本发明涉及一种有协同增效灭钉螺并能抑制钉螺上爬的氯硝柳胺与甘草酸二铵组合药物。
背景技术：
血吸虫病是一种人和动物都能受传染的寄生虫病，发病地域主要集中在长江流域及长江以南各省份中的水系较为发达的地区。钉螺作为日本血吸虫的惟一中间宿主，是血吸虫病传播中不可缺少的环节，也是血吸虫生活周期中最脆弱的一环，因此杀灭钉螺是预防血吸虫病流行的有效方法。目前，国内外主要采用化学药物氯硝柳胺灭螺，但单用氯硝柳胺存在一定的缺陷，如价格较贵，低浓度下钉螺有离水上爬现象，对鱼类及两栖类动物毒性较大等。为进一步加强灭螺效果，降低环境副作用，国内外专家正致力于植物灭螺剂、复方灭螺剂或杀螺增效剂方面的研究。
技术实现要素：
本发明提供一种能够增强灭螺效果，抑制钉螺上爬的氯硝柳胺与甘草酸二铵联合用药方案，本发明是这样来实现的，
一种灭钉螺用氯硝柳胺的组合物，所述组合物中活性成份为氯硝柳胺乙醇胺盐和甘草酸二铵。
优选氯硝柳胺乙醇胺盐与甘草酸二铵的重量比为1:0.25～50。
更优选氯硝柳胺乙醇胺盐与甘草酸二铵的重量比为1:0.5～20。
本发明所述氯硝柳胺乙醇胺盐可制备成可湿性粉，浓度为10％-90％；优选氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉浓度为50％。
本发明药物的制备工艺按照常规制药操作工艺进行即可。
本发明所述氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉可采用氯硝柳胺乙醇胺盐加入分散剂如十二烷基硫酸钠，聚丙烯酸钠，甲基戊醇，脂肪酸聚乙二醇酯或羧甲基纤维素钠等配制而成。
本发明的药物组合物具有显著的协同灭螺作用，能够有效增强氯硝柳胺单独使用时的灭螺效果，并能显著抑制钉螺的上爬。
本发明的灭螺组合物经试验证明，其灭螺活性比单独使用氯硝柳胺时作用更强。为了验证本发明的灭螺效果，发明人进行了如下实验：
1.联合用药对钉螺的灭杀实验
1.1试验材料
1.1.1实验药品
50％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉(含氯硝柳胺乙醇胺盐50％，十二烷基硫酸钠2％-30％,羧甲基纤维素钠48％-20％，NIC50)，10％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉(含氯硝柳胺乙醇胺盐10％，十二烷基硫酸钠2％-40％,羧甲基纤维素钠88％-50％，NIC10)，90％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉(含氯硝柳胺乙醇胺盐90％，十二烷基硫酸钠2％-5％,羧甲基纤维素钠8％-5％，NIC90)，甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate,DG)。氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉按照氯硝柳胺乙醇胺盐含量加入去离子水配制成相应浓度，甘草酸二铵加入去离子水配置成相应浓度。
1.1.2钉螺
采自江西省九江市星子县，置(22±2)℃室温下，实验室饲养1～2d，经逸蚴剔除阳性螺，选择活力强的7～8旋阴性成螺用于实验。
1.2试验方法
1.3浸杀钉螺实验
按WHO规定的“杀螺剂实验室终筛方法”的浸泡法进行，将钉螺分别浸泡于盛有实验溶液的玻璃瓶中，每瓶投螺30只，即按每螺/l0ml溶液比例浸泡于实验溶液中，加盖尼龙网塞，使钉螺完全浸泡于溶液中并便于观察钉螺上爬附壁、闭厣及脱落情况。置于(22±2)℃的室温中浸泡24、48、72、96h。实验开始后连续观察4h，记录钉螺上爬率，于浸泡24、48、72、96h时分别取出钉螺，及时用去氯水冲洗，盛于培养皿中，置(22±2)℃的室温下，分别于取出浸泡液24h后用水测法及针刺法鉴别钉螺死活，计算各组钉螺死亡率，空白对照组以等量去氯水平行试验，试验重复3次，以3次平均值计算。
1.4计算半数致死浓度及增效比
采用bliss法计算钉螺24、48、72h半数致死浓度(LC50)，t检验测定氯硝柳胺单用及与甘草酸二铵联合用药LC50值的差异有无统计学意义，卡方检验测定氯硝柳胺单用以及与甘草酸二铵联合用药的两两对应剂量组死亡率差异有无统计学意义，增效比(SR)根据单独用药的LC50值与联合用药的LC50值进行比较，SR＝药物单用LC50/联合用药LC50，若SR＝1，表示该复方溶液的作用类似单用药物作用；若SR>1，有增效作用；若SR<l，有拮抗作用。
1.3实验结果
从实验结果来看，氯硝柳胺单独用药明显会导致钉螺的上爬现象，而甘草酸二铵单独用药则会抑制钉螺的上爬。联合用药后，给药组的灭螺效果明显强于氯硝柳胺单独给药组，且联合给药组钉螺上爬现象明显降低。增效比(SR)显示，联合用药后的灭螺作用为增效作用(SR均>1)。
表1不同浓度氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉灭螺效果
表2甘草酸二铵与50％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉复配灭螺效果
表3甘草酸二铵与10％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉复配灭螺效果
表4甘草酸二铵与90％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉复配灭螺效果
具体实施方式
实施例1
在无菌洁净的条件下，将100kg50％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与12.5kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例2
在无菌洁净的条件下，将100kg50％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与25kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例3
在无菌洁净的条件下，将50kg50％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与100kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例4
在无菌洁净的条件下，将10kg50％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与100kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例5
在无菌洁净的条件下，将4kg50％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与100kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例6
在无菌洁净的条件下，将500kg10％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与12.5kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例7
在无菌洁净的条件下，将500kg10％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与25kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例8
在无菌洁净的条件下，将100kg10％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与100kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例9
在无菌洁净的条件下，将50kg10％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与100kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例10
在无菌洁净的条件下，将20kg10％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与100kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例11
在无菌洁净的条件下，将100kg90％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与22.5kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例12
在无菌洁净的条件下，将50kg90％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与22.5kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例13
在无菌洁净的条件下，将5kg90％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与45kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例14
在无菌洁净的条件下，将5kg90％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与90kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例15
在无菌洁净的条件下，将5kg90％氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉与225kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例16
在无菌洁净的条件下，将50kg氯硝柳胺乙醇胺盐与12.5kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例17
在无菌洁净的条件下，将50kg氯硝柳胺乙醇胺盐与25kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例18
在无菌洁净的条件下，将50kg氯硝柳胺乙醇胺盐与50kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例19
在无菌洁净的条件下，将5kg氯硝柳胺乙醇胺盐与100kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。
实施例20
在无菌洁净的条件下，将2kg氯硝柳胺乙醇胺盐与100kg甘草酸二铵均匀混合，混合均匀后经超微粉碎机粉碎，制成粉剂100包。