一种糯米条诱变育种的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种糯米条诱变育种的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变、愈伤组织的分化等步骤，本发明方法所制备的糯米条新品种长势好，增殖率高，生长周期短，次生代谢物高，为糯米条工业化开发提供基础。
【专利说明】一种糯米条诱变育种的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及糯米条诱变育种的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002] 糯米条，Abelia chinensis，忍冬科，落叶多分枝灌木，幼枝红褐色，小枝皮撕裂 状。叶卵形或卵状椭圆形，对生，边缘具疏浅齿，叶背中脉基部密被柔毛。聚伞花序顶生或腋 生，花粉红色或白色，具香味，花萼被短柔毛，5裂长约5毫米，花冠漏斗状，列被柔毛，雄蕊 4,伸出花冠。瘦果长约5毫米，顶端有宿存5萼裂状，花期7- 8月，果熟期10月。糯米条 喜温暖湿润气候，耐寒能力差。北方地区栽植，枝条易受冻害。我国长江以南各省区广泛分 布，在浙江、江西、福建、台湾、湖北、湖南、广东、广西、四川、贵州和云南海拔170-1500米的 山地常见；长江以北仅在公园、庭园及植物园和温室中栽培，糯米条喜温暖湿润气候，耐寒 能力差。北方地区栽植，枝条易受冻害。喜光且耐荫。对土壤条件要求不严，有一定适应性， 耐旱、耐瘤薄的能力较强，生长旺盛、根系发达，萌囊、萌芽力强。糯米条具有较高的药用价 值，清热解毒；凉血止血。主湿热痢疾；痈疽疮疖；衄血；咳血；吐血；便血；流石破天惊；跌 打损伤，糯米条多采用播种、扦插方法繁殖苗木，组培技术结合诱变育种可以制备长势好， 增殖率高，生长周期短，次生代谢物高的新品种。
【发明内容】
[0003] 本发明所要解决的技术问题是提供糯米条组培技术结合诱变育种的快速繁殖方 法，提高突变频率，得到丰富的变异体，增加选择机会，缩短育种周期，为选育新品种提供丰 富的材料。
[0004] 为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案： 取糯米条幼嫩叶片，在肥皂水中浸泡5min，流水冲洗15min，超净工作台上0. 1%碘化 钾+0. 01%吐温处理6min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分，消毒处理过的叶片接入 改良MS+NAAO. 2mg/L+6-BA0. 5mg/L培养基中进行愈伤组织诱导，附加6. 5g/L琼脂，30g/ L蔗糖，8001x，温度23 °C，诱导的愈伤组织，在上述培养基中附加0. 2-0. 4%秋水仙碱和 3%二甲亚砜进行诱变处理，诱变一段时间后的愈伤组织加入到改良MS+6-BA0. 2-0. 3mg/ L+NAA0. 2-0. 3mg/L+5. Omg/LVC进行愈伤组织分化，获得再生植株，愈伤组织分化的培养条 件为温度25-35°C，光照30001x，光照时间14h/d，湿度70%。
[0005] 采用本发明制备的糯米条新品种长势好，诱变率高，生长周期短，次生代谢物高， 为糯米条工业化开发提供基础。
[0006] 下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不 局限于下列实施方式。
【具体实施方式】 [0007] 实施例1 取糯米条幼嫩叶片，在肥皂水中浸泡5min，流水冲洗15min，超净工作台上0. 1%碘化钾 +0. 01%吐温处理6min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分，消毒处理过的叶片接入改 良MS+NAAO. 2mg/L+6-BA0. 5mg/L培养基中进行愈伤组织诱导，附加6. 5g/L琼脂，30g/L蔗 糖，8001x，温度23°C，诱导的愈伤组织，在上述培养基中附加0. 2%秋水仙碱和3%二甲亚砜 进行诱变处理，诱变一段时间后的愈伤组织加入到改良MS+6-BA0. 2mg/L+NAA0. 2mg/L+5. 0 mg/LVC进行愈伤组织分化，获得再生植株，愈伤组织分化的培养条件为温度25-35°C，光照 30001x，光照时间14h/d，湿度70%，诱变率80%。
