本发明涉及水产养殖技术领域，尤其涉及一种黑足鲍人工育苗方法。
背景技术：
鲍鱼是名贵的海洋食用贝类，具有“软黄金”之称，被誉为海产八珍之首。鲍鱼的鲜品可食部分含有24％的蛋白质；干品中含有40％的蛋白质、33.7％的糖元以及其他营养物质，因而，鲍鱼具有较高的营养价值。另外，鲍鱼作为名贵的食材还具有明目补虚、清热滋阴、养血益胃等功效，因而鲍鱼具有较高的药用价值。由于鲍鱼所具有的营养价值和药用价值，因而鲍鱼具有潜在的市场价值。
我国是世界上鲍鱼养殖规模和产量最大的国家，其中，产量占世界鲍鱼产量的79％。然而，海洋环境的不断恶化、亲本累代养殖以及管理原因等使得鲍鱼种质不断退化，且出现疾病频发、生长缓慢以及死亡率高的现象。为解决上述问题，需要在解决管理问题的同时引进新的优良品种，以改善当前的养殖现状。
黑足鲍又称彩虹鲍，是新西兰的独有品种，也是世界上最大的鲍鱼之一。黑足鲍具有抗逆性强、生长速度快以及色泽艳丽等的特性，因而是一种品质较好的鲍种。由于黑足鲍在新西兰的生长环境与我国北方海域相似，且黑足鲍在海水中的生长温度大约为2-22℃，因此，黑足鲍能够引入我国养殖。目前，鲍鱼育苗的基本技术路线为：性腺促熟—催产—受精孵化—附着—幼鲍培育。然而，由于种质的差异以及生长环境的不同，使用现有鲍鱼育苗技术并不能促使黑足鲍性腺发育完全成熟，致使黑足鲍的受精率不高。不高的受精率致使黑足鲍的幼体较少，进而使得黑足鲍的产出量较少，影响黑足鲍的繁殖以及鲍种间研究。另外，现有鲍鱼育苗技术仅能在春季及秋季育苗黑足鲍，致使黑足鲍的育苗出现空白期，进而使得黑足鲍的供应可能出现断货现象。
技术实现要素：
本发明提供一种黑足鲍人工育苗方法，以解决黑足鲍使用现有鲍鱼育苗方法受精率不高的问题。
本发明提供一种黑足鲍人工育苗方法，该方法包括：
s01：在水温为14-16℃条件下培育黑足鲍的性腺成熟度发育至20-30％。
将引入或购买的成活黑足鲍在海水温度为14-16℃条件下自然培育。培育一段时间后，观察黑足鲍性腺的发育程度。当观察到黑足鲍的性腺成熟度达到20-30％，可以进行性腺促熟，以备黑足鲍育苗。
s02：通过调整光周期和光质使所述黑足鲍的性腺成熟度由20-30％促熟至65-75％。
由于黑足鲍为新西兰独有的鲍鱼品种，因而黑足鲍具有符合其生长需求的光照要求。黑足鲍对于光照具有较高的要求，不同的光照强度、光质以及光照周期能够使黑足鲍处于不同的生理期。因而，本发明通过调整光照周期以及光质等诱导黑足鲍的性腺快速发育。当培育的黑足鲍性腺成熟度达到20-30％时，通过调整光照周期和光质促使黑足鲍的性腺成熟度达到65-75％。观察黑足鲍性腺外观，当黑足鲍的性腺成熟度达到65-75％时，停止调整光照周期。性腺成熟度达到65-75％的黑足鲍作为种鲍放置于温度为15℃的环境中养殖。种鲍养殖过程中需要注意更换水，清理残饵人、粪便等，同时定期投喂海带，以保证黑足鲍种鲍的存活及生命活力。
由于黑足鲍在较低的温度环境中生长较为缓慢，因而黑足鲍的性腺发育也较为缓慢。因此，在较低的温度环境中，黑足鲍的性腺成熟度由65-75％自然生长达到性腺完全成熟需要将长的时间。黑足鲍较长时间的自然生长发育能够给育苗提供充足的准备时间，以准备好育苗场地、装备等。由于黑足鲍一年两次繁殖，因而较长时间的自然生长发育能够为黑足鲍的全年育苗提供种鲍，进而全年能够随时实现黑足鲍育苗。如当培育场地空闲时，可以将性腺成熟度达到65-75％的黑足鲍进一步促熟性腺，节省黑足鲍性腺促熟时间，实现黑足鲍的排精或排卵。
