专利名称：化学品和微生物在控制白蚁中的结合应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种灭除白蚁的方法和用于这种灭除方法中的组合物。
已知有许多化学品在特定的浓度下可以杀死白蚁，这样的化学品的具体实例包括cyfluthrin(公开在例如美国专利4，218，469中)、残杀威(公开在例如美国专利3，111，539中)、腈氯苯苯醚菊酯(公开在例如美国专利4，061，664中)、异丙胺磷(公开在例如美国专利3，621，082中)、腈二氯苯醚菊酯(公开在例如美国专利4，024，163中)和1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷(公开在例如美国专利4，742，060中)。
已知某些微生物，特别是一些食虫真菌和细菌，与白蚁集落有关并在一定的条件下引起有害影响。参见，例如，Ko，W.H.，etal，“TheNatureofSoilPernicioustoCoptotermesFormosanus”，JournalofInvertebratePathology，第39卷，38-40页(1982)。
但是，各种已知的杀白蚁剂、细菌和真菌都具有一些特性，这些特性使其在工业上不理想。例如，许多已知的化学品和微生物必须以很大的施用率使用，以致于不经济，也是环境不允许的。已知的杀白蚁剂也常常作用太慢，不能确保其成功地在实际中应用。许多已知的杀白蚁剂的效果取决于应用它们的特定环境，因此许多不可控制的因素可能会对其产生不利影响。
现已发现，将特殊类型的化学品和选自特殊种类的真菌或细菌结合起来用来处理白蚁出没的场所时，产生了意想不到的控制白蚁的协同作用。结合使用时，施用率大大低于化学杀白蚁剂和微生物各单独使用时的施用率。本发明的结合的化学品和真菌或细菌的作用在数天而不是在数周内可见。这种结合使人们可能实现更强、更具有意义以及更经济的白蚁控制。
本发明的特别有利之处在于，它不使用氯代烃类化合物，后者是最广泛地使用的一组控制白蚁的化学品。本发明在控制白蚁时基于这样一种新的概念，即与生物剂结合使用残留作用比已知的杀白蚁剂小的化学试剂，并使用再处理药效降低的白蚁出没场所的施用技术。
本发明的一个目的是提供化学试剂和生物物质的结合物，该结合物可有效地灭除白蚁。
本发明的另一目的是提供一种组合物，该组合物不存在氯代烃类化合物所造成的环境问题，并且不需要大量使用便可有效。
本发明还有一个目的是提供一种有效地控制白蚁的方法。
这些和其他对本领域专业人员来说显而易见的目的通过一种组合物实现，所述组合物包括(1)有效量的选自硝基胍类、硝基甲烷类、吡唑啉类和拟除虫菊酯类的化学品和(2a)食虫真菌，优选(Conidiobolus(Entomophthora)或Metarhizium属或Paecilomyces或Beauveria或Actinomucor种的真菌或(2b)食虫细菌如Serratia。化学品的用量通常应使其在所处理的介质(如土壤)中为至少0.01ppm或在诱饵中为1ppm。真菌或细菌的用量通常应使在与白蚁接触时，每克所处理的介质中存在至少1-100个孢子。真菌或细菌的最佳量取决于所用的具体真菌或细菌的种类。该处理方法可以以与用于施用其他已知化学杀白蚁剂的相同方式施用。本发明的组合物也可用于诱饵配方中和用于再处理已处理的地方。
本发明涉及由下列组分组成的杀白蚁剂，所述组分是(1)至少一种选自下列物质的化学品(a)硝基胍类如1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷;(b)硝基甲烷类如1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚甲基)咪唑烷;(c)吡唑啉类;和(d)拟除虫菊酯类如cyfluthrin，以及或者(2a)食虫真菌如Conidiobolus(Entomophthora)或Matarhizium或Paecilomyces或Beauveria或Actinomucor属的真菌或者(2b)食虫细菌如Serratia。
用于本发明实践中的杀白蚁剂化学品是已知物质，可以通过任何已知的技术制备。例如在下述公开的申请和专利中公开了一些具体的硝基胍类和硝基甲烷类化合物及其制备方法EP464，830;EP428，541;EP425，978;DE3639877;DE3712307;US5，034，524;EP386，565;EP383，091;EP375，907;EP364，844;JP02.207083;EP315，826;EP259，738;EP254，859;JP63307，857;JP63287，764;EP235，725;EP212，600;EP192，060;EP163，855;EP154，178;EP136，636;US4，948，798;EP303，570;EP302，833;US4，918，086;EP306，696;FR2，611，114;EP183，972;EP455，000;JPA3279，359;JPA3，246，283;WO91/17，650;WO91/104，965;US5，039，686;EP135，956;US5，034，404;EP471，372;EP302，389;JP3，220，176;Brazil8，803，621;JP3，246，283;JPA92/9371;andJP3，255，072.
