一种川桂植株再生的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种川桂植株再生的快速繁殖方法，包括川桂无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化生根、无菌苗的生成、炼苗移栽等步骤，本发明方法所制备的川桂再生分化率高，生产周期短，可以在短期内获得大量的川桂幼苗。
【专利说明】 一种} 11桂植株再生的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及川桂组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002])\傲，Cinnamomum wilsonii乔木,樟科,产陕西、四川、湖北、湖南、广西、广东及江西。生于山谷或山坡阳处或沟边，疏林或密林中，海拔(30-300) 800-2400米。枝叶和果均含芳香油，油供作食品或皂用香精的调合原料。川桂树皮入药，功效补肾和散寒祛风，治风湿筋骨痛、跌打及腹痛吐泻等症。川桂皮在西方古代被用作香料。中餐里用它给炖肉调味，是五香粉的成份之一。目前关于川桂的种植栽培尚未见报道，组培技术是)11桂快速繁殖的有效方法之一，可以有效提高川桂的资源开发和充分利用。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种川桂的快速繁殖方法，由该方法所制备得到的川桂再生分化率高，生产周期短，可以在短期内获得大量的川桂幼苗。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min,超净工作台上100ppm的硝酸银浸泡3s,次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗6次，消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入⑶+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.lg/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，光照5001x，温度25± I °C，湿度80%，诱导出来的愈伤组织放入培养基⑶+NAA5.0-6.0mg/L+KT1.5-2.0mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照20001x，温度25± I°C，诱导出的根接入培养基MS+6-BA5.0-6.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照80001x，温度25±2°C，待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土:沙子=1:1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎。
[0005]采用本发明制备的川桂成活率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min,超净工作台上100ppm的硝酸银浸泡3s,次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗6次，消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入⑶+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.1g/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，光照5001x，温度25±1°C，湿度80%，诱导出来的愈伤组织放入培养基⑶+NAA5.0mg/L+KTl.5mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照20001x，温度25 土 1°C，诱导出的根接入培养基MS+6-BA5.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照80001x，温度25±2°C，待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土:沙子=1:1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎，成活率87%。
[0008]实施例2
取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min,超净工作台上100ppm的硝酸银浸泡3s,次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗6次，消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入⑶+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.1g/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，光照5001x，温度25±1°C，湿度80%，诱导出来的愈伤组织放入培养基⑶+NAA6.0mg/L+KT2.0mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照20001x，温度25土1°C，诱导出的根接入培养基MS+6-BA6.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照80001x，温度25±2°C，待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土:沙子=1:1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎，成活率89%。
[0009]实施例3
取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min,超净工作台上100ppm的硝酸银浸泡3s,次氯酸钠消毒处理lOmin，无菌水冲洗6次，消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入⑶+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.1 g/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，光照5001x，温度25±1°C，湿度80%，诱导出来的愈伤组织放入培养基⑶+NAA6.0mg/L+KT2.0mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照20001x，温度
25土 1°C，诱导出的根接入培养基MS+6-BA5.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照80001x，温度25±2°C，待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土:沙子=1:1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎，成活率90%。
【权利要求】
1.一种川桂植株再生的快速繁殖方法，包括川桂无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化生根、无菌苗的生成、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取川桂幼嫩的叶片，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的川桂幼嫩叶片接入⑶+6-BA1.0mg/L+NAA2.0mg/L+VC0.lg/L+0.7%琼脂+30g/L白糖中进行愈伤组织的诱导，ρΗ5.8，光照5001χ，温度25±1°C，湿度 80%; (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入培养基⑶+NAA5.0-6.0mg/L+KTl.5-2.0mg/L进行愈伤组织分化的生根培养，附加白糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.8，光照20001x，温度25±1°C ； (4)取步骤(3)诱导出的根接入培养基MS+6-BA5.0-6.0mg/L中继续分化出无菌苗，附加白糖 30g/L，琼脂 7g/L，ρΗ5.8，光照 80001χ，温度 25±2°C ； (5)取步骤(4)的试管苗进行炼苗移栽。
2.按照权利要求1所述的一种川桂植株再生的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(O中所述川桂无菌叶片的获得为，取川桂幼嫩的叶片，流水冲洗20min，超净工作台上100ppm的硝酸银浸泡3s,次氯酸钠消毒处理1min,无菌水冲洗6次。
3.按照权利要求1所述的一种川桂植株再生的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(2)中川桂愈伤组织的诱导中附加了维生素C，可以防止愈伤组织的褐化。
4.按照权利要求1所述的一种川桂植株再生的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)中川桂的炼苗移栽方法为待试管苗长约5cm时，从培养室取出，常温放置四天，移栽入大田土:沙子=1:1的机制中，移栽当天用MS培养基母液喷施，一周后喷施250倍的多菌灵溶液，上面盖上玻璃罩，防止水分散失造成小苗枯萎。
【文档编号】A01H4/00GK104160967SQ201410463166
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2014年9月12日 优先权日:2014年9月12日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司