一种调控蜜蜂采集梨花的方法与流程

本发明一种调控蜜蜂采集梨花的方法，属于果树栽培技术领域。

背景技术：

梨树是我国第三大栽培果树，种植面积和产量均居世界首位，在水果生产中占有重要地位。梨树自交不亲和，生产中需要昆虫等媒介为其传粉。随着现代农业的发展，单一梨树连片大面积种植，农药大量使用等原因致使我国近三分之一的梨主产区传粉昆虫大量死亡，几乎灭绝，需要昆虫传粉的梨树只能选择人工授粉的办法保证梨树的正常生产。但人工授粉成本高、劳动强度大、时间紧，已成为梨农的沉重负担。蜜蜂是自然界最主要的传粉昆虫，蜜蜂授粉成本低、无污染、操作简单，是梨树授粉首选昆虫。但因梨花泌蜜量少，加之有特殊的气味，包括蜜蜂在内的大多数传粉昆虫都不喜欢采集，因此如何提高蜜蜂采集梨花的效率成为梨树应用蜜蜂授粉技术需要解决的关键问题。

技术实现要素：

为解决现有技术存在的不足，本发明公开了一种调控蜜蜂采集梨花的方法，该方法能提高蜜蜂采集梨花粉积极性，进而增强梨树授粉效果，成本低、见效快、易于操作，在梨树蜜蜂授粉生产中具有重要的应用价值。

本发明通过以下技术方案实现：

一种调控蜜蜂采集梨花的方法，包括以下步骤：

1）基础蜂群配置：在梨花开放前40-45天着手进行基础蜂群培养，选择本地饲养的意大利蜜蜂用作基础蜂群，蜂量根据试验梨园面积选择，每亩梨园配备三到五个蜂群，所述蜂群中放入1张蜜脾用作饲料储备，再加入1张空脾；

2）蜂群组建：

营造优良王台，在处女王出房前两天的晚上，从基础蜂群中选择无病害的健康工作蜂加入空蜂箱中，每箱加两脾4000-5000只蜂；第二天早上，选择健康的王台安在巢脾上；

连续两天检查处女王出房情况；处女王出房后观察蜂群对处女王的接纳情况，遇到处女王没有正常出房或蜂群不接受的情况，及时介绍同一批次出房的备用处女王；

在处女王被正常接受的情况下，10天之内观察处女王交配情况，遇有处女王不能正常交配的时候，介绍同一批次已交配的备用处女王；

在处女王出房后，从基础蜂群中选择6张出房子，放入恒温恒湿箱中孵育，在8-10天后从基础蜂群中选择第二批6张出房子，放入恒温恒湿箱中孵育，16-18天后从基础蜂群中选择第三批6张出房子，放入恒温恒湿箱中孵育；

将三批孵育好的幼蜂分多次投入蜂群中，每群每次投入100-150只幼蜂，最终形成的蜂群中，每群蜂由1-2日龄、8-10日龄、16-18日龄蜂各300-400只及成年采集蜂4000-5000只组成；

3）蜂群入场：

在蜂群组建完成后，梨树开花10-20%时，将蜂箱放入试验梨园备用，并分散摆放到梨园内各处，以10-20群为一组，分组摆放，组间距150-200m，授粉期间不再挪动蜂群；

4）幼虫信息素诱导授粉：

在蜂群组建完成后，将蜂群稳定一天，从第二天开始，每天早上6时，将蜂群中放入涂有幼虫信息素溶液的载玻片，在放入的载玻片上的信息素挥发1-1.5小时之后，打开蜂箱进出口，蜂箱进出口朝向待采集的梨树或梨园方向，让蜂群开始采集过程；直到末花期，搬离蜂群。

