一种筛选和研究线粒体疾病致病基因果蝇模型的构建方法及其应用与流程

文档序号:19104833发布日期:2019-11-12 22:33阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种构建转基因果蝇模型的方法,其特征在于,所述方法包括步骤:

(1)使所述果蝇模型翅膀神经细胞中的线粒体表达第一荧光蛋白;和

(2)使所述果蝇模型翅膀神经细胞膜表达第二荧光蛋白;

从而构建出所述转基因果蝇模型;

其中,所述第二荧光蛋白的荧光与所述第一荧光蛋白的荧光不同;所述第一荧光蛋白为绿色荧光蛋白;

并且,所述步骤(1)中包括步骤:

(1.1)将dpr-Gal4基因型果蝇与UAS-mitoGFP基因型的果蝇杂交,然后挑选出子代中同时含有这两个转基因的处女果蝇;

(1.2)将步骤(1.1)获得的处女果蝇与w1118果蝇进行杂交,挑选杂交后子代中眼睛颜色最深的雄果蝇;

(1.3)将步骤(1.2)中获得的雄果蝇分别与Sco/Cyo基因型果蝇进行单独杂交;

(1.4)确定步骤(c)杂交成功以后,验证所述雄果蝇是否携带dpr-Gal4和UAS-mitoGFP基因,如果所述雄果蝇同时携带dpr-Gal4和UAS-mitoGFP两个转基因,便将该雄果蝇的子代收集起来;由此构建出绿色荧光蛋白标记神经细胞线粒体的dpr-Gal4,UAS-mitoGFP/Cyo基因型果蝇。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述第二荧光蛋白选自下组:红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、青色荧光蛋白。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述果蝇模型的基因型为dpr-Gal4,UAS-mitoGFP/Cyo;UAS-mCD8-mCherry/TM6B.Tb。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中包括步骤:

(2.1)将步骤(1.4)建立的dpr-Gal4,UAS-mitoGFP/Cyo基因型果蝇与w;Sco/Cyo;MKRS.Sb/TM6B.Tb基因型果蝇杂交,从子代中挑选dpr-Gal4,UAS-mitoGFP/Sco;+/TM6B.Tb基因型雄果蝇;

(2.2)与步骤(2.1)同时,将UAS-mCD8-mCherry基因型果蝇与w;Cyo/T(2;3),TM3.Sb基因型果蝇杂交,从子代中挑选+/Cyo;UAS-mCD8-mCherry/TM3.Sb基因型处女果蝇;

(2.3)将步骤(2.1)获得的dpr-Gal4,UAS-mitoGFP/Sco;+/TM6B.Tb基因型雄果蝇和步骤(2.2)获得的+/Cyo;UAS-mCD8-mCherry/TM3.Sb基因型处女果蝇杂交,从子代中挑dpr-Gal4,UAS-mitoGFP/Cyo;UAS-mCD8-mCherry/TM6B.Tb基因型果蝇,由此完成所述转基因果蝇模型的构建。

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