一种蕨类植物孢子快繁方法与流程

文档序号:11070427阅读:2314来源:国知局

本发明属于蕨类植物繁育技术领域,具体是一种蕨类植物孢子快繁方法。



背景技术:

蕨类植物也称羊齿植物,是原始的维管束植物,是介于苔藓植物和种子植物之间的一个分类群。它是高等孢子植物,具有明显的世代更替,并以无性世代的孢子体占优势。

蕨类植物的孢子繁殖是一种快速繁育种苗的捷径,它具有简单易行、繁殖量大、成本低廉、简单易行等诸多优势,是蕨类繁殖的最主要方式。通常的做法是将孢子均匀播撒在基质上,待孢子发育成心型配子体后进行移栽。但是,这种做法通常存在以下缺点:(1)孢子用量多,成苗少;(2)孢子发育慢;(3)人工撒播常导致密度过大,不利于原叶体发育;(4)一旦细菌或真菌感染,则将迅速扩散,易导致原叶体死亡,终止其发育成苗。

人工种子技术是将植物离体培养中产生的体细胞胚或能发育成完整植株的组织包含在含有营养物质和具有保护功能的外壳内,并在适宜条件下能够发育成苗的颗粒体,已在多种农作物、经济作物和珍稀物种的组织培养中应用,而关于蕨类植物人工种子繁育的技术未见报道。

因此,提供一种简单易行、成活率高、发育快的孢子繁殖方法,是蕨类植物生产急需解决的技术难题。



技术实现要素:

本发明的目的是提供一种无需移栽、孢子用量少、成苗率高的蕨类植物孢子快繁方法。

为达到上述目的,本发明采用以下技术方案:

一种蕨类植物孢子快繁方法,包括以下步骤:

S1、收集蕨类植物成熟孢子,去除杂质;

S2、将MS的大量元素、赤霉素、多菌灵和海藻酸钠配成凝胶液,再与孢子搅拌均匀,制成孢子凝胶液;

S3、吸取孢子凝胶液,滴入CaCl2溶液中进行固化反应,形成孢子球,然后取出、清洗;

S4、以泥炭土和珍珠岩为基质,播种前一天用多菌灵浇透,底部垫一个托盘保水;

S5、将孢子球播种于穴盘的基质表面,每穴一颗,无需覆土,盖上保湿盖;

S6、养护管理。

进一步地,所述凝胶液的组成为:NH4NO3 1650mg/L,KNO3 1900mg/L,KH2PO4 170mg/L,MgSO4·7H2O 370mg/L,CaCl2·2H2O 440mg/L,赤霉素50~100mg/L,多菌灵0.1~0.2wt%,海藻酸钠1.5wt%。

进一步地,所述凝胶液与孢子的比例为每100mL凝胶液添加10mg孢子。

进一步地,所述CaCl2溶液的浓度是1~3wt%,反应时间为15~20min。

进一步地,所述孢子球每颗含20~40个孢子。

进一步地,所述泥炭土和珍珠岩的体积比是1:1。

进一步地,所述养护管理为:环境温度为25~28℃,湿度控制在80~90%;在30d左右发育成配子体丛,打开保湿盖,保持土壤湿润,同时每天采用0.1%多菌灵溶液喷雾1~2次。

本发明具有以下有益效果:

1、本发明方法适合全年播种,无季节限制。

2、缩短育苗周期,成苗率高。将赤霉素和营养元素包裹于人工种子中,有效延长其对孢子的促萌作用,且维持孢子从萌发至发育成成熟配子体的营养需要,孢子萌发率可提高20~30%,孢子人工种子从播种至幼孢子体丛形成只需60d。

3、孢子用量少。蕨类孢子人工种子直径大约为4mm,每10mg孢子可制成250颗人工种子,以每颗人工种子发育成单株苗来算,10mg孢子便能培育250株蕨类苗,大大减少了孢子用量,提高了生产效益。

4、无需移栽,一次培育成苗。人工种子的制作在育苗初期即控制了孢子的密度,解决了传统蕨类孢子繁殖难以控制密度的问题。

5、本发明是对现有人工种子技术的创新。现有的人工种子技术主要应用于组织培养中,是在无菌条件下进行培养的,而蕨类人工种子是在自然条件下,也就是有菌环境中培养,在包埋物质中去除糖分以及通过抑菌剂使蕨类人工种子在自然条件下发育,此外,人工种子用于蕨类孢子繁殖是具有其特别的意义,即可准确控制人工种子中的孢子数量,达到控制蕨类繁殖密度的问题。