例如，美国专利4，742，060公开了，1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷可以通过在室温下由N-(2-氯-5-吡啶基甲基)乙二胺的甲苯溶液与溴化氰反应来制备。使如此形成的1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-亚氨基咪唑烷氢溴酸盐再与硫酸和发烟硝酸反应。除去二氯甲烷溶剂，回收所要的1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷。
适用于本发明实践中的化学杀白蚁剂用下式表示
式中，R代表氢、酰基、取代的酰基、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂环基、或取代的杂环基;
A代表或者(1)选自下列基团的单官能基团氢、酰基、烷基、芳基、取代的酰基、取代的烷基、取代的芳基，或者(2)与Z连接的双官能基团;
E代表吸电子基团;
X代表N或CH;及Z代表或者(1)选自下列基团的单官能基团氢、酰基、取代的酰基、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂环基、取代的杂环基、OR、NR2、SR，或者(2)与A或X连接的双官能基团。
优选的酰基和取代的酰基包括烷基羰基、取代的烷基羰基、芳基羰基、取代的芳基羰基、烷基磺酰基、取代的烷基磺酰基、芳基磺酰基、取代的芳基磺酰基、烷基磷酰基、取代的烷基磷酰基、芳基磷酰基和取代的芳基磷酰基。
优选的烷基取代基包括任意取代的C-C烷基，特别是任意取代的C1-C4烷基，最优选的是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基或叔丁基。
优选的芳基包括苯基和萘基，最优选的是可任意取代的苯基。
优选的杂环基包括环上有最多10个原子其中至少有一个N、O或S(特别是N)的芳环。特别优选的杂环是噻吩基、呋喃基、噻唑基、咪唑基、吡啶基和苯并噻唑基。
对于上述的酰基、烷基、芳基和杂环基来说，合适的取代基包括具有1-4个、优选1或2个碳原子的烷基如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基;具有1-6个、优选1或2个碳原子的烷氧基如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基和叔丁氧基;具有1-4个、优选1或2个碳原子的烷硫基如甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、异丁硫基和叔丁硫基;具有1-4个、优选1或2个碳原子和1-5个、优选1-3个囟原子的囟代烷基，其中的囟原子可相同或不同，特别是F、Cl或Br(最优选的是氟)，例如三氟甲基;羟基;囟素如氟、氯、溴和碘，特别是氟、氯和溴;氰基;硝基;氨基;烷基中含1-4个、优选1或2个碳原子的单烷基氨基和二烷基氨基，如甲氨基，甲基-乙基-氨基、正丙氨基、异丙氨基和甲基-正丁基-氨基;羧基;具有2-4个、优选2或3个碳原子的烷氧羰基如甲氧羰基和乙氧羰基;磺基(SO3H-);具有1-4个、优选1或2个碳原子的烷基磺酰基如甲磺酰基和乙磺酰基;以及在芳环上具有6-10个碳原子的芳基磺酰基如苯磺酰基。
在式Ⅰ中，A和Z可以一起形成环中具有5-7个、优选5或6个原子的饱和的或不饱和的杂环。该环可以含有1或2个杂原子如O、S、N或N-烷基。如果环中有两个原子不是碳，这两个原子可相同(如两个N)或不同(如一个N、一个O)。
式Ⅰ中E所代表的吸电子基团的具体实例包括NO、CN和囟代烷基羰基如1，5-囟代-C1-C6烷基-羰基。
在式Ⅰ中，Z和X可以一起形成环中有5-7个、优选5或6个原子的杂环、该环可以含有1或2个杂环原子如O、S、N或N-烷基，杂环原子可相同或不同。优选杂环的具体实例包括吡咯烷、哌啶、哌嗪、六亚甲基亚胺、吗啉和N-甲基哌嗪。
式Ⅰ范围内优选的化合物是下述化合物，其中
A和Z各代表氢、可被取代的烷基、可被取代的酰基、可被取代的磷酸基、或NR′R″基团，其中R′和R″各代表氢或烷基或者一起代表任意取代的5或6元环，该环可以含有N或S作为其环员之一，E代表吸电子基团如NO2、CN或COCF3，X代表N或CH，及R代表氢、可被取代的吡啶基、吡啶基烷基、噻唑基烷基、烷硫基烷基、或一个5或6元环，该环含有O、N或S作为其环员之一，该环可被一个或多个囟素、烷基、囟代烷基或硝基取代。
