一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明涉及一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽。采用本发明的蒙古栎再生率高，操作简单且生长周期短，可以获得大量的蒙古栎幼苗。
【专利说明】 一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及蒙古栎组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]蒙古栎，Quecusmongolica,为壳斗科、栎属，落叶乔木，国家二级珍贵树种，又名:柞木，柞栎，蒙栎，柞树，是中国东北林区中主要的次生林树种。蒙古栎主要分布在中国东北、华北、西北各地，华中地区亦少量分布。在俄罗斯、日本、蒙古及朝鲜半岛也有分布。喜光，在侧方庇荫条件下，高生长较快。适应性强，耐火，耐干旱瘠薄，耐寒性强，能耐一 50°C低温。喜温凉气候，喜中性至酸性土壤，通常生于向阳干燥山坡。深根性，主根发达，不耐移植。其树皮中药名为柞树皮，春、秋季采，刮去外层粗皮，晒干或煅灰。清热利湿，解毒消肿。主治痢疾；肠炎，小儿消化不良，气管炎，黄疸，痔疮等症。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种蒙古栎的快速繁殖方法，由该方法所制备的蒙古栎再生分化率高，遗传稳定性好，可以短期内获得大量的蒙古栎幼苗。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/1+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照8001x，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基 DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6_BA，附加蔗糖 30g/L，琼脂 5.5g/L，PH6.0，光照20001x，分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.1-0.2mg/L+0.1-0.2mg/LIBA+EMT1.0-2.0mg/L，试管苗3cm，具有3_4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭:银末=1:I的基质中，基质提如在闻压灭菌锅中灭菌。
[0005]采用本发明制备的蒙古栎成活率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/1+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照8001x，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖 30g/L，琼脂 5.5g/L, PH6.0,光照20001x，分化出来的芽苗放入生根培养基 1/4MS+NAA0.lmg/L+0.lmg/LIBA+EMTl.0mg/L，试管苗3cm,具有3_4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭:银末=1:1的基质中，基质提前在高压灭菌锅中灭菌，再生植株成活率90%。
[0008]实施例2
取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/1+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照8001x，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖 30g/L，琼脂 5.5g/L, PH6.0，光照20001x，分化出来的芽苗放入生根培养基 1/4MS+NAA0.2mg/L+0.2mg/LIBA+EMT2.0mg/L，试管苗3cm,具有3_4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭:银末=1:1的基质中，基质提前在高压灭菌锅中灭菌，再生植株成活率88%。
[0009]实施例3
取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍，灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2，4-D2.0mg/1+柠檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH6.0，光照8001x，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖 30g/L，琼脂 5.5g/L, PH6.0，光照20001x，分化出来的芽苗放入生根培养基 1/4MS+NAA0.2mg/L+0.2mg/LIBA+EMTl.0mg/L，试管苗3cm,具有3_4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭:银末=1:1的基质中，基质提前在高压灭菌锅中灭菌，再生植株成活率87%。
【权利要求】
1.一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，包括腋芽的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取蒙古栎的腋芽，对其进行灭菌处理； (2)将步骤(I)灭菌处理过的蒙古栎腋芽接入培养基配方为DKW+6-BA0.3mg/L+2,4-D2.0mg/1 +朽1檬酸10mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加鹿糖30g/L,琼脂5.5g/L, PH6.0，光照 8001x ； (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织放入分化培养基DKW+NAA0.05mg/L+TDZ0.05mg/L+2.5mg/L6-BA,附加蔗糖 30g/L，琼脂 5.5g/L，PH6.0，光照 20001x ； (4)取步骤(3)分化出来的芽苗放入生根培养基1/4MS+NAA0.1-0.2mg/L+0.1-0.2mg/LIBA+EMT1.0-2.0mg/L ； (5)取步骤(4)生根后的蒙古栎试管苗进行炼苗培养。
2.按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(1)中所述蒙古栎无菌腋芽的获得为，取蒙古栎腋芽，在洗洁精中浸泡3min，清洗表面，流水冲洗0.5h，超净工作台上75%酒精处理20s，1%高锰酸钾处理15min，无菌水冲洗5遍。
3.按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(2)腋芽诱导过程中附加了柠檬酸，可以抗氧化，防止培养过程中褐化现象的产生。
4.按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中的生根培养基中附加了EMT，可以促进蒙古栎的壮苗培养。
5.按照权利要求1所述的一种蒙古栎再生植株的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(5)中蒙古栎的炼苗培养方法为试管苗3cm，具有3-4条根，在自然光下炼苗一周，移栽到基质为草炭:银末=1:1的基质中，基质提如在闻压灭菌锅中灭菌。
【文档编号】A01H4/00GK104160966SQ201410463162
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2014年9月12日 优先权日:2014年9月12日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司