本发明属于养殖领域，具体涉及一种单环刺螠人工培育苗种的方法。
背景技术：
单环刺螠(Urechis unicinctus)，属于螠虫动物门、无管螠目、刺螠科、刺螠属的海洋底栖生物。单环刺螠在中日韩均有分布，国内主要分布在黄渤海沿岸潮间带或潮下带泥性底质中，在山东省蓬莱和烟台等地产量较大。
现在的单环刺螠人工培育苗种是春季育苗。普通的春季育苗要到6月中旬以后体长1cm左右才能出池，外界水温已超过25°(河北沿海)，无法增殖放流和池塘养殖，成活率极低、摄食量很少，只能进行室内养殖，条件受限，当年也无法养成商品上市。
技术实现要素：
针对上述问题，本发明的发明人提出了一种单环刺螠人工培育苗种的秋季育苗方法。具体的，一种单环刺螠人工培育苗种的方法，在秋季开始育苗，包括以下步骤：
S1，单环刺螠亲体挑选和暂养；
S2，人工催产、自然受精；
S3，孵化与选幼；
S4，浮游幼虫的日常管理；
S5，幼螠越冬培养。
可选的，所述S1单环刺螠亲体挑选和暂养的步骤包括：
挑选标准为，选9月中旬-10月中旬生殖盛期的体长≥20cm的单环刺螠亲体，生殖力≥106eggs/尾，卵子直径约为150-200um；
暂养条件为，16-18℃自然水温，pH 7.5-8.5，密度100尾/m3，换水1次/日，适量充气；投喂单胞藻或者商品饲料。
可选的，所述S2人工催产步骤包括变温刺激步骤和性腺诱导步骤；
所述变温刺激步骤为将所有单环刺螠亲体暂养水温由18℃快速降至9℃，保持此温度2小时，然后再快速升至18℃，然后转移至亲体产卵池；
所述性腺诱导步骤为，将提前制备好的性腺悬液，倒入亲体产卵池中，进行充气，使悬液分布均匀，充分接触亲体，经过变温刺激和性腺诱导的亲体自动排卵排精，进行自然受精。
进一步可选的，
所述性腺悬液的制备方法和剂量为：按制备性腺悬液的亲体占要进行性腺诱导的亲体的5％重量比的比例，随机捞取未经变温刺激步骤和性腺诱导步骤的亲体，雌雄不限，用剪刀在单环刺螠吻处剪开一个0.5-1cm的纵向小口，待肾管自然流出后，剪取肾管，肾管带一些体壁，在盛有过滤海水的容器中洗去肾管表面的杂物，使用干净的手术剪剪开肾管，将雌配子或雄配子制成性腺混合悬液；即配即用；可选的，所述S2的受精步骤还包括：
镜检和洗卵：受精后20-30min镜检受精情况，当受精率≥95％、镜检看到受精卵的受精膜完全举起后，进行洗卵，移出所有亲体，用40-60目筛网捞除水中杂质，用120目筛网换水，弃上层1/2水，再加满水，根据镜检情况，确定洗卵次数 (一般3-4次)，直至水中无精子。
可选的，所述S3孵化与选幼步骤包括：
静水孵化：孵化期间不充气，上下搅动1次/2h，每次至胚胎悬浮；
选幼：孵化形成之后，事先刷干净邻近培养池，加水，幼虫聚集到水面后虹吸法移池，移池后充气，原池静置后，进行吸底，将未孵化的卵吸出。
可选的，所述S4浮游幼虫的日常管理步骤包括：
控制幼虫密度：
0-48小时，受精卵20-30个/ml；
3-20天，担轮幼虫1-4个/ml；
21-25天，体节幼虫1-2个/ml；
26-30天，蠕状虫幼虫0.2-0.8个/ml；
31-35天，幼螠30-40/cm2
控制水温：16-23℃；
换水：选幼时各池水面高度为50-60cm，之后5天，每天加水10cm；选幼5天后，即受精6天后，用300目筛绢进行换水；1-2次/日，每次更换全量体积的1/2-1/3 次，早晨换水或者早晚各1次；
投饵：消化道打通后，开始投饵，后每天换水后进行投饵；前期2-10天开口饵料为金藻60％+角毛藻20％+小球藻20％；后期11天-35天，饵料为为角毛藻50％+塔胞藻50％+螺旋藻粉/酵母1g/m3；
吸底：每2-3d或3-4d吸底池；
停气10-20min，然后用吸污器进行吸底，吸出来的水静置后收集上层浮游的幼虫倒回培养池中；
倒池。
可选的，所述S5幼螠越冬培养步骤包括：
