖培养基 WPM+2，4，5-T0.05mg/L+KT0.2mg/L+lmg/LABA,附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.lmg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物，生根后的川桂试管苗进行炼苗培养，川桂成活率为90%。
[0008]实施例2 取川桂带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗1.5h，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.2mg/L+2iplmg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2,4,5-T0.15mg/L+KT0.4mg/L+lmg/LABA,附加蔗糖 30g/L,琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.lmg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物，生根后的川桂试管苗进行炼苗培养，川桂成活率为91%。
[0009]实施例3
取川桂带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗1.5h，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.lmg/L+2ip0.5mg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，诱导出来的芽放入增殖培养基 WPM+2，4，5-T0.lmg/L+KT0.2mg/L+lmg/LABA,附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.lmg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物，生根后的川桂试管苗进行炼苗培养，川桂成活率为92%。
[0010]实施例4
取川桂带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗1.5h，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.lmg/L+2iplmg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，PH5.8，光照30001x，诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2,4,5-T0.15mg/L+KT0.4mg/L+lmg/LABA,附加蔗糖 30g/L,琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照30001x，增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.lmg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物，生根后的川桂试管苗进行炼苗培养，川桂成活率为93%。
【权利要求】
1.一种川桂的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、芽的诱导、芽的增殖、生根诱导、野外炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取川桂带芽茎段，按照常规的消毒方法对其进行灭菌处理； (2)将步骤(I)灭菌处理过的带芽茎段接入培养基配方为WPM+IAA0.05-0.2mg/L+2ip0.5-lmg/l+卡那霉素15mg/L诱导培养基中进行芽诱导培养，附加鹿糖30g/L,琼脂6.5g/L, PH5.8，光照 30001x ； (3)取步骤(2)诱导出来的芽放入增殖培养基WPM+2，4，5-T0.05-0.15mg/L+KT0.2-0.4mg/L+lmg/LABA,附加蔗糖 30g/L，琼脂 6.5g/L，PH5.8，光照 30001x ； (4)取步骤(3)增殖培养出来的丛生芽放入生根培养基1/2MS+NAA0.lmg/L+IBA0.2mg/L+250mg/L酵母提取物； (5)取步骤(4)生根后的川桂试管苗先移栽到温室，然后移栽到大田进行炼苗培养。
2.按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述川桂无菌芽的获得为，取川桂带芽茎段，先在漂白粉中浸泡3min，毛刷去除表面污溃，流水冲洗1.5h，超净工作台上75%酒精处理30s，次氯酸钠处理12min，无菌水冲洗5遍。
3.按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(2)诱导培养基中附加了卡那霉素15mg/L，能克服苗在培养过程中内生菌的产生。
4.按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(3)中的增殖培养基中附加了 ABA，可以促进川桂芽的增殖和分化。
5.按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中加入250mg/L酵母提取物，可以促进川桂试管苗的生根和生长。
6.按照权利要求1所述的一种川桂的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)中川桂的炼苗培养方法为将试管苗长约5cm的幼苗去掉封口膜，放入培养室照射5d，取出试管苗，高锰酸钾溶液浸根，栽植椰子壳:泥炭土:珍珠岩=2:0.5:0.5基质中，培养30d统计成活率。
【文档编号】A01H4/00GK104170737SQ201410449525
【公开日】2014年12月3日 申请日期:2014年9月4日 优先权日:2014年9月4日
【发明者】张金芳, 杨存 申请人:南京标科生物科技有限公司