进一步，通过调节光照周期以及光质等诱导黑足鲍的性腺成熟度达到70％。若黑足鲍的性腺成熟度较高，则黑足鲍的性腺在较短时间内便自然发育。若性腺发育成熟时，场地、设备等均不能满足黑足鲍育苗，则黑足鲍会自然排精或排卵，以致受精。但由于环境等条件的限制，黑足鲍的排精率或排卵率不高，导致受精率不高，进而造成种鲍浪费。因而，在采用调整光照周期促进黑足鲍的性腺发育时，性腺成熟度不能过高。若黑足鲍的性腺成熟度较低，则黑足鲍的性腺需要较长时间的自然发育。而较低的性腺成熟度促熟需要较长的时间，影响黑足鲍的繁殖。在本发明提供的黑足鲍人工育苗方法中，采用调整光照周期和光质促进黑足鲍的性腺成熟度达到70％。70％的性腺成熟度能够在黑足鲍育苗时促进种鲍性腺的快速促熟，同时还能够避免因较高性腺成熟度导致黑足鲍在较短时间内自然发育成熟。
s03：升高水温至17℃，调整光周期和光质促使所述黑足鲍的性腺成熟度发育至95-98％。
确定黑足鲍的育苗时间后，将海水温度升高至17℃，以使黑足鲍提前适宜海水温度，进而为排精或排卵做准备。海水温度调整后，通过调整光周期和光质将性腺成熟度已达到65-75％的黑足鲍促熟至95-98％。黑足鲍的性腺成熟度为95-98％时，精子和卵子发育成熟，能够较好的形成受精卵，提高受精率。由于此次性腺促熟之前，黑足鲍的性腺成熟度已达到65-75％，因而黑足鲍的性腺能够较短时间内发育完全，并进行排精或排卵。本发明提供的黑足鲍人工育苗方法中的性腺促熟方法能够适应临时育苗场地安排或急需鲍鱼的情形，弥补鲍鱼市场空缺。
s04：将性腺成熟度为95-98％的所述黑足鲍阴干后单个放入水温为17℃的催产溶液中，使所述黑足鲍排精或排卵。
黑足鲍在排精或排卵之前需要事先配置催产溶液，以利于黑足鲍排精或排卵。催产溶液的具体配置过程为：购买市售等级为分析纯的h2o2(过氧化氢)和naoh(氢氧化钠)。将购买的h2o2使用蒸馏水稀释，配制为浓度是60g/l、体积为1l的h2o2溶液。将naoh使用蒸馏水配制为浓度是1mol/l、体积为1l的naoh溶液。将浓度为60g/l的h2o2、浓度为1mol/l的naoh以及沙滤后的海水按照体积比为15：11：10000混合，混合溶液即为催产溶液。将催产溶液分别放置于多个催产槽中，并控制催产溶液的温度为17℃，以备黑足鲍排精或排卵。
挑选性腺发育成熟、生命活力较强的种鲍，以备排精或排卵。黑足鲍种鲍在养殖的过程中，身体上可能沾染残饵、粪便等杂质。粪便等杂质会与黑足鲍排精或排卵所产生的精子或卵子混合，使精子或卵子受到污染。为避免精子或卵子受到污染，挑选出的黑足鲍需要洗涮干净。为刺激黑足鲍排精或排卵，洗涮干净后的黑足鲍要阴干处理1小时。为提高黑足鲍的受精率，在本发明中需要分别收集黑足鲍的精子和卵子，因而阴干后的黑足鲍单个放置于催产槽中。催产溶液中的h2o2和naoh反应能够产生臭氧，产生的臭氧能够刺激黑足鲍产生较多的胰蛋白酶。胰蛋白酶能够促进黑足鲍促性腺激素的分泌，进而促进黑足鲍排精或排卵，且黑足鲍具有较大的排精或排卵量。黑足鲍放置于催产槽4-5小时后便开始排精或排卵，且排精率和排卵率能够达到50％。
s05：取出所述黑足鲍的精子和卵子，混匀后形成受精卵。
取出催产槽中的精子和卵子，精子和卵子仍位于催产溶液中。将位于催产溶液中的精子和卵子混合，精子和卵子完成受精过程，形成受精卵。由于种鲍分别在单个催产槽中排精或排卵，单个催产槽中的精子量和卵子量已知，因而能够根据催产槽中的卵子数量添加适量的精子，使得每个卵子都受精，提高受精率。本发明提供的人工育苗方法中，黑足鲍的受精率能够达到85％。