特别优选的化合物包括下述式Ⅰ化合物，其中，Z代表NH、CH或NR′R″，其中R′和R″至少之一为烷基，A代表烷基，A和Z一起代表任意被硫代烷基取代的含氮5或6元环或任意被硫代烷基取代的含硫5或6元环，E代表CN或NO2，X代表N或CH，及R代表5或6元环，该环含有O、N或S作为其至少一个环员，该环任意地被囟素或烷基取代;和式Ⅱ代表的化合物，
式中，n代表1或2，Y代表上面作为合适的取代基对式Ⅰ中的酰基、烷基、芳基和杂环基所述的任何取代基，优选为囟素，最优选的是氯，
A、Z、X和E具有在式Ⅰ中的意义，和式(Ⅲ)化合物
式中A、Z、X、E、Y和n具有在式Ⅰ和Ⅱ中的意义。
可用于本发明的硝基胍类和硝基甲烷类化合物的具体实例包括3-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)噻唑烷;
1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷;
1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚甲基)咪唑烷;
式中R代表氢、烷基、取代的烷基、芳基或取代的芳基，
特别优选的硝基胍类和硝基甲烷类化合物是1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷。
当以诱饵的形式使用时，硝基胍和硝基甲烷类化合物的用量通常应占总诱饵组分的至少0.0001%(重量)，优选为大约0.001～10.0%(重量)，最优选为大约0.01～1.0%(重量)。当把硝基胍或硝基甲烷类化合物直接掺入土壤或直接施用于所处理的表面时，其用量通常应使其在土壤中或所处理的表面上含有至少0.01ppm(百万份数)，优选约0.1～1000ppm，最优选为约1～300ppm。
可用于本发明组合物中的拟除虫菊酯是已知的。天然存在的和合成的菊酯都适用。合适的拟除虫菊酯的实例包括除虫菊酯类、瓜菊酯类、茉莉菊酯类、丙烯菊酯[2-甲基-4-氧代-3-(2-丙烯基)-2-环戊烯-1-基-2，2-二甲基-3-(2-甲基-1-丙烯基)环丙烷羧酸酯]、右旋反丙烯菊酯(D-反式-丙烯菊酯)、椒菊酯[6-氯-1，3-苯并二噁戊环-5-基)甲基2，2-二甲基-3-(2-甲基-1-丙烯基)环丙烷羧酸酯]、四甲菊酯[(1，3，4，5，6，7-六氢-1，3-二氧代-2H-异吲哚-2-基)甲基2，2-二甲基-3-(2-甲基-1-丙烯基)环丙烷羧酸酯]、炔糖菊酯[[5-(2-丙炔基)-2-呋喃基]甲基2，2-二甲基-3-(2-甲基-1-丙烯基)环丙烷羧酯酯]、苄呋菊酯[[5-(苯基甲基)-3-呋喃基]甲基2，2-二甲基-3-(2-甲基-1-丙烯基)环丙烷羧酸酯]、bioethanomethrin[[5-(苯基甲基)-3-呋喃基]甲基3-(环亚戊基甲基)-2，2-二甲基环丙烷羧酸酯]、苯醚菊酯[(3-苯氧基苯基)甲基2，2-二甲基-3-(2-甲基-1-丙烯基)环丙烷羧酸酯]、fenpropanate[氰基(3-苯氧基苯基)甲基2，2，3，3-四甲基环丙烷羧酸酯]、二氯苯醚菊酯[(3-苯氧基苯基)甲基3-(2，2-二氯乙烯基)-2，2-二甲基环丙烷羧酸酯]、cyfluthrin[氰基(4-氟-3-苯氧基苯基)甲基-3-(2，2-二氯乙烯基)-2，2-二甲基环丙烷羧酸酯]、腈二氯苯醚菊酯[氰基(3-环氧基苯基)甲基3-(2，2-二氯乙烯基)-2，2-二甲基环丙烷羧酸酯]decamethrin[氰基(3-苯氧基苯基)甲基3-(2，2-二溴乙烯基)-2，2-二甲基环丙烷羧酸酯]、腈氯苯苯醚菊酯[氰基(3-苯氧基苯基)甲基4-氯-α-(1-甲基乙基)苯乙酸酯、和cyhalothrin[氰基(3-苯氧基苯基)甲基3-(2-氯-3，3，3-三氟-1-丙烯基)-2，2-二甲基环丙烷羧酸酯]。特别优选的拟除虫菊酯是cyfluthrin和腈氯苯苯醚菊酯。
拟除虫菊酯在诱饵组合物中的用量通常应使用其占诱饵组合物重量的至少0.0001%(重量)、优选约0.001-10.0%(重量)，最优选为约0.01～1.0%(重量)。当拟除虫菊酯被直接加到土壤中或直接施用于所处理的表面时，其用量通常应使其以至少0.01ppm的浓度存在，优选约0.1～1000ppm，最优选的是大约1.0～300ppm。
在本发明的灭除白蚁组合物中也可以使用任何已知的吡唑啉类化合物。这样的吡唑啉类化合物公开在例如公开的欧洲专利申请0，438，690中。合适的吡唑啉化合物的实例包括下列各式所代表的那些吡唑啉类化合物
式中α代表囟原子、烷基、囟素或硝基。