所述试验梨园及周围要求非梨花的花朵数量低于梨花总量的1%。

所述蜜脾选择繁殖2-4代蜂的浅黄色巢脾，脾面平整、无雄蜂房。

所述梨树开花初期为试验梨园的梨树开花10-20%时。

一种调控蜜蜂采集梨花用的幼虫信息素，每一个单位所述幼虫信息素包括以下重量份的组分：亚油酸乙酯0.005-0.015份，亚麻酸乙酯0.10-0.18份，乙油酸乙酯0.03-0.1份，棕榈酸乙酯0.01-0.06份，硬脂酸乙酯0.03-0.1份，亚油酸甲酯0.01-0.05份，亚麻酸甲酯0.15-0.25份，油酸甲酯0.2-0.3份，甲基棕榈酸酯0.01-0.06份，硬脂酸甲酯0.1-0.2份。

优选地，每一个单位所述幼虫信息素包括以下重量份的组分：亚油酸乙酯0.008-0.012份，亚麻酸乙酯0.12-0.15份，乙油酸乙酯0.05-0.09份，棕榈酸乙酯0.02-0.04份，硬脂酸乙酯0.05-0.08份，亚油酸甲酯0.02-0.03份，亚麻酸甲酯0.19-0.22份，油酸甲酯0.23-0.27份，甲基棕榈酸酯0.02-0.04份，硬脂酸甲酯0.15-0.18份。

优选地，每一个单位所述幼虫信息素包括以下重量份的组分：亚油酸乙酯0.01份，亚麻酸乙酯0.13份，乙油酸乙酯0.08份，棕榈酸乙酯0.03份，硬脂酸乙酯0.07份，亚油酸甲酯0.02份，亚麻酸甲酯0.21份，油酸甲酯0.25份，甲基棕榈酸酯0.03份，硬脂酸甲酯0.17份。

所述幼虫信息素的调控蜜蜂采集梨花的方法，包括以下步骤：

称取所述幼虫信息素1-2个单位，溶于1-2重量份乙腈中，加入适量异丙醇，混合均匀，得到幼虫信息素溶液，使得每毫升所述幼虫信息素溶液含400-800个单位幼虫信息素；

将信息素溶液均匀涂抹于载玻片正反两面上，每块载玻片涂抹1毫升信息素溶液，将涂有信息素的载玻片顺巢脾方向悬挂于或固定于蜂箱中两个巢脾之间，每箱悬挂1块涂有信息素的载玻片。

本发明与现有技术相比具有以下有益效果：

本发明使用蜜蜂为梨树授粉，能够提高坐果率、增加产量并且能够改善果实的品质。本发明为梨树授粉的蜂群组建时，由于采用幼蜂信息素诱导授粉蜂群，可以提供工蜂采集花粉的积极性，增加单只蜜蜂采集花粉的重量，对工蜂咽下腺的发育具有促进作用，能有效刺激工蜂提前采集，并且能提高采粉蜂占总采集蜂的比例，为授粉业提供稳定的授粉蜂群，大大降低了授粉成本。

信息素中的成分稳定、对蜜蜂安全无毒；本发明方法简单，无需单独操作，效果持久，成本低、投入少，因所需物质含量微小，只需很少量就能解决问题，避免人工授粉的大量投入。

梨树花期很短，为了最大程度的利用花期，必须使用强壮蜂群进行采集授粉。本发明蜂群组建过程中，选择浅黄色巢脾，一方面巢脾的巢房房眼大，培育出来的工蜂体大而健壮，另一方面可以有效减少巢虫的危害，保证蜂群保持旺盛强壮的状态。

附图说明

图1为采粉蜂占总采集蜂的比例情况图；

图2为诱导效果试验例中不同处理的蛋白激酶a的活性比较图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例，凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。

1.一种调控蜜蜂采集梨花的方法，包括以下步骤：

1）基础蜂群配置：在梨花开放前40-45天着手进行基础蜂群培养，选择本地饲养的意大利蜜蜂用作基础蜂群，蜂量根据试验梨园面积选择，每亩梨园配备三到五个蜂群，所述蜂群中放入1张蜜脾用作饲料储备，所述蜜脾选择繁殖2-4代蜂的浅黄色巢脾，脾面平整、无雄蜂房；再加入1张空脾；

梨树花期很短，为了最大程度的利用花期，必须使用强壮蜂群进行采集授粉。本发明蜂群组建过程中，选择浅黄色巢脾，一方面巢脾的巢房房眼大，培育出来的工蜂体大而健壮，另一方面可以有效减少巢虫的危害，保证蜂群保持旺盛强壮的状态。