s06：所述受精卵洗卵后转入光照强度为200lx的孵化池中，孵化形成浮游幼体。
通过显微镜观察受精卵的发育情况，以便于通过洗卵洗去受精卵上过多的精子以及黑足鲍排精或排卵过程中的其他分泌物。为防止分泌物及过多的精子污染受精卵，当通过显微镜发现受精卵处于二分化时期时，便将受精卵从催产溶液中取，从而进行洗卵过程。
洗卵后的受精卵直接放入海水温度为17℃的孵化池中进行孵化过程，以形成浮游幼体。由于黑足鲍的受精率还未孵化，为增大黑足鲍受精卵的孵化率，孵化池的光照强度较低，约为200lx。在本发明中，黑足鲍受精卵的孵化率约为70-85％。
s07：将所述浮游幼体转入备有附着基的育苗池中，所述浮游幼体变态为幼鲍。
黑足鲍在排精或排卵前需要事先准备浮游幼体的附着基。在本发明中，浮游幼体的附着基为接种底栖硅藻的波纹板。波纹板接种底栖硅藻的具体制备过程为：在波纹板上接种底栖硅藻，底栖硅藻经过大约15天的培养后，波纹板上底栖硅藻的颜色逐渐变为深褐色时，可以进行第二次扩大培养。根据黑足鲍育苗规模需求可以进行第三次、第四次扩大培养，直至满足育苗需求。
黑足鲍的受精卵在形成65-75h后，大部分的浮游幼体到达面盘后期阶段，进入底栖匍匐阶段。进入底栖匍匐阶段的浮游幼体在附着后变态为幼鲍，因而需要将浮游幼体从孵化池中转移到具有附着基的育苗池中。浮游幼体转移到育苗池前，需要彻底对育苗池清理及消毒，以减少病菌及桡足类。为使浮游幼体适应育苗池，育苗池中海水温度设置为17℃。由于浮游幼体为无脊椎状态，通过捕捞的形式可能会伤害浮游幼体，造成不必要的损失。为避免浮游幼体受到伤害，在本发明中，通过虹吸法将浮游幼体转移。浮游幼体在从孵化池转移到育苗池的过程中均为在黑暗条件下操作，降低光照刺激，进而提高浮游幼体的成活率。在保证浮游幼体生长的空间下最大化的利用育苗池，育苗池中浮游幼体的投入密度为1×105/m2。
浮游幼体投入育苗池2-3天内需要遮光处理，以降低光照对浮游幼体的刺激。浮游幼体变态为幼鲍后附着在附着基上，幼鲍附着后开始通流水、投饵，以使幼鲍在水循环状态下生长。根据幼鲍在附着基上的附着情况加大水流量，并连续通入空气，以给幼鲍提供充足的氧气。幼鲍在培育的过程中要适时施肥，以促进底栖硅藻的生长。另外，桡足类常常侵袭幼鲍，造成幼鲍死亡，进而降低黑足鲍育苗的产出量。为降低育苗池中桡足类的数量，需要用敌百虫不定期清除桡足类。
本发明的实施例提供的技术方案可以包括以下有益效果：
在本发明提供一种黑足鲍人工育苗方法中，将黑足鲍自然培育至性腺成熟度为20-30％。通过调整光照周期和光质的方式将黑足鲍的性腺成熟度促熟至65-75％，实现黑足鲍的第一次性腺促熟。将第一次性腺促熟的黑足鲍放置于温度为15℃的环境中养殖。由于黑足鲍在较低的温度环境中能够较为缓慢的生长，因而黑足鲍的性腺也能够慢慢生长发育，直至完全成熟，仅是成熟度由65-75％自然生长达到性腺完全成熟的时间较长而已。黑足鲍较长时间的自然生长发育能够给育苗提供充足的时间。由于黑足鲍一年两次繁殖，因而较长时间的自然生长发育能够使得黑足鲍全年具有种鲍，进而全年能够随时实现黑足鲍育苗。当需要育苗时，进一步通过调整光照周期和光质将性腺成熟度已达到65-75％的黑足鲍促熟至95-98％，使得黑足鲍的精子或卵子发育成熟，利于受精，进而提高受精率。性腺发育成熟的黑足鲍在阴干、h2o2和naoh的刺激下排精或排卵，且排精或排卵量较多，能够达到50％。