吡唑啉在诱饵组合物中的用量通常应使其占诱饵组合物重量的至少0.0001%(重量)、优选约0.001-10.0%(重量)，最优选为约0.01～1.0%(重量)。当吡唑啉被直接加到土壤中或直接施用于所处理的表面时，其用量通常应使其以至少0.01ppm的浓度存在，优选约0.1～1000ppm，最优选的是大约1.0～300ppm。
在本发明的灭除白蚁组合物中所用的真菌天然存在于土壤中，并且可以很容易地从其中分离出来。可用于本发明的杀白蚁剂中的Conidiobolus(Entomophthora)属真菌包括Conidioboluscoronatus、Conidiobolusvirulenta和Conidiobolusobscura。特别优选的是Conidioboluscoronatus。
可用于本发明的Metarhizium属真菌天然存在于土壤中，并且可很容易地从其中分离出来。各种Metarhiziumanisopliae菌株都可用于本发明。最优选的是Metarhiziumanisopliae的F52菌株(BIO1020，DSMNumber3884)和MADA菌株(得自theUniversityofFlorida)(CBSNumber326，Baarn，Netherlands)。
可用于本发明的杀白蚁剂中的Paecilomyces属真菌包括Paecilomycesfarinosus，该真菌天然存在于土壤中并且可通过本领域专业人员已知的方法容易地从土壤中或从致病后并形成孢子的白蚁中分离出来。
优选的Beauveria属真菌是Beauveriabassiana，它也天然存在于土壤中，并且可通过本领域专业人员已知的方法容易地从土壤中或从致病后的并形成孢子的白蚁中分离出来。
Actinomucor真菌也可用于本发明的实践中。
可用于本发明的细菌包括Serratia菌种，这些菌种天然存在于土壤中，并且可通过本领域专业人员已知的方法容易地从土壤中或从致病后并形成胞子的白蚁中分离出来。
所述的真菌或细菌的含量和存在形式通常应使每克介质中有至少101-102个孢子，优选103-105个孢子。当然最佳量取决于所用的菌种。
本发明的杀白蚁剂可以以下列形式使用粉末、溶液、悬浮液、乳浊液、泡沫、膏、颗粒、气雾剂、用活性化合物和真菌处理过的天然和合成物质、以及在聚合物中的细小胶囊。当用粉末或颗粒形式时，可将真菌以适当的量加到土壤-硝基胍、硝基甲烷、吡唑啉或拟除虫菊酯配方中。在最终组合物中可任意地包括供杀白蚁剂用的其他已知添加剂如扩充剂、引诱剂、觅食兴奋剂、信息素。合适的粉末载体的实例包括粘土、滑石、石灰和叶蜡石。
本发明的杀白蚁剂也可以以各种液体形式使用。供杀白蚁剂用的合适的液体载体包括水和惰性溶剂。通常可用于液体杀虫剂制剂中的其他添加剂如乳化剂也可以包括在本发明的液体杀白蚁剂制剂中。化学品和/或真菌制剂的液体制剂也可以包括木质素、水解纤维素、膨润土、果胶或施用后可使制剂固化的任何其他物质。
可将化学化合物和真菌或细菌依次施用于介质中。当使用该技术时，可以先施加化学化合物，也可以先施加真菌。施加化学化合物和真菌的时间间隔可短至几分钟，也可长达数天甚至数周。如果适当的真菌或细菌菌种作为具有必需的孢子密度的天然存在的物质已存在于要处理的介质中，则不需要加入真菌或细菌，只需加化学化合物。这些处理也可以以有规则的或无规则的间歇反复地进行以确保长效。
本发明的杀白蚁剂能有效地对抗所有类型的白蚁，而且已发现它们对地下洞穴白蚁Reticulitermesflavipes和formosan白蚁Coptotermesformosanus特别有效。
下面就结合施用化学品和生物剂的效果所给出的数据表明了出人意料的协同作用。如果将这些药剂单独用于灭除白蚁，要达到与通过本发明的结合施用所获得的相同的灭除白蚁效果，则它们的施用率要高十的几次方倍。
上面已经描述了本发明，下列实施例用来说明本发明。除非另有说明，否则在这些实施例中给出的所有份数和百分率都是重量份数和重量百分率。
实施例实施例1-5说明，与单独用化学杀白蚁剂或单独用真菌灭除白蚁相比，用化学杀白蚁剂结合真菌在短时间内达到高的白蚁灭除程度。实施例6和7说明在灭除白蚁中Conidioboluscoronatus和各种化学杀虫蚁剂的相互作用。实施例8、9和10说明1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷与Metarhizium属和Conidiobolus属的两个真菌病原的相互作用。实施例11说明1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷与三种另外的真菌和一种细菌的协同作用。实施例12说明在有菌土中的微生物与各种硝基甲烷类和硝基胍类之间的协同作用。
