一种快速收集桃蛀螟卵的简易方法与流程

本发明涉及生物技术领域，特别是指一种快速收集桃蛀螟卵的简易方法。

背景技术：

桃蛀螟除能为害桃、苹果、梨、板栗等果树，也能为害玉米、大豆、棉花等农作物，对桃、板栗等果树果实的为害严重程度有“十果九蛀”之称，但对农作物的为害一般很轻。随着作物种植结构改革和果树果实套袋技术的推广，桃蛀螟的为害逐渐从果树蔓延至农田作物，尤其对玉米的为害日趋严重，已成为黄淮海地区夏玉米田的重要害虫。近年来桃蛀螟对夏玉米穗的为害严重程度甚至超过亚洲玉米螟，成为玉米穗部害虫的优势种。因此，加强对桃蛀螟害虫的生物学、生态学、发生迁移机制等研究对于更好的制定针对桃蛀螟的防治策略具有重要意义。

以前主要利用棉纱布或新鲜玉米棒收集桃蛀螟卵。前者将棉纱布（40×30cm）封在养虫笼口，收集到卵后，将带有卵的棉纱布连同新鲜玉米一同放入养虫盒中等待幼虫孵化，由于收集卵时，缺少寄主植物气味吸引，因此收集到的卵量较少，收集效率低；后者虽然利用桃蛀螟喜欢的寄主植物来收集卵，但由于玉米粒表面比较光滑，不利于桃蛀螟产卵（桃蛀螟喜欢在稍微粗糙的物质表面产卵，如棉纱布），因此收集效率也较低，且玉米颜色与桃蛀螟卵颜色相近，后续统计卵量耗时耗力。杜艳丽等在2012年的一篇研究论文中描述了一种利用包裹有一层棉纱布的新鲜苹果来收集桃蛀螟卵的方法（昆虫学报，55(5):561-569），但这种方法存在：苹果容易发霉腐烂、需要1-2天更换1次产卵介质、收集卵后还需要把卵从产卵介质上再转移到幼虫饲养植物（玉米）上等问题，操作起来费时、费力，也不经济；耿亚丽等在2018年申请公布了一种利用脱脂棉收集桃蛀螟卵的方法，但这种方法存在问题较多：（1）脱脂棉需要固定在成虫饲养笼4个侧面内侧，且大小与饲养笼侧面大小相当，一来脱脂棉用量太大，虽说可以重复利用，但后续清洗附有桃蛀螟卵的脱脂棉相当麻烦，还要保证清洗的过程中不伤害桃蛀螟卵，以免影响后代幼虫孵化，二则固定在饲养笼侧面的脱脂棉每2天需要取下来，换上新的脱脂棉，操作起来费时费力；（2）除了饲养笼内放置在培养皿中的海绵或脱脂棉需要蘸有5-15%的蜂蜜水，固定在饲养笼4个侧面的脱脂棉也都需要整体蘸上5-15%的蜂蜜水，大大增加了蜂蜜水的用量，不经济；而且饲养笼侧面4周因为不断接触蘸有5-15%蜂蜜水的脱脂棉，后续如果不清洗很容易滋生细菌、病毒，招引果蝇等昆虫，而清洁的话一般的清洁手法很难将蜂蜜水清洗下来，还需要借助洗涤剂，大大增加了桃蛀螟收集卵及饲养的成本；（3）饲养笼侧面4周固定的蘸有5-15%蜂蜜水的脱脂棉收集桃蛀螟卵后，需要先用纱布包裹住，然后用自来水轻轻清洗掉脱脂棉上多余的蜂蜜水，再用0.5-1.5%的次氯酸钠溶液浸泡，最后再用纯净水清洗、晾干后去掉纱布，等待脱脂棉中的桃蛀螟卵孵化，这些步骤使收集桃蛀螟卵的人力、财力大大增加，清洗处理过程中也浪费了蜂蜜水、次氯酸钠以及纯净水等资源；（4）清洗后附在脱脂棉上的桃蛀螟卵，幼虫孵化后，由于脱脂棉纤维将幼虫附足牢牢束缚住，靠初孵幼虫自身的力量，很难从脱脂棉纤维中挣脱爬到饲养食物上，因此需要借助人力把初孵幼虫从脱脂棉中挑出，转移到幼虫饲养食物上，但人工挑取脱脂棉中初孵幼虫，很容易伤害初孵幼虫柔软的体壁组织，使幼虫死亡率大大增加，也费时费力（申请公布号：cn108450417）。

上述收集桃蛀螟卵的方法均存在收集效率低、成本高、操作不简便等问题，为了更好地研究桃蛀螟害虫的生物学及发生迁移机制等以便更好的制定针对桃蛀螟的防治策略，急需一种能够简单、高效地收集桃蛀螟卵的经济方法。本发明利用桃蛀螟偏爱的寄主植物气味，可以快速、简单的大量收集桃蛀螟卵，整个成虫期只需要更换3-4次产卵介质，更换下的产卵介质无需进行任何处理，直接放在养虫盒中，幼虫孵化后直接钻入玉米中取食，增加了幼虫存活率、节约成本、简化了桃蛀螟卵的收集步骤。此外，桃蛀螟将卵产在玉米棒外的纱布上，也方便统计卵量，还可以用收集的卵继续其他试验。

技术实现要素：

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种快速收集桃蛀螟卵简易方法。通过本发明不仅可以快速、简单、大量地收集桃蛀螟卵，节约成本，而且产卵介质纱布上的卵孵化后，幼虫直接钻入纱布裹着的玉米棒内取食，也方便后续桃蛀螟饲养及试验。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种快速收集桃蛀螟卵的简易方法，包括如下步骤：