由于种鲍分别在单个催产槽中排精或排卵，单个催产槽中的精子量和卵子量已知，因而能够根据催产槽中的卵子数量添加适量的精子，使得每个卵子都受精，提高受精率。受精卵经洗卵后放入水温为17℃的孵化池中孵化为浮游幼体。浮游幼体到达面盘后期阶段时通过虹吸法转移到备有附着基的育苗池中，以便附着后变态为幼鲍。本发明提供的黑足鲍人工育苗方法通过调节光周期和光质促进黑足鲍性腺成熟，并通过阴干、h2o2和naoh的刺激排精或排卵，进而形成受精卵。本发明提供的方法操作简便，黑足鲍性腺发育成熟，排精或排卵率较高，受精率能够达到85％。
应当理解的是，以上的一般描述和后文的细节描述仅是示例性和解释性的，并不能限制本发明。
附图说明
此处的附图被并入说明书中并构成本说明书的一部分，示出了符合本发明的实施例，并与说明书一起用于解释本发明的原理。
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，对于本领域普通技术人员而言，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例提供的黑足鲍人工育苗方法的流程示意图。
具体实施方式
这里将详细地对示例性实施例进行说明，其示例表示在附图中。下面的描述涉及附图时，除非另有表示，不同附图中的相同数字表示相同或相似的要素。以下示例性实施例中所描述的实施方式并不代表与本发明相一致的所有实施方式。相反，它们仅是与如所附权利要求书中所详述的、本发明的一些方面相一致的装置和方法的例子。
请参考附图1，附图1示出了本发明实施例提供的黑足鲍人工育苗方法的流程示意图。以下具体实施例的描述均以附图1为基础。
实施例1
本发明提供一种黑足鲍人工育苗方法，该方法包括：
s101：将引入或购买的黑足鲍在海水温度为14℃条件下培育，直至黑足鲍的性腺成熟度发育至20-30％。
s102：通过调整光周期和光质使黑足鲍的性腺成熟度由20％促熟至65％。
s103：黑足鲍的性腺成熟度达到65％后，升高水温至17℃，同时调整光周期和光质促使黑足鲍的性腺成熟度由65％发育至95％。
s104：将性腺成熟度为95％的黑足鲍阴干1h，阴干后的黑足鲍单个放入水温为17℃的催产溶液中，以使黑足鲍排精或排卵。
s105：分别取出催产溶液中的精子和卵子，将精子和卵子混匀、受精形成受精卵。
s106：受精卵洗卵后转入光照强度为200lx的孵化池中，受精卵孵化形成浮游幼体。
s107：浮游幼体生长发育进入底栖匍匐阶段后，通过虹吸法将浮游幼体转入备有附着基的育苗池中，浮游幼体变态为幼鲍。
本发明实施例提供的黑足鲍人工育苗方法中，黑足鲍的排精率为45％，排卵率为43％，受精率为80％，孵化率为75％。
实施例2
本发明提供一种黑足鲍人工育苗方法，该方法包括：
s201：将引入或购买的黑足鲍在海水温度为16℃条件下培育，直至黑足鲍的性腺成熟度发育至30％。
s202：通过调整光周期和光质使黑足鲍的性腺成熟度由30％促熟至75％。性腺成熟度促熟至75％的黑足鲍在温度为15℃条件下养殖，以给黑足鲍全年育苗提供种鲍。
s203：黑足鲍的性腺成熟度达到75％后，升高水温至17℃，同时调整光周期和光质促使黑足鲍的性腺成熟度由75％发育至98％。
s204：分别配置浓度为60g/l的h2o2溶液和浓度为1mol/l的naoh溶液，将浓度为60g/l的h2o2溶液、浓度为1mol/l的naoh溶液和沙滤后的海水按照体积比为15：11：10000混合形成催产溶液。将性腺成熟度为98％的黑足鲍阴干1h，阴干后的黑足鲍单个放入水温为17℃的催产溶液中，以使黑足鲍排精或排卵。