实施例1在表1所述的每个试样中使用100g无菌土。对比试样A未用硝基胍、硝基甲烷、拟除虫菊酯、吡唑啉或真菌处理。将1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷以各种浓度(表1中所示的)直接加入试样B、C、D、E和F中的土中。在这些试样的土中未加真菌。将已在具有表1所示浓度的1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷的溶液中浸泡过的滤纸盘放在试样G、H和I中的土上面。在试样G、H或I的土中没有真菌。在试样J的土中未加硝基胍，但试样J包含由其中已自然存在真菌Conidioboluscoronatus的前一个试验中所用的容器得到的土壤，在土壤试样K中，使用其中已自然存在真菌Conidioboluscoronatus的前一个试验的土壤，但此外，将用0.01%硝基胍浸泡的滤纸加给白蚁。
然后，将1g地下白蚁Reticulitermesflavipes加到土壤试样A-K的每个中。在以后18天中的观察结果列在表1中。
由表1中的数据可明显看到，为了达到对白蚁的明显作用以及最后(暴露18天后)100%死亡率，在土壤中必须存在1ppm硝基胍。在土壤中使用较高比例(如10～100ppm)的硝基胍不会明显改变该结果。
当以毒饵的形式(即在处理过的滤纸上)使用硝基胍时，较少量的硝基胍(即0.001%;0.003%和0.010%)与用于处理土壤的较大用量具有同样的效果。
表1中的数据还表明，当在土壤中只施加真菌(即未使用硝基胍)时，所得结果与在未经处理的对比试样中观察的结果一样。即，观察到在试样容器底部的强隧道效应和定位。然而，当将其上已有0.01%硝基胍的滤纸盘放在存在有真菌的土壤上时，试样中的100%的白蚁在两天内死掉。
实施例2重复实施例1的方法，但使用无菌土试样以及其中以一滴粗孢子悬浮液的形式加有Conidioboluscoronatus的土壤试样。该粗孢子悬浮液是通过用50cc无菌水漂洗一个陪替氏培养皿培养基的孢子而制得的。将1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷以各种浓度(表2中所示)直接加到土壤中。这些试验的结果列在表2中。
表2中的数据表明，首先观察在1ppm硝基胍含量时无菌土试样中白蚁情况的变化。然而，需要有100ppm的硝基胍才能在6天后产生相当高死亡率。在移植有真菌的土壤中，在1ppm含量时达到了相当高的死亡率，而在3ppm时达到白蚁的全部死亡率。如果未用硝基胍处理，则移植有真菌的土壤中的白蚁的活动就象未经处理的对比试样中的白蚁一样。
实施例3在表3所述的每个试样中使用100g土壤。一半的土壤试样用无菌土制成。另一半是由已移植有一滴/试样Conidioboluscoronatus的粗孢子悬浮液的无菌土制成的。粗孢子悬浮液是通过用50cc无菌水漂洗陪替氏培养基的孢子而制得的。滤滤盘用具有表3中所示浓度的1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷饱和。将1g地下白蚁Reticulitermesflavipes直接加入每个试样。然后对每个试样中的白蚁观察6天。每个试样的白蚁死亡率列在表3中。
结果如果不使用任何硝基胍，在6天的观察期间，白蚁对移植有Conidioboluscoronatus的土壤没有任何反应。当将处理过的滤纸毒饵加到没有真菌的土壤中时，在0.001%处理中出现行为变化的第一症兆，但甚至在100倍高的程度(0.1%)时，死亡率仍很低(8%)。然而，在移植有真菌的土壤中，在0.001%硝基胍含量时，6天后的死亡率为95%。
表3滤纸盘毒饵的硝基胍处理(%)6天后白蚁的死亡率(%)OFFILTERDISCBAITS移植有ConidiobolusIN%在无菌土中Cor.的土壤0000.00001000.0000300.000100(+)0.000350+0.0012+95+++0.0031000.015++1000.18+++100(+)活动性有些降低+许多白蚁迷失方向++大部分白蚁受到严重伤害+++所有白蚁受到严重伤害实施例4研究在存在或不存在1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷的情况下将白蚁直接暴露于自动生长的真菌的效果。在这些实验中，用一个没有真菌以及没有硝基胍的琼脂板作为对比物。一个试样是带有用1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷处理过的滤纸盘的琼脂板(0.01%活性成分)。第三个琼脂板移植有Conidioboluscoronatus并用含有0.01%硝基胍的滤纸板处理。将白蚁(Reticulitermesflavipes)加到每个琼脂板上并观察4天。这些试验的结果列在表4中。
