1.一种泥鳅精子的超低温冷冻保存液,包括:
450-500mg NaCl,650-700mgKCl,20-25mg CaCl2,10-15mg MgSO4,200-250mg Tris,400-600mg 甘氨酸,90-92mL ddH2O,4-6mL乙二醇,4-6mLDMSO。
2.根据权利要求1所述冷冻保存液,其特征在于:480mg NaCl,680mgKCl,22mg CaCl2,12mg MgSO4,240mg Tris,500mg甘氨酸,90mL ddH2O,5mL乙二醇,5mLDMSO。
3.利用权利要求1所述的冷冻保存液的超低温冷冻复苏的方法,其步骤包括:
(1)配制冷冻保存液:配置新鲜的超低温冷冻保存液,4℃冰箱中预冷;
(2)稀释精液:将新鲜泥鳅精液与冷冻保存液按照1:5-1:8的体积比混匀;
(3)分装:将稀释后的精液分装至冻存管;
(4)程序降温:将冻存管置于程序降温盒中,再一起移入-80℃冰箱中,停留4-6h;
(5)超低温保存:将冻存管放入液氮中长期保存;
(6)复苏:将冻存管置于25-32℃水浴中,轻轻摇动使温度均匀,待只剩少量固体时立即取出,在空气中继续摇动使其完全融化。
4.权利要求1所述的冷冻保存液在制备泥鳅精子超低温冷冻保存液制剂中的应用。