（1）在塑料产卵笼（直径25-32cm，高23-30cm）中放入适量桃蛀螟成虫（50-150头），雌雄比例1:1-1.5，产卵笼底部放一塑料培养皿（直径6-9cm），皿中放入蘸有蔗糖水（质量浓度为8%-10%）的脱脂棉，每天添加蔗糖水以供成虫补充营养，产卵笼口用脱脂棉纱布罩住，（使用固定圈）封紧产卵笼口；

（2）待桃蛀螟成虫补充营养1-3天且交配后，向产卵笼内放入用湿润脱脂棉纱布包裹的玉米棒，作为桃蛀螟产卵介质；

所述产卵介质是将新鲜玉米雌穗剥离外面苞叶，只保留里边玉米棒，之后将玉米棒沿中轴切开为均匀两块，每块分别用脱脂棉纱布包裹好，用白棉线将包裹好的玉米两端绑起来（图（1），用透明胶带固定在产卵笼对称的两边（见图2），之后用蒸馏水将玉米棒表面的纱布喷湿，湿度以不往下滴水为宜；

（3）待桃蛀螟在产卵介质上产满卵后，从产卵笼内取出产卵介质，即可收集桃蛀螟卵。

一般地，每2-4天取出带卵的产卵介质，并放入新的产卵介质，根据试验需要停止或直至成虫不再产卵为止。

将带卵的产卵介质放置在养虫盒（长25-35cm，宽15-20cm，高15-17cm）中，每盒2个，每天喷少量蒸馏水保湿，直至幼虫孵化。

产卵笼（内有桃蛀螟成虫）和养虫盒（内有桃蛀螟卵或幼虫）均放置在温度为25-28℃、相对湿度70-80%、光周期14:10(l:d)-16:8(l:d)的养虫室中。

塑料产卵笼为圆筒型，直径为25-32cm，高23-30cm，每个产卵笼放入桃蛀螟成虫50-150头，产卵介质2-4个。

本发明的有益效果在于：本发明方法所述产卵介质能够快速、简单、高效的大量收集桃蛀螟卵，改善了之前桃蛀螟卵收集效率低的问题，而且所述产卵介质收集桃蛀螟卵后，可直接用于幼虫饲养，将成虫产卵和幼虫饲养有效地结合起来，解决了之前幼虫从卵中孵化中，还需要人工费时费力地转移到寄主植物上的问题。通过本发明可以快速、简单、高效的收集桃蛀螟卵，省时省力，而且落在玉米棒外层纱布上的卵也方便计数，也方便用收集的卵继续其他试验。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为包裹好的桃蛀螟产卵介质。

图2为桃蛀螟产卵介质在养虫笼中的悬挂方式。

图3为不同方式每日收集桃蛀螟卵的效果比较图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

在塑料产卵笼（直径25cm，高25cm）中放入60头桃蛀螟成虫，雌雄比例1:1，产卵笼底部放一塑料培养皿（直径6cm），皿中放入蘸有蔗糖水（质量浓度为8%）的脱脂棉，每天添加蔗糖水以供成虫补充营养，产卵笼口用脱脂棉纱布罩住，（使用固定圈）封紧产卵笼口；

待桃蛀螟成虫补充营养2天且交配后，向产卵笼内放入不同的产卵介质，进行桃蛀螟卵的收集试验。

试验组：将新鲜玉米雌穗剥离外面苞叶，只保留里边玉米棒，之后将玉米棒沿中轴切开为均匀两块，每块分别用脱脂棉纱布包裹好，用白棉线将包裹好的玉米两端绑起来（图1），用透明胶带固定在产卵笼对称的两边（图2）；之后用蒸馏水将玉米棒表面的纱布喷湿，湿度以不往下滴水为宜，作为桃蛀螟产卵介质；每个产卵笼中放入2个产卵介质，每3天更换一次，直至桃蛀螟雌虫全部死亡；将带卵的产卵介质放置在养虫盒中，每天喷少量蒸馏水保湿，直至幼虫孵化。

对照组1：以从中间剖开的新鲜玉米棒作为桃蛀螟产卵介质，成虫补充营养1天且交配后，将剖开后的玉米棒放入产卵笼中，每3天更换新的玉米棒收集桃蛀螟卵。

对照组2：以湿润的脱脂棉纱布悬挂在产卵笼对称两侧作为桃蛀螟产卵介质，成虫补充营养1天且交配后，将纱布放入产卵笼中，每3天更换新的纱布收集桃蛀螟卵。

记录试验组和对照组产卵介质收集的桃蛀螟卵量，从而评价不同产卵介质收集桃蛀螟卵的效果。

所述产卵笼（内有桃蛀螟成虫）或带卵的产卵介质均放置在温度为27±1℃、相对湿度75±5%、光周期14:10(l:d)的养虫室中。

试验结果见图3（注：所有数据在spss软件中进行单因素方差分析后，再利用lsd’stest进行不同处理间的差异性比较）。

图3结果显示：在整个试验过程中，以玉米+棉纱布作为产卵介质收集到的桃蛀螟卵量显著高于单独棉纱布或单独玉米棒上的落卵量（图3a）；玉米+棉纱布组的单雌累积产卵量为343.85粒，显著高于玉米组62.28粒和棉纱布组64.37粒，单独棉纱布和单独玉米棒组收集的卵量差异不显著（图3b）。

因此，包裹棉纱布的玉米棒显示了很好的收集桃蛀螟卵的效果，而且产在玉米棒外棉纱布上的卵，除方便统计计数外，也可用于进一步试验。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。