在未移植的对比试样中，发生白蚁立即扩展隧道的正常现象。4天后未观察到死亡率。在仅用真菌处理的板中，4天后观察到25%的死亡率。在仅用硝基胍毒饵处理的板中，白蚁严重中毒，而且不存在随道。对于用真菌和硝基胍处理的琼脂，在1天内出现100%死亡率，而对于死亡的白蚁，在4天内出现大量的孢子形成。
实施例5将4千克砂土用高压灭菌器灭菌。然后将灭菌的土壤分成两等份。在一份土壤中，通过向每100g土壤中加入10ml蒸馏水将含水量调至10%。第二份灭菌土移植有Conidioboluscoronatus孢子和菌丝的粗淤浆。该淤浆是通过将由陪替氏培养皿上的培养基生长的真菌刮入50ml蒸馏水中而制得的。然后将淤浆以每100g土壤加10ml的比率加到灭菌的土壤中。再将各2千克一批的土壤分在20个塑料杯中以使每个杯中含有100g土壤。每批的十个杯子接受已用0.01%1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷处理过的滤纸盘。其余的试样接受已在蒸馏水中浸泡过的滤纸盘。将大约1g活的Reticulitermesflavipes加到每个试样中。在一周的时间内每二、三天观察死亡率、活动性和真菌生长。这些试验的结果列在表5中。
结果正如所预期的那样，在对比试样中，白蚁在7天观察期间表现正常。在仅用真菌进行的处理中实际是同样的情况，但观察到20%的最终死亡率。仅用化学剂处理达到同样程度的死亡率，不过在研究的早期观察到中毒效果。真菌加化学剂处理在2天内达到100%死亡率。
实施例6研究真菌Conidioboluscoronatus和各种已知杀白蚁剂(列于表6中)的相互作用。在这些试验中，使用100g土壤试样。按照实施例2中所说的方法将Conidioboluscoronatus加入一半土壤试样中。另一半试样中不加真菌。然后将化学杀白蚁剂加入每个试样(即已移植有真菌的试样和未移植真菌的试样)，其加入量足以达到表6中所列的比例。然后，将1g地下白蚁Reticulitermesflavipes加到每个试样中。用7天的时间观察这些试样。观察结果列在表6中。用于该试验的氨基甲酸酯类和有机磷酸酯类对白蚁几乎没有影响，或者它们对没有真菌和加有真菌的土壤的反应相同。相反，所用的拟除虫菊酯(cyfluthrin)在没有真菌时未杀死白蚁，但当在土壤中加入真菌时达到100%死亡率。
实施例7只用拟除虫菊酯杀白蚁剂重复实施例6的方法。结果列在表7中。
结果所用的三种拟除虫菊酯(cyfluthrin、fenvalerate和cypermethrin)对于没有真菌和移植有真菌的土壤都具有相当大的活性差别。Cyfluthrin是最活性的化合物并且所有三个观察数据都表明，在加有真菌的土壤中的白蚁防治比没有真菌的土壤高10倍。
实施例8用下列等级评价该实施例及实施例10中所列的试验结果。
等级死亡率%主观评价198-100优290-97很好380-89好465-79满意545-64不满意630-44不满意720-29差83-19差90-2无效在该试验中使用100g土壤试样。一些试样加入Conidiobolus coronatus的孢子，一些试样加入Metarhizium anisopliae(MADA株，CBS Number 326)的孢子。具体试样所加的孢子数量列在表8A和8B中。然后用已在不同浓度的1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷溶液中浸泡过的滤纸盘处理这些试样。对于具体的试样，用于制备滤纸盘的溶液的浓度列于表8A和8B中。然后将1g白蚁Reticulitermes flavipes加入每个试样中。7天后，用上述等级评价这些试样。所得结果列在表8A和8B中。它们说明，对于Conidiobolus本身(表8A)，每克土壤105的孢子密度对白蚁几乎没有影响。然而，在仅用1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷毒饵以通常为无效的浓度处理的土壤中，当土壤中的孢子浓度低至101时达到100%死亡率。这意味着，当把硝基胍处理的毒饵也加入土壤试样中时，所需的孢子浓度低至少10的4次方。当将Metarhizium加入土壤试样中时(表8B)，在把硝基处理的毒饵也加入土壤试样中的情况下，孢子浓度可低10的几次方。