[0008] 实施例2 取糯米条幼嫩叶片，在肥皂水中浸泡5min，流水冲洗15min，超净工作台上0. 1%碘化钾 +0. 01%吐温处理6min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分，消毒处理过的叶片接入改 良MS+NAAO. 2mg/L+6-BA0. 5mg/L培养基中进行愈伤组织诱导，附加6. 5g/L琼脂，30g/L蔗 糖，8001x，温度23°C，诱导的愈伤组织，在上述培养基中附加0. 4%秋水仙碱和3%二甲亚砜 进行诱变处理，诱变一段时间后的愈伤组织加入到改良MS+6-BA0. 3mg/L+NAA0. 3mg/L+5. 0 mg/LVC进行愈伤组织分化，获得再生植株，愈伤组织分化的培养条件为温度25-35°C，光照 30001x，光照时间14h/d，湿度70%，诱变率75%。
[0009] 实施例3 取糯米条幼嫩叶片，在肥皂水中浸泡5min，流水冲洗15min，超净工作台上0. 1%碘化钾 +0. 01%吐温处理6min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面水分，消毒处理过的叶片接入改 良MS+NAAO. 2mg/L+6-BA0. 5mg/L培养基中进行愈伤组织诱导，附加6. 5g/L琼脂，30g/L蔗 糖，8001x，温度23°C，诱导的愈伤组织，在上述培养基中附加0. 3%秋水仙碱和3%二甲亚砜 进行诱变处理，诱变一段时间后的愈伤组织加入到改良MS+6-BA0. 2mg/L+NAA0. 2mg/L+5. 0 mg/LVC进行愈伤组织分化，获得再生植株，愈伤组织分化的培养条件为温度25-35°C，光照 30001x，光照时间14h/d，湿度70%，诱变率77%。
【权利要求】
1. 一种糯米条诱变育种的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤 组织的诱变、愈伤组织的分化，其主要步骤如下： (1) 取糯米条幼嫩的叶片，在超净工作台上对其进行消毒处理； (2) 取步骤（1)消毒处理过的叶片接入改良MS+NAAO. 2mg/L+6-BA0. 5mg/L培养基中进 行愈伤组织诱导，附加6. 5g/L琼脂，30g/L蔗糖，8001x，温度23°C ; (3) 取步骤（2)诱导的愈伤组织，在上述培养基中附加0. 2%-0. 4%秋水仙碱和3%二甲 亚砜进行诱变处理； (4 )取步骤（3 )诱变一段时间后的愈伤组织加入到改良MS+6-BA0. 2-0. 3mg/ L+NAA0. 2-0. 3mg/L+5. Omg/LVC进行愈伤组织分化，获得再生植株。
2. 按照权利要求1所述的一种糯米条诱变育种的快速繁殖方法，其特征在于：步骤 (1)中所述糯米条无菌叶片的获得为，取糯米条幼嫩叶片，在肥皂水中浸泡5min，流水冲洗 15min，超净工作台上0. 1%碘化钾+0. 01%吐温处理6min，无菌水冲洗5遍，吸水纸吸去表面 水分。
3. 按照权利要求1所述的一种糯米条诱变育种的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（3) 培养基中附加了秋水仙碱和二甲亚砜，秋水仙碱是作为诱变剂，二甲亚砜做为助剂可以增 加秋水仙碱的渗透作用，提高诱导效果。
4. 按照权利要求1所述的一种糯米条诱变育种的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4) 糯米条愈伤组织分化的培养条件为温度25-35°C，光照30001x，光照时间14h/d，湿度70%。
【文档编号】A01H4/00GK104186339SQ201410463158
【公开日】2014年12月10日 申请日期:2014年9月12日 优先权日:2014年9月12日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司