专利名称:鸡精液稀释液的制作方法
本发明属家禽精液稀释液，特别是属于鸡精液稀释液。
随着养鸡规模的扩大和笼养管理工艺的运用，鸡的人工授精技术已在养鸡业中广泛实行。为提高种公鸡的利用率和人工授精的工作效率，许多国家在采用经稀释液稀释的鸡精液输精。理想的稀释液是不使鸡精子丧失授精能力，取材容易，配制简单，成本低，便于推广。配制成这样的稀释液，几十年来一直是家禽育种家的追求目标。在这方面有苏联专利SU638334稀释液〔1〕(以下简称638334液)。该液由无水医用葡萄糖、醋酸钠、碳酸氢钠、10%醋酸和蒸馏水配制而成。但用该液稀释的鸡精子，在2℃～4℃下保存7小时后输精，蛋受精率才达到91.8%，且溶液的酸碱度不稳定。据CA(ChemicalAbstracts)化学文摘报道，美国的BPSE稀释液〔2〕可使鸡精子在体外5℃～15℃下存活18小时，而不丧失受精能力。这一稀释液的成分为果糖、氯化镁、醋酸钠、柠檬酸钠、谷氨酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、TES(N-tris〔Hydroxymethyl〕methyl-2-aminoethanesulfonicacid)和蒸馏水。一般认为，BPSE液是稀释鸡精液的一种较好的稀释液。但由于其中所用的谷氨酸钠和TES不但价格高昂，也难于购买，使其广泛的应用受到了限制。对这种稀释液，除文摘外，未见到其他有关的文献，因而，难于作进一步的描述。为对此液作进一步的剖析，针对本发明进行了对比试验。发现用该液稀释的鸡精液，其鸡精子的生存指数不够高。
为克服上述缺点，进行了本发明。本发明的目的是提高鸡精子在稀释液中的生存指数和保持其正常的受精能力，并使稀释液取材容易，价钱便宜，有利于推广和应用。为此，在含有磷酸二氢钾和蒸馏水和禽精液稀释液中补充加入葡萄糖、柠檬酸钠和磷酸氢二钠。其中的葡萄糖成分为精子在体外代谢的能量来源，磷酸盐为缓冲系统，使稀释精液保持一定的酸碱度和缓冲能力，柠檬酸钠维持稀释液环境与精子内环境的渗透平衡。稀释液中各项成分的含量为葡萄糖 1.20-1.40克柠檬酸钠 1.20-1.40克磷酸二氢钾 0.15-0.40克磷酸氢二钠 2.00-2.40克蒸馏水加至100毫升pH 7.10-7.50渗透压 300-370mos/kg较适宜的稀释液取名为BJJX液，其成分含量为葡萄糖 1.40克柠檬酸钠 1.40克磷酸二氢钾 0.36克磷酸氢二钠 2.40克蒸馏水加至100毫升上述pH7.5渗透压365mos/kg稀释液的含量还可以降低，定名为BJJX-Ⅱ液，各项成分含量如下葡萄糖 1.20克柠檬酸钠 1.20克磷酸二氢钾 0.16克磷酸氢二钠 2.08克蒸馏水加至100毫升pH 7.45渗透压 310mos/kg本发明配制简单，按规定含量加入上述成分，再加蒸馏水，配成100毫升溶液即成。
据鸡精液保存试验(如表1所示)，用BJJX液稀释的鸡精液在33℃恒温水浴中，其鸡精子的生存指数平均为4.71，居试验各组之首，比未经稀释的原精的生存指数高1.87，原精的生存指数为2.84。说明BJJX液适于鸡精子的生存，可以用来保存鸡精液。生存指数的计算方法
是将稀释鸡精液置于上述水浴后，每隔一小时观察活力一次，至全部精子死亡或能看出组间差别为止。统计时，将上次活力与本次活力相加之和SCK二除，再乘以两次时间间隔之总和，即得生存指数。
根据蛋受精率对比试验(如表2)，用BJJX液按1∶2稀释鸡精液，在5℃下保存7小时给母鸡输精，蛋受精率为94.7%;按1∶1稀释在5℃下保存24小时，蛋受精率为92.2%，按1∶2稀释，蛋受精率为90.6%;而用原精立即输精，蛋受精率为95.5%。说明用BJJX液稀释在低温下保存7小时，蛋受精可达鲜精的受精能力，保存24小时，蛋受精率仍在90%以上。如果将BJJX液的各种成分用量降低，调节pH值和渗透压，配制成BJJX-Ⅱ液，并按1∶2稀释鸡精液，立即输精，蛋受精率为95.9%，达到了原精输精的蛋受精率。因此，BJJX液既适于稀释后立即输精，也适于作短期保存后输精，是一种适合于鸡精液保存的稀释保存液。BJJX-Ⅱ液更适于稀释后立即输精。这两种稀释液均可用于大规模养鸡中的人工授精。
经在北京市大兴县畜牧场进行的生产性试验，用BJJX液作1∶2稀释本所(中国农业科学院畜牧研究所)的B-6(1)系公鸡精液，置于2℃-5℃冰瓶中，用汽车由本所运至该场。历经6-8小时，运输40公里后作常规输精，蛋受精率为72-83%，平均为79.9%(据产蛋记录，试验母鸡的产蛋率为50%)。原精人工受精的蛋受精率为82.9%。由此可以看出，用BJJX液稀释的鸡精液，不但可以在低温下作短期保存，也适于短途运输，为育种场交换鸡精液，提高人工授精效率和降低养鸡成本提供了方便。