综上所述,本发明将细小的孢子制成人工种子,通过包裹营养物质和抑菌剂加速孢子的发育,使其在短期内发育成成熟配子体,同时有效控制孢子密度,无需移栽,直接培育成苗。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明:

实施例1

按照以下步骤快繁蕨类植物:

S1、收集蕨类植物成熟孢子,去除杂质,不能及时播种时需置于4℃冷藏;

S2、蕨类人工种子制作:将MS的大量元素、赤霉素、多菌灵和海藻酸钠按比例配成凝胶液:NH4NO3 1650mg/L,KNO3 1900mg/L,KH2PO4 170mg/L,MgSO4·7H2O 370mg/L,CaCl2·2H2O 440mg/L,赤霉素60mg/L,多菌灵0.1wt%,海藻酸钠1.5wt%,将10mg孢子倒入100mL凝胶液,并搅拌均匀,制成孢子凝胶液;

S3、用口径为4mm的滴管吸取孢子凝胶液,滴入2wt%CaCl2溶液中进行固化反应,15min后形成孢子球,然后取出,于蒸馏水中清洗1~2次;形成的孢子球每颗含20~40个孢子,固化反应后形成海藻酸钙人工种皮,将人工胚乳(MS大量元素和赤霉素)和孢子包裹成球状体,可满足孢子萌发细胞的快速分裂增殖需要;

S4、播种基质准备:选用泥炭土和珍珠岩以1:1体积比混合,播种前一天用0.1wt%多菌灵浇透,底部垫一个托盘保水;

S5、将孢子球播种于穴盘的基质表面,每穴一颗,无需覆土,盖上保湿盖;

S6、养护管理:环境温度为25~28℃,湿度控制在80~90%;孢子球培养12d萌发率可达到100%,30d时即发育成配子体丛,此时可打开保湿盖,保持土壤湿润,同时每天采用0.1%多菌灵溶液喷雾1~2次,使配子体丛具有一层水膜,既有利于孢子卵细胞和精子的受精作用又具有抑菌效果,60d时配子体丛均开始形成幼孢子体,成苗率可达100%,获得250株蕨类苗。

实施例2

按照以下步骤快繁蕨类植物:

S1、收集蕨类植物成熟孢子,去除杂质;

S2、蕨类人工种子制作:将MS的大量元素、赤霉素、多菌灵和海藻酸钠按比例配成凝胶液:NH4NO3 1650mg/L,KNO3 1900mg/L,KH2PO4 170mg/L,MgSO4·7H2O 370mg/L,CaCl2·2H2O 440mg/L,赤霉素90mg/L,多菌灵0.2wt%,海藻酸钠1.5wt%,将20mg孢子倒入200mL凝胶液,并搅拌均匀,制成孢子凝胶液;

S3、用口径为4mm的滴管吸取孢子凝胶液,滴入3wt%CaCl2溶液中进行固化反应,20min后形成孢子球,然后取出,于蒸馏水中清洗1~2次;形成的孢子球每颗含20~40个孢子,固化反应后形成海藻酸钙人工种皮,将人工胚乳(MS大量元素和赤霉素)和孢子包裹成球状体,可满足孢子萌发细胞的快速分裂增殖需要;

S4、播种基质准备:选用泥炭土和珍珠岩以1:1体积比混合,播种前一天用0.1wt%多菌灵浇透,底部垫一个托盘保水;

S5、将孢子球播种于穴盘的基质表面,每穴一颗,无需覆土,盖上保湿盖;

S6、养护管理:环境温度为25~28℃,湿度控制在80~90%;孢子球培养13d萌发率可达到100%,32d时即发育成配子体丛,此时可打开保湿盖,保持土壤湿润,同时每天采用0.1%多菌灵溶液喷雾1~2次,使配子体丛具有一层水膜,既有利于孢子卵细胞和精子的受精作用又具有抑菌效果,62d时配子体丛均开始形成幼孢子体,成苗率可达100%,获得487株蕨类苗。

以上所述,仅为本发明的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,可轻易想到的变化或替换,都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此,本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。

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