实施例9用两个不同的Metaehiziumanisoplinae株-MADA株(CBSNumber326)和BIO1020株(DSMNumber3384)以及Conidioboluscoronatus重复实施例8的步骤。然而，不是使用各种浓度的硝基胍，而将滤纸盘在蒸馏水或0.001%1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷溶液浸泡。观察10天的结果列在表9中。
实施例10用表10所示用量的Metarhiziumanisopliae(MADA株，CBSNumber326)和1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷重复实施例8的步骤。5天后所观察的结果列在表10中，采用与实施例8中所述相同的等级。
实施例9和10中的结果证实，通过加入低浓度的1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷毒饵，与真菌种或株无关的孢子浓度可降低至多10的4次方，并且与仅用水浸泡的毒饵处理的土壤相比，仍将达到更有效的白蚁防治。
实施例11用真菌Actinomucorsp.，Paecilomycesfarinosus和Beauveriabassiana以及细菌Serratiasp重复实施例5的步骤。将滤纸盘浸泡在蒸馏水或0.001%1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚氨基)咪唑烷溶液中。观察7天的结果列在表11中。
在表11中，每个框左栏所列的等级系统如下-正常与未处理的对比试样比较没有变化。
+轻微在表面上有一些白蚁，或者进食和随道有一些变化。
++中等在表面上有许多白蚁，进食和随道显著减少;中毒症状(不活泼，不协调)。
+++严重所有白蚁都在表面上，没有进食和随道;中毒症状增强。
++++致死95-100%的白蚁死亡或即将死亡。
在表11中每个框的右栏中所列的数字是%死亡率。
实施例12用浸渍在各种浓度的几种不同的硝基甲烷化合物中的滤纸盘和两种土壤重复实施例5的步骤。一种土壤是取自田地的有菌土。第二种土壤是高压灭菌土。每种硝基甲烷的浓度和4天后所观察的结果列在表12中。
中毒程度列在表12中，使用与表11相同的等级系统。
表124天后的死亡率%硝基甲烷硝基甲烷%初期程度无菌土1)有菌土A0.001+10FF100FFB0.1++++99FF100FF0.01++++25FF100FFC0.1+++62FF100FF0.01+++59FF100FF0.001++35FF100FFD0.1++++96FF100FF0.01+++74FF100FFE0.1++++74FF100FF0.01+++42FF100FF0.001+++24FF100FFF0.1+++22FF100FF0.01++28FF100FFG0.1++++41FF100FF0.01+++21FF100FFH0.1++12FF100FF0.01+6FF100FF0.001-07FFI0.1+++18FF100FF0.01+++13FF100FF0.001+++20FF100FF对比物0.1%溶剂水-040.1%溶剂水水-001)土壤的灭菌方法明显是不足的。
“F”表示由于存在entomophagus真菌，大部分是Metarhizium和Conidiobolus类，白蚁数目的自然减少。每个F代表两次平行测定之一。
虽然为了进行说明，上面已详细描述了本发明，但应该理解，这个细节仅仅是为了说明，本领域的技术人员可在其中作了一些变化但并不脱离本发明的精神和超出本发明的范围。
权利要求
1.一种灭除白蚁的方法，其中包括将有效量的(a)至少一种选自硝基胍类、硝基甲烷类、吡唑啉类和拟除虫菊酯类化合物的化学品和(b)食虫真菌和细菌施用于已观察到白蚁的场所或怀疑存在白蚁的地方。
2.权利要求1的方法，其中化学品是一种硝基甲烷类化合物。
3.权利要求1的方法，其中化学品是1-(2-氯-5-吡啶基甲基)-2-(硝基亚甲基)咪唑烷。
4.权利要求3的方法，其中真菌为Actinomucorsp.属真菌。
5.权利要求3的方法，其中真菌为Paecilomycesfarinosus。
6.权利要求3的方法，其中真菌为Conidioboluscoronatus。
7.权利要求3的方法，其中真菌为Metarhiziumanisopliae。
8.权利要求2的方法，其中真菌为Actinomucorsp.。
9.权利要求2的方法，其中真菌为Paecilomycesfarinosus。
10.权利要求2的方法，其中真菌为Conidioboluscoronatus。