越冬池铺泥：海泥先在冷库中冷冻两个月以上，然后将冻泥加水化冻，用60-80目过滤，将泥浆泼洒池中，搅匀，静置使泥自然沉降1天，至底泥厚度2-5cm，换水并将水中的悬浮物除去，缓慢加入新水，至池中清澈即可，池中加水10cm。
幼虫移池：将幼螠采用虹吸的方法导入越冬泥池中或采用80-100目网箱过滤幼虫的方式将幼虫转入越冬池。
换水：待幼虫全部钻泥以后，直接虹吸换水，4-5天换水1次，换水量每次1/3；投饵。
可选的，还包括运输步骤，所述运输步骤包括：
使用虹吸底器外接软管将幼虫和底泥一起吸出，100目过筛，收集幼螠，将其移入聚乙烯袋中，充氧，扎紧袋口，装入泡沫箱中，装车运输。
本发明的有益效果：
本发明的单环刺螠人工培育苗种的方法的育苗时间不同现有技术，可养殖一周年养成，节约了养殖成本。4-5月春季放苗时，体长已达到4-5cm，外界水温正好适合放养，到秋季可以养成20cm左右成品上市；而普通的春季育苗要到6月中旬以后体长1cm左右才能出池，外界水温已超过25°(河北沿海)，无法增殖放流和池塘养殖，成活率极低、摄食量很少，只能进行室内养殖，条件受限，当年也无法养成商品上市。
秋季育苗时，自然海区水温降低，水质稳定，不易发生病害，充分利用冬季闲置的育苗车间，换水量很少，不用加温，降低了生产成本，苗种经过冬季4-5个月室内越冬生长，4月中旬就能出池，出苗时间比春季育苗早2个月以上，苗种规格达到5cm左右，远远大于春季育出的苗种，成活率提高30％以上，达到了出早苗、出大苗的效果。养殖户再经过5个月的养殖，当年(9月底)就可以陆续收获上市。而春季育苗，6月中旬以后才能出苗，自然海区和室外土池水温很高，无法进行增殖放流和土池放养(成活率极低)，只能在车间内养殖，并且当年长不到上市规格，还要进行越冬，成本大大增加。秋季育苗充分利用了育苗场冬闲车间育出大规格苗种，养殖户也当年收获销售，育苗场和成螠养殖户达到了双赢。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但足本领域技术人员将会理解，下列实施例仅于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
单环刺螠人工培育苗种的方法包括以下步骤：
一单环刺螠亲体暂养
9月中旬-10月中旬进行单环刺螠秋季育苗生产；
本次购买体长≥20cm的单环刺螠亲体56斤；暂养：16-18℃(自然水温)，pH:7.5-8.5，密度100尾/m3；换水1次/日，适量充气；投喂单胞藻或者商品饲料。
用于生产的亲本都是选择性腺成熟的，腹部膨大，颜色浅黄或土黄色。总体上说，基本都能达到性成熟，比例在90％以上，挑选的目的就是剔除病残弱小和明显不合格的。
二人工催产和自然受精
1催产方法采取“变温刺激+性腺诱导”。具体操作过程如下：
(1)变温刺激。将所有单环刺螠亲体转移至亲体产卵池，水温由18度快速降至9度，保持此温度2小时，然后再快速升至18度。本环节的快速降温和升温时间控制在30分钟之内完成。
(2)性腺诱导。将提前备好的性腺发育成熟的亲体的性腺(雌雄随机)悬液，按制备性腺悬液的亲体占要进行性腺诱导的亲体的5％重量比的比例，倒入亲体产卵池中，进行充气，使悬液分布均匀，充分接触亲体，经过变温刺激和性腺诱导的亲体自动排卵排精，进行自然受精。
性腺悬液制备方法和剂量：随机捞取未经变温刺激步骤和性腺诱导步骤的重量 5％的亲体，雌雄不限，亲体解剖摘取性腺，用剪刀在单环刺螠吻处剪开一个纵向小口(0.5-1cm)，待肾管自然流出后，剪取肾管(为防止雌雄配子流出，故带一些体壁)，在盛有过滤海水的容器中洗去肾管表面的杂物，使用干净的手术剪剪开肾管，将雌雄配子制成性腺混合悬液。即配即用，如果解剖时间过长，将容器用冰块降温。
2受精卵检查与洗卵：受精后20-30min镜检受精情况，当受精率≥95％、镜检看到受精卵的受精膜完全举起后，进行洗卵，移出所有亲体，用40-60目筛网捞除水中杂质，用120目筛网换水，弃上层1/2水，再加满水，根据镜检情况，确定洗卵次数(一般3-4次)，直至水中无精子。
