一种香蕉丛生芽出根率高的培养条件的筛选方法与流程

文档序号:12797397阅读:408来源:国知局

本发明属于香蕉组织培养技术领域,尤其涉及一种香蕉丛生芽出根率高的培养条件的筛选方法。



背景技术:

香蕉(学名:musananalour.)芭蕉科芭蕉属植物,又指其果实。热带地区广泛栽培食用。香蕉味香、富含营养,终年可收获,在温带地区也很受重视。植株为大型草本,从根状茎发出,由叶鞘下部形成高3~6公尺(10~20尺)的假杆;叶长圆形至椭圆形,有的长达3~3.5公尺(10~11.5尺),宽65公分(26寸),10~20枚簇生茎顶。穗状花序下垂[1],由假杆顶端抽出,花多数,淡黄色;果序弯垂,结果10~20串,约50~150个。植株结果后枯死,由根状茎长出的吸根继续繁殖,每一根株可活多年。原产亚洲东南部:台湾、海南、广东、广西等地区均有栽培。目前香蕉是一种广受欢迎的水果,也是部分地区的主要粮食,拥有极大市场需求量,对香蕉进行快速繁殖的研究具有一定的必要性,不仅能解决庞大的市场需求量,也能在一定程度上保存优良的香蕉品种,组织培养是香蕉快速繁殖的方法之一,然而现有的香蕉培养基中极少有通过增强光源调节香蕉生长的技术。

铈是周期系第ιιι族副族镧系元素,一种稀土元素。原子序数58。稳定同位素:136、138、140、142。灰色金属,有展性。密度:正方晶体6.9,立方晶体6.7。熔点799℃,沸点3426℃。铈是一种银灰色的活泼金属,粉末在空气中易自燃,易溶于酸。铈的名称来源于小行星谷神星的英文名。铈在地壳中的含量约0.0046%,是稀土元素中丰度最高的。



技术实现要素:

基于现有技术存在上述问题,本发明提供一种香蕉丛生芽出根率高的培养条件的筛选方法,通过使用单一变量法调整测试增强光源的波长对香蕉组织培养苗的生理影响,确定最适增强光源波长,并根据不同波长光源对香蕉组培苗的影响,确定不同波长光源出组合,并通过保持增强光源不变反向确定基础培养基,同时引入组培苗的实际出根率作为筛选标准,更加适合商业工厂化生产。

一种香蕉丛生芽出根率高的培养条件的筛选方法,其包括以下步骤:

步骤s10确定初步筛选范围,检索查阅相关文献资料,对比其他植物物种组培生根过程中添加增强光源种类并确定光源波长的初步筛选范围;

步骤s20选择外植体,选择健康、生长环境一致并且生长状态相似的香蕉丛生芽,将丛生芽分割成单芽;

步骤s30对照培养,以1/2ms培养基为基础培养基,阿司匹林溶液的体积分数是为0.03%、naa(萘乙酸)的浓度为0.15mg/l、pp333(多效唑)的浓度为1mg/l、硝酸镧的浓度为3g/l,维生素b12的浓度为0.3mg/l,琼脂粉的浓度为10g/l、白砂糖的浓度为7g/l,配制成测试用培养基,分别接种相同量的香蕉丛生芽,并进行常规生根组织培养作为对照组,在常规培养的基础上条件不同波段增强增强光源作为实验组,对照组和实验组都设置多个平行组;

步骤s40记录检测参数,培养20天后统计每个实验组和对照组中出根的存活香蕉芽的数量,并计算有效出根率;

步骤s50生长量计算,分别将相同光源波长的每个平行实验组中的香蕉芽取出,用清水冲洗干净,擦干表面水分后将根部切出,并对根部进行称重,记录重量;

步骤s60计算评估因数,将有效出根率乘以根重量的十分一倍得出评估因数,对比不同波长梯度的评估因数,挑选出数值最大的评估因数对应的光源种类和光源波长;

步骤s70缩小筛选范围,使用步骤s60中挑选出的增强光源波长范围重复进行步骤s10-s60缩小筛选范围或者确定最适波长范围;

步骤s80反向筛选基础培养基,使用步骤s70确定的最适波长范围搭配不同基础培养基,重复步骤s40和步骤s50,并使用步骤s60的计算方法计算评估因数,确定最适基础培养基;

步骤s90不同波长组合筛选,通过单一因数确定不同波长对香蕉丛生芽增殖的生理参数影响,调整最适合波长组合。

优选地,所述的步骤s30中每个实验组或者对照组设置5-15个平行组。

优选地,所述的步骤s70中重复的次数是2-3次。

优选地,所述的步骤s80中不同的基础培养基包括1/2ms培养基、ms培养基、n6培养基、b5培养基、nitsh培养基、white培养基和miller培养基。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的描述。

一种香蕉丛生芽出根率高的培养条件的筛选方法,其包括以下步骤:

步骤s10确定初步筛选范围,检索查阅相关文献资料,对比其他植物物种组培生根过程中添加增强光源种类并确定光源波长的初步筛选范围;

步骤s20选择外植体,选择健康、生长环境一致并且生长状态相似的香蕉丛生芽,将丛生芽分割成单芽;

步骤s30对照培养,以1/2ms培养基为基础培养基,阿司匹林溶液的体积分数是为0.03%、naa(萘乙酸)的浓度为0.15mg/l、pp333(多效唑)的浓度为1mg/l、硝酸镧的浓度为3g/l,维生素b12的浓度为0.3mg/l,琼脂粉的浓度为10g/l、白砂糖的浓度为7g/l,配制成测试用培养基,分别接种相同量的香蕉丛生芽,并进行常规生根组织培养作为对照组,在常规培养的基础上条件不同波段增强增强光源作为实验组,对照组和实验组都设置多个平行组;

步骤s40记录检测参数,培养20天后统计每个实验组和对照组中出根的存活香蕉芽的数量,并计算有效出根率;

步骤s50生长量计算,分别将相同光源波长的每个平行实验组中的香蕉芽取出,用清水冲洗干净,擦干表面水分后将根部切出,并对根部进行称重,记录重量;

步骤s60计算评估因数,将有效出根率乘以根重量的十分一倍得出评估因数,对比不同波长梯度的评估因数,挑选出数值最大的评估因数对应的光源种类和光源波长;

步骤s70缩小筛选范围,使用步骤s60中挑选出的增强光源波长范围重复进行步骤s10-s60缩小筛选范围或者确定最适波长范围;

步骤s80反向筛选基础培养基,使用步骤s70确定的最适波长范围搭配不同基础培养基,重复步骤s40和步骤s50,并使用步骤s60的计算方法计算评估因数,确定最适基础培养基;

步骤s90不同波长组合筛选,通过单一因数确定不同波长对香蕉丛生芽增殖的生理参数影响,调整最适合波长组合。

作为优选实施例,所述的步骤s30中每个实验组或者对照组设置10个平行组。

作为优选实施例,所述的步骤s70中重复的次数是3次。

作为优选实施例,所述的步骤s80中不同的基础培养基包括1/2ms培养基、ms培养基、n6培养基、b5培养基、nitsh培养基、white培养基和miller培养基。

经过筛选确定如下增强光源具有更高的实际出根率和根的质量:使用自然光、蓝光增强光源和红光增强光源照射丛生芽,红色光源是波段为650nm-700nm的红光,蓝色光源是波段为450nm-470nm的蓝光,光照时间为光照16小时/黑暗8小时,红光80%,蓝光20%。

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