s205：分别取出催产溶液中的精子和卵子，将精子和卵子混匀、受精形成受精卵。
s206：通过显微镜观察受精卵的发育情况。当观察到受精卵处于二分化时期时，对受精卵洗卵。受精卵洗卵后转入光照强度为200lx的孵化池中，以使受精卵孵化形成浮游幼体。
s207：浮游幼体生长发育进入底栖匍匐阶段后，通过虹吸法在无光照条件下将浮游幼体转入备有附着基的育苗池中，浮游幼体变态为幼鲍。其中，育苗池中浮游幼体的投入密度为1×105/m2；附着基为波纹板接种的底栖硅藻。幼鲍在附着基上附着后，开始通气、通流水。另外，根据幼鲍的附着情况逐渐增大水流量。幼鲍在培育的过程中要适时施肥，以促进底栖硅藻的生长。同时，施用敌百虫不定期清除育苗池中的桡足类。
本发明实施例提供的黑足鲍人工育苗方法中，黑足鲍的排精率为48％，排卵率为49％，受精率为85％，孵化率为80％。
实施例3
本发明提供一种黑足鲍人工育苗方法，该方法包括：
s301：将引入或购买的黑足鲍在海水温度为15℃条件下培育，直至黑足鲍的性腺成熟度发育至25％。
s302：通过调整光周期和光质使黑足鲍的性腺成熟度由25％促熟至70％。性腺成熟度促熟至70％的黑足鲍在温度为15℃条件下养殖，以给黑足鲍全年育苗提供种鲍。
s303：黑足鲍的性腺成熟度达到70％后，升高水温至17℃，同时调整光周期和光质促使黑足鲍的性腺成熟度由70％发育至98％。
s304：分别配置浓度为60g/l的h2o2溶液和浓度为1mol/l的naoh溶液，将浓度为60g/l的h2o2溶液、浓度为1mol/l的naoh溶液和沙滤后的海水按照体积比为15：11：10000混合形成催产溶液。将性腺成熟度为98％的黑足鲍阴干1h，阴干后的黑足鲍单个放入水温为17℃的催产溶液中，以使黑足鲍排精或排卵。
s305：分别取出催产溶液中的精子和卵子，将精子和卵子混匀、受精形成受精卵。
s306：通过显微镜观察受精卵的发育情况。当观察到受精卵处于二分化时期时，对受精卵洗卵。受精卵洗卵后转入光照强度为200lx的孵化池中，以使受精卵孵化形成浮游幼体。
s307：浮游幼体生长发育进入底栖匍匐阶段后，通过虹吸法在无光照条件下将浮游幼体转入备有附着基的育苗池中，浮游幼体变态为幼鲍。其中，育苗池中浮游幼体的投入密度为1×105/m2；附着基为波纹板接种的底栖硅藻。幼鲍在附着基上附着后，开始通气、通流水。另外，根据幼鲍的附着情况逐渐增大水流量。幼鲍在培育的过程中要适时施肥，以促进底栖硅藻的生长。同时，施用敌百虫不定期清除育苗池中的桡足类。
本发明实施例提供的黑足鲍人工育苗方法中，黑足鲍的排精率为50％，排卵率为50％，受精率为85％，孵化率为85％。
本领域技术人员在考虑说明书及实践这里发明的公开后，将容易想到本发明的其它实施方案。本申请旨在涵盖本发明的任何变型、用途或者适应性变化，这些变型、用途或者适应性变化遵循本发明的一般性原理并包括本发明未公开的本技术领域中的公知常识或惯用技术手段。说明书和实施例仅被视为示例性的，本发明的真正范围和精神由下面的权利要求指出。
应当理解的是，诸如“第一”和“第二”等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。本发明并不局限于上面已经描述并在附图中示出的精确结构，并且可以在不脱离其范围进行各种修改和改变。本发明的范围仅由所附的权利要求来限制。