单环刺螠经过变温刺激后再通过少量(5％)性腺悬液诱导刺激，增强了亲本的排卵排精能力，从而提高受精率约20％以上。因此性腺诱导很有必要，也简便易行。
本方法优于其它催产受精方法，操作简便，排卵集中，卵质优良，不用大量解剖单环刺螠亲本，受精有效率、孵化率都高于其他方法，催产效果很好。
三孵化与选幼
1静水孵化：孵化期间不充气，期间使用搅耙上下搅动1次/2h，每次至胚胎悬浮即可。孵化速度：17℃时受精卵历时15h开始上浮(原肠胚)24h孵化形成。
2选幼方法：事先刷干净邻近培养池，加水5-10cm，孵化池停气10-20min后，幼虫聚集到水面，虹吸法移池，移池后充气。原池静置后，进行吸底，将未孵化的卵吸出。各池子加水至一定高度(50-60cm)。
四浮游幼虫的日常管理
1幼虫密度：受精卵20-30个/ml，0-48小时；担轮幼虫1-4个/ml,3-20天；体节幼虫1-2个/ml，20-25天；蠕状虫幼虫0.2-0.8个/ml，25-30天；幼螠，30天— 35天，30-40/cm2。
2水温：适宜水温16-23℃。自然水温下(17-20℃)，浮游期幼虫历时约一个月转为底栖生活；底栖阶段(水温22℃以下)历时约一个月达到1-2cm幼螠。
3换水：鉴于幼虫早期体积较小，能透过300目筛绢，容易堵塞，换水较困难，建议选幼时各池水面高度为50-60cm，之后5天，每天加水10cm，以达到换水效果。选幼5天后(即受精6天后)，可用300目筛绢进行换水，一定要进行检查，确保换出的水中没有幼虫才可以使用300目筛绢换水。1-2次/日，1/2-1/3次，早晨换水或者早晚各1次。
4投饵：饵料种类为单胞藻(金藻、小球藻、角毛藻、小硅藻、塔胞藻等)或者微藻+藻粉。本次育苗孵化池温度为17.6℃，45h消化道打通，开始投饵。前期 2-10天，开口饵料以金藻为主，金藻60％+角毛藻20％+小球藻20％，后期11天-35 天，角毛藻50％+塔胞藻50％+螺旋藻粉/酵母1g/m3，各种饵料混喂。换水后进行投饵，投饵量以投饵后1h胃充盈，再投喂时水体中无余饵为宜(用显微镜观察)。一般，浮游幼虫日投饵量2×103-4.6×104cells/幼虫。
5吸底：每2-3d吸底池。方法：停气10-20min，然后用吸污器进行吸底，吸出来的水盛放在大盆里，静置后收集上层浮游的幼虫倒回培养池中。
6倒池：最好每周一次。取决于水体以及池底的水质情况，可10天倒池一次。五幼螠越冬培养
经过1个多月的培育，幼螠转入越冬养殖。
1越冬池铺泥：海泥先在冷库中冷冻两个月以上，然后将冻泥加水化冻，用 60-80目过滤，将泥浆泼洒池中，搅匀，静置使泥自然沉降1天，至底泥厚度2-5cm (根据出苗大小确定泥的厚度)，换水并将水中的悬浮物除去，缓慢加入新水，至池中清澈即可，池中加水10cm左右。
冷冻海泥优点，杀死多数有害细菌和寄生虫，与药物处理(甲醛或高锰酸钾浸泡)相比，不会产生化学药物残留，不会影响幼体生长。
2幼虫移池：将幼螠(差不多受精后培育35d左右)采用虹吸的方法导入越冬泥池中，也可采用80-100目网箱过滤幼虫的方式将幼虫转入越冬池。
3换水：待幼虫全部钻泥以后，则可直接虹吸换水，4-5天换水1次，换水量每次1/3左右，根据水色变化和水质状况可适当延长换水周期到7-10天。
4投饵：前期投喂与浮游期相同，中间日投饵量1.34×106-5.1×107cells/幼虫。后期随着温度的下降，逐渐减少投饵量，并随时检查摄食情况进行调整投饵量。以投饵后1h胃充盈，再投喂时水体中无余饵为宜(用显微镜观察)。
六运输
经过一个冬天的养殖，幼螠体长长到4-5cm，室外水温14℃左右时，就可以进行增殖放流或池塘养殖了。使用虹吸底器外接软管(直径D＝4cm)将幼虫和底泥一起吸出，100目过筛，收集幼螠，将其移入聚乙烯袋中，充氧，扎紧袋口，装入泡沫箱中，装车运输。
尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。