2）蜂群组建：

营造优良王台，在处女王出房前两天的晚上，从基础蜂群中选择无病害的健康工作蜂加入空蜂箱中，每箱加两脾4000-5000只蜂；第二天早上，选择健康的王台安在巢脾上；

连续两天检查处女王出房情况；处女王出房后观察蜂群对处女王的接纳情况，遇到处女王没有正常出房或蜂群不接受的情况，及时介绍同一批次出房的备用处女王；

在处女王被正常接受的情况下，10天之内观察处女王交配情况，遇有处女王不能正常交配的时候，介绍同一批次已交配的备用处女王；

在处女王出房后，从基础蜂群中选择6张出房子，放入恒温恒湿箱中孵育，在8-10天后从基础蜂群中选择第二批6张出房子，放入恒温恒湿箱中孵育，16-18天后从基础蜂群中选择第三批6张出房子，放入恒温恒湿箱中孵育；

将三批孵育好的幼蜂分多次投入蜂群中，每群每次投入100-150只幼蜂，最终形成的蜂群中，每群蜂由1-2日龄、8-10日龄、16-18日龄蜂各300-400只及成年采集蜂4000-5000只组成；

3）蜂群入场：

梨园配置主栽品种和授粉品种，授粉品种与主栽品种比例为1：5；授粉前及授粉期控制试验梨园及周围要求非梨花的花朵数量低于梨花总量的1%，控制梨园及梨园周围作物授粉前后一周及授粉期不使用农药；

梨树开花初期，试验梨园的梨树开花10-20%时，将蜂箱放入试验梨园备用，并分散摆放到梨园内各处，以10-20群为一组，分组摆放，组间距150-200m，授粉期间不再挪动蜂群；

4）幼虫信息素诱导授粉：

在蜂群组建完成后，将蜂群稳定一天，从第二天开始，每天早上6时，将蜂群中放入涂有幼虫信息素溶液的载玻片，在放入的载玻片上的信息素挥发1-1.5小时之后，打开蜂箱进出口，蜂箱进出口朝向待采集的梨树或梨园方向，让蜂群开始采集过程；直到末花期，搬离蜂群。

使用所述信息素进行调控时，还可以同时使用诱导剂进行蜂群饲喂诱导：

蜂群组建完成后的第一天晚上开始，每群蜂每天晚上饲喂50-100g诱导剂，所述诱导剂包括梨花蜜10-30份，梨花精油1-5份，蔗糖10-20份，水10-30份。

优选地，所述诱导剂包括梨花蜜15-25份，梨花精油2-4份，蔗糖13-18份，水15-25份。

优选地，所述诱导剂包括梨花蜜20份，梨花精油3份，蔗糖15份，水20份。

使用所述信息素和诱导剂进行调控时，还可以同时在梨花上喷施梨花诱导水，梨树开花前使用喷雾器喷施一次，所述梨花诱导水包括日落黄食用色素0.01-0.02份，蜂蜜2-4份，水100-200份。

一种调控蜜蜂采集梨花用的幼虫信息素，每一个单位所述幼虫信息素包括以下重量份的组分：亚油酸乙酯0.005-0.015份，亚麻酸乙酯0.10-0.18份，乙油酸乙酯0.03-0.1份，棕榈酸乙酯0.01-0.06份，硬脂酸乙酯0.03-0.1份，亚油酸甲酯0.01-0.05份，亚麻酸甲酯0.15-0.25份，油酸甲酯0.2-0.3份，甲基棕榈酸酯0.01-0.06份，硬脂酸甲酯0.1-0.2份。

优选地，每一个单位所述幼虫信息素包括以下重量份的组分：亚油酸乙酯0.008-0.012份，亚麻酸乙酯0.12-0.15份，乙油酸乙酯0.05-0.09份，棕榈酸乙酯0.02-0.04份，硬脂酸乙酯0.05-0.08份，亚油酸甲酯0.02-0.03份，亚麻酸甲酯0.19-0.22份，油酸甲酯0.23-0.27份，甲基棕榈酸酯0.02-0.04份，硬脂酸甲酯0.15-0.18份。

