一种泥鳅精子的超低温冷冻保存液及其冷冻复苏方法和应用与流程

文档序号:15485657发布日期:2018-09-21 19:47阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种泥鳅精子的超低温冷冻保存液,包括:

450-500mg NaCl,650-700mgKCl,20-25mg CaCl2,10-15mg MgSO4,200-250mg Tris,400-600mg 甘氨酸,90-92mL ddH2O,4-6mL乙二醇,4-6mLDMSO。

2.根据权利要求1所述冷冻保存液,其特征在于:480mg NaCl,680mgKCl,22mg CaCl2,12mg MgSO4,240mg Tris,500mg甘氨酸,90mL ddH2O,5mL乙二醇,5mLDMSO。

3.利用权利要求1所述的冷冻保存液的超低温冷冻复苏的方法,其步骤包括:

(1)配制冷冻保存液:配置新鲜的超低温冷冻保存液,4℃冰箱中预冷;

(2)稀释精液:将新鲜泥鳅精液与冷冻保存液按照1:5-1:8的体积比混匀;

(3)分装:将稀释后的精液分装至冻存管;

(4)程序降温:将冻存管置于程序降温盒中,再一起移入-80℃冰箱中,停留4-6h;

(5)超低温保存:将冻存管放入液氮中长期保存;

(6)复苏:将冻存管置于25-32℃水浴中,轻轻摇动使温度均匀,待只剩少量固体时立即取出,在空气中继续摇动使其完全融化。

4.权利要求1所述的冷冻保存液在制备泥鳅精子超低温冷冻保存液制剂中的应用。

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