又据北京西郊马连洼王文元鸡场进行的生产性试验，用BJJX液稀释的本所B-4(1)系公鸡精液给母鸡输精，蛋受精率平均为91.1%，达到了该场用原精受精的蛋受精率的水平(90-95%)。
综上所述可以看出BJJX液可以稀释后立即使用，也可以在低温下短期保存或短途运输后使用，且溶液配制简单，各种成分容易取得。
据蛋受精率对比试验(见表2)，按1∶2稀释鸡精液，在5℃下保存7小时给母鸡输精，经BJJX液稀释的鸡精液的蛋受精率为94.7%，经638334液稀释的鸡精液的蛋受精率为93.5%，同时在发明说明书SU638334中记载，用638334液稀释，在2℃-4℃下保存7小时后输精，蛋受精率才达到91.8%;按1∶1稀释，在5℃下保存24小时，经BJJX液稀释的鸡精液的蛋受精率为92.2%，而用BPSE液稀释的蛋受精率为94.8%。可见，BJJX液稀释保存鸡精液的效果优于638334液(在低温下保存鸡精子只能达7小时)，稍逊于BPSE液，但在生物统计学上无显著差异(P＜0.05)。然而，经在33℃下测定鸡精子生存指数，用BJJX液稀释保存的鸡精液的生存指数为4.71，而用BPSE液稀释保存的生存指数为3.51。BJJX液稀释保存的效果明显地优于BPSE液。BJJX液包含4种成分，638334液亦包含4种，而BPSE液含8种成分。相比之下，BJJX液和638334液较BPSE液配制操作简单。但638334液的酸碱度不够稳定。BJJX液所用成分均属试剂，购买容易，价格低廉。638334液在这方面与此类似。配制100毫升，BJJX液需用0.07元，638334液要用0.036元。二者均简便易行，便于推广。而BPSE液配制操作复杂，且其中的谷氨酸钠和TES，不但难于购买，价格也昂贵。配制100毫升溶液，需花费0.53元，限制了推广和应用。
综观蛋受精率、鸡精子在稀释液中的生存指数以及成本的多少和推广应用的难易。BJJX液优于BPSE液[注]和638334液。
最佳方式取葡萄糖1.40克、柠檬酸钠1.40克、磷酸二氢钾0.36克、磷酸氢二钠2.40克，加水至100毫升，即可制得。制成的稀释液即可用于稀释鸡精液立即输精，也可用于稀释保存7或24小时后输精。
引用文献[1]ОПИСАНИЕ ИЗОЬРЕТЕНИЯ КАВТОРСКОМУ СВИЦЕТЕЛЬСТВУ 638334[2]Sexton，T.J.Poultry semen extenderU.S.Pat.APPl.US 288，260 18 Dec 1981，APPl.29 July1981;12PP Avail NTIS Order NO.PAT-APPL-6-288260;
CA 1982 96∶83127C[注]1985年7月的蛋受精率对比试验鸡精液经BJJX液或BPSE液作1∶2稀释，在0-5℃保存24小时后，蛋受精率分别为79.0(184/233)和78.5(197/251)。
权利要求
1.一种鸡精液稀释液内含磷酸二氢钾和蒸馏水，其特征在于外加葡萄糖、柠檬酸钠和磷酸氢二钠，以提高鸡精子的生存指数和保持其受精能力。这种稀释液的成份含量为葡萄糖 1.20-1.40克柠檬酸钠 1.20-1.40克磷酸二氢钾 0.15-0.36克磷酸氢二钠 2.00-2.40克加蒸馏水至100毫升。
2.根据权利要求
1所述的鸡精液稀释液，其特征在于成分含量为葡萄糖 1.40克柠檬酸钠 1.40克磷酸二氢钾 0.36克磷酸氢二钠 2.40克加蒸馏水至100毫升
3.根据权利要求
1所述的鸡精液稀释液，其特征在于成份含量为葡萄糖 1.20克柠檬酸钠 1.20克磷酸二氢钾 0.16克磷酸氢二钠 2.08克加蒸馏水至100毫升
专利摘要
本发明属鸡精液稀释液，内含葡萄糖、柠檬酸钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠和蒸馏水。本发明作1∶2和1∶1稀释的鸡精液，在5℃下分别保存7和24小时后输精，蛋受精率分别为94.7％和92.2％，与原精立即输精的蛋受精率(95.5％)无显著差别。若降低用量并作1∶2稀释立即输精，蛋受精率为95.9％，达到了原精的受精能力。本发明适于稀释后立即输精，也适于稀释后作短期保存和短途运输后输精。溶液成分少，配制简单，取材容易，价格低廉，易于推广。
文档编号A01N1/02GK86101836SQ86101836
公开日1987年1月24日 申请日期1986年3月22日
发明者陈元明, 廖纪朝, 黄美玉, 朱志庆, 李明淑, 赵志平 申请人:中国农业科学院畜牧研究所导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan