母种试管斜面培养基配方为可溶性淀粉2克，麦芽糖2克，葡萄糖2克，硫酸镁0.5克，硫酸钙0.5克，磷酸二氢钾0.25