优选地，每一个单位所述幼虫信息素包括以下重量份的组分：亚油酸乙酯0.01份，亚麻酸乙酯0.13份，乙油酸乙酯0.08份，棕榈酸乙酯0.03份，硬脂酸乙酯0.07份，亚油酸甲酯0.02份，亚麻酸甲酯0.21份，油酸甲酯0.25份，甲基棕榈酸酯0.03份，硬脂酸甲酯0.17份。

所述幼虫信息素的调控蜜蜂采集梨花的方法，包括以下步骤：

称取所述幼虫信息素1-2个单位，溶于1-2重量份乙腈中，加入异丙醇，混合均匀，得到幼虫信息素溶液，每毫升所述幼虫信息素溶液含400-800个单位幼虫信息素；

将信息素溶液均匀涂抹于载玻片正反两面上，所述载玻片面积为5cm×10cm，厚度为2mm，每块载玻片涂抹1毫升信息素溶液，将涂有信息素的载玻片顺巢脾方向悬挂于或固定于蜂箱中两个巢脾之间，每箱悬挂1块涂有信息素的载玻片。

2.诱导效果试验例：

2.1基础蜂群及蜂箱准备

购买15群本地饲养的意大利蜜蜂用作基础蜂群，提供试验所需蜂量。在试验之初选择15个规格相同的蜂箱，每箱中放入1张蜜脾用作饲料储备，再加入1张空脾，将蜂箱分为3组，每组5箱并编号，分别编为a1-a5、b1-b5、c1-c5。在蜂箱前部贴不同颜色及形状的卡纸，以便处女王出入时辨别。将蜂箱放入试验场地备用。

2.2蜂王准备

营造30个相同日龄的王台，在处女王出房前两天的晚上，从基础蜂群中选择无病害的健康工作蜂加入空蜂箱中，每箱加两脾约4000只蜂。在第二天早上选择健康的王台安在巢脾上，连续两天检查处女王出房情况。处女王出房后观察蜂群对处女王的接纳情况，遇到处女王没有正常出房或蜂群不接受的情况，及时介绍同一批次出房的备用处女王。

在处女王被正常接受的情况下，10天之内观察处女王交配情况，遇有处女王不能正常交配的时候，介绍同一批次已交配的备用处女王。

观察所有蜂群中处女王产卵情况，确保每群蜂中处女王日龄相同，且都正常产卵，保证各蜂群的基础条件完全一致、生活秩序正常。

2.3蜂群组建

在处女王出房后，从基础蜂群中选择6张出房子，放入恒温恒湿箱中孵育，第二天对新出房的进行标记。按照以上方法，在8天后进行第二批标记，16天后标记第三批。

2.4新蜂标记方法

准备相同大小的塑料盆，在盆的内壁喷洒一次食用油，使油均匀分布，不会流入盆底，保证蜜蜂进入盆内不会沿盆壁爬出。将新出房的幼蜂放入盆内，用毛笔蘸取无毒颜料点在蜂背板上，点时注意颜料不能粘在蜂身体及翅膀上。根据日龄不同共标记三次，使用不同颜色的颜料加以区分，每次标记4500只，分别放入15群中，每群每次投放300只。

同时选择不同颜色的数字标签标记幼蜂，根据日龄标记3次，标记时间同上，完成后投放到蜂群中，每群每次投入10只。

最终组建及标记完成后，每群蜂由1-2日龄、8-10日龄、16-18日龄蜂各300只及成年采集蜂4000只左右组成，每处理3群，共计15群。

在蜂群组建完成后，将蜂群稳定1天，第二天开始，每天早上6时将蜂群中加入涂有幼虫信息素的载玻片，分为三个处理，处理1加入涂有800单位幼虫信息素的载玻片，处理2加入涂有400单位诱导剂的载玻片，对照组蜂群中加入均匀涂抹溶剂异丙醇的载玻片。每蜂群放入1个载玻片。在放入的信息素挥发1小时之后，即每天早上7时开始试验，12时结束，共进行6天。