11.权利要求2的方法，其中真菌为Metarhiziumanisopliae。
12.权利要求1的方法，其中真菌为Actinomucorsp.。
13.权利要求1的方法，其中真菌为Paecilomycesfarinosus。
14.权利要求1的方法，其中真菌为Conidioboluscoronatus。
15.权利要求1的方法，其中真菌为Metarhiziumanisopliae。
16.控制白蚁的组合物，其中包括(1)有效量的选自硝基胍类、硝基甲烷类、吡唑啉类和拟除虫菊酯类化合物的化学杀虫蚁剂和(2)食虫真菌或细菌。
17.权利要求16的组合物，其中的化学杀白蚁剂是一种硝基甲烷类化合物。
18.权利要求17的组合物，其中真菌为Conidioboluscoronatus。
19.权利要求17的组合物，其中真菌为Metarhiziumanisopliae。
20.权利要求17的组合物，其中真菌为Actinomycorsp.。
21.权利要求17的组合物，其中真菌为Paecilomucesfarinosus。
22.用于灭除白蚁的组合物，它由有效量的下列组分组成(a)至少一种式Ⅰ所示的化合物
式中，R代表氢、酰基、取代的酰基、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂环基、或取代的杂环基;A代表或者(1)选自下列基团的单官能基团氢、酰基、烷基、芳基、取代的酰基、取代的烷基、取代的芳基、或者(2)与Z连接的双官能基团;E代表吸电子基团;X代表N或CH;及Z代表或者(1)选自下列基团的单官能基团氢、酰基、取代的酰基、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂环基、取代的杂环基、OR、NR2、SR，或者(2)与A或X连接的双官能基团;以及(b)食虫真菌或细菌。
23.权利要求22的组合物，其中，在式Ⅰ表示的化合物中，Z代表NH、CH或NR′R″，其中R′和R″各代表氢或烷基，但至少R′和R″之一是烷基，A代表烷基，E代表CN或NO，X位表N或CH，R代表任意地被囟素或烷基取代的5或6元杂环。
24.权利要求22的组合物，其中，在式Ⅰ所示的化合物中，A和Z一起代表任意被硫代烷基取代的含氮5或6元环或任意被硫代烷基取代的含硫5或6元环，E代表CN或NO2，X代表N或CH，及R代表任意地被囟素或烷基取代的5或6元杂环。
25.权利要求22的组合物，其中(b)为真菌。
26.权利要求25的组合物，其中真菌是Paecilomycesfarinosus。
27.权利要求25的组合物，其中真菌是Paecilomycesfarinosus。
28.权利要求22的组合物，其中(b)为细菌。
29.用于灭除白蚁的组合物，它由有效量的下列组分组成(a)至少一种式Ⅱ或Ⅲ所示的化合物，
式中，A代表或者(1)选自下列基团的单官能基团氢、酰基、烷基、芳基、取代的酰基、取代的烷基、取代的芳基、或者(2)与Z连接的双官能基团;E代表吸电子基团;X代表N或CH;及Z代表或者(1)选自下列基团的单官能基团氢、酰基、取代的酰基、烷基、取代的烷基、芳基、取代的芳基、杂环基、取代的杂环基、OR、NR、SR，或者(2)与A或X连接的双官能基团，Y代表具有1-4个碳原子的烷基、具有1-6个碳原子的烷氧基、具有1-4个碳原子的烷硫基、具有1-4个碳原子的囟代烷基、羟基、囟素、氨基、烷基氨基、羧基、烷氧羰基、磺基、烷基磺酰基或芳基磺酰基，及n代表1或2，和(b)食虫真菌或细菌。
30.权利要求29的组合物，其中(b)为食虫真菌。
31.权利要求30的组合物，其中真菌为Actinomucorsp.。
32.权利要求30的组合物，其中真菌为Paecilomycesfarinosus。
33.权利要求29的组合物，其中(b)为细菌。
全文摘要
一种由有效量的下列组分组成的灭除白蚁的组合物(1)选自拟除虫菊酯类、吡唑啉类、硝基胍类和硝基甲烷类化合物的化学杀白蚁剂，和(2)食虫真菌或细菌，优选地选自Conidiobolus属、Paecilomyces属、Veauveria属或Metarhizium属的真菌。将化学杀白蚁剂施用于已观察到白蚁的场所或怀疑存在有白蚁的地方。如果在已观察到白蚁的场所已经存在所述的真菌或细菌，则不必再将所述真菌或细菌施用于该场所。
文档编号A01N33/18GK1080474SQ9310038
公开日1994年1月12日 申请日期1993年1月9日 优先权日1992年1月9日
发明者W·M·泽克, D·E·西蒙内特, D·A·普赖斯 申请人:迈尔斯有限公司