信息素配方及浓度

取10种天然幼虫信息素中存在的物质，根据含量及浓度配置，其中低浓度为400个单位幼虫信息素，高浓度为800个单位幼虫信息素，如表1所示：

表1

2.5单只蜜蜂采集花粉重量

每天早上9时，在每个蜂箱的巢门口前随机抓取5只带花粉团的归巢蜂，轻轻将花粉卸下放入ep管中，称量花粉团的重量，每处理每天抓取25只，共测量6天。

表2蜜蜂采集花粉团重量

同列中标有不同小写字母表示差异显著（p<0.05）

随着浓度增加，采集花粉团增大。空白对照与低浓度诱导剂处理组蜜蜂采集花粉团的重量无显著差异，而高浓度处理蜜蜂采集花粉团重量显著高于空白对照组。

2.6咽下腺宽度

咽下腺是工蜂分泌王浆的部位，一般6-12日龄工蜂分泌王浆饲喂小幼虫。现分别测量4日龄和11日龄工蜂咽下腺直径，考察不同诱导剂浓度对咽下腺发育的影响。

具体方法为每天9:30从各处理中抓取4日龄及11日龄工蜂，放入固定液中固定后解剖蜜蜂头部，取出完整咽下腺，测量腺体最宽处的直径，每天每处理测10只，测量3d。结果表明：4日龄工蜂，800个单位诱导剂处理组咽下腺宽度极显著高于低浓度处理和空白对照组，而400个单位处理组与空白对照组无显著差异；11日龄工蜂，800个单位、400个单位处理与空白对照组之间王均有极显著差异，并且差异趋势为：高浓度>低浓度>空白对照。

表3蜜蜂咽下腺宽度

同列中标有不同大写字母表示差异极显著（p<0.01）

2.7工蜂首次出巢采粉的日龄

正常蜂群18日龄以上出巢采集，在采集蜂不足或巢内幼虫增加时，可以提前出巢采集。通过观察采集录像发现，高浓度诱导剂处理组采集蜂采粉日龄可以提前到11-12日龄，早于对照组的15-16日龄，说明诱导剂处理可以有效刺激工蜂提前采集。

2.8采集蜂比例

在巢门口安装摄像头，摄录工蜂出入巢情况，根据录像每小时统计5min采粉蜂占总采集蜂的比例，如附图1所示，结果发现不同浓度幼虫信息素均可显著提高采粉蜂的比例，高浓度提高比例在10.5-17.5%之间，低浓度提高比例在6.6-16.6%之间。

2.9不同处理中蛋白激酶a（pka）的活性比较

采用酶标仪在450nm波长下，分别测定a、b、c三种处理的采集蜂在出巢和携粉归巢两种行为状态下的蛋白激酶a的吸光度(od值)，通过标准曲线计算样品中蛋白激酶a的酶活，见附图2。

由图2可知，三种处理中采集蜂携粉归巢时的pka酶活均显著高于蜜蜂出巢时的pka酶活。出巢阶段的pka活性随浓度增高而降低，但携粉回巢阶段pka活性随浓度增高而增强，即随浓度增高，携粉和出巢时pka的活性差距加大。蛋白激酶a在糖代谢过程中起重要作用，也就是参与了蜜蜂采集过程中能量的代谢，幼虫信息素浓度越高，参与能量代谢的pka活性越高，这也进一步验证了幼虫信息素可以提高蜜蜂采集积极性。

本发明组建授粉蜂群时，由于采用幼蜂信息素诱导授粉蜂群，可以提供工蜂采集花粉的积极性，增加单只蜜蜂采集花粉的重量，对工蜂咽下腺的发育具有促进作用，能有效刺激工蜂提前采集，并且能提高采粉蜂占总采集蜂的比例，为授粉业提供稳定的授粉蜂群，大大降低了授粉成本。

信息素中的成分稳定、对蜜蜂安全无毒；本发明方法简单，无需单独操作，效果持久，成本低、投入少，因所需物质含量微小，只需很少量就能解决问题，避免人工授粉的大量投入。

本发明不会限制于本文所示的实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖性特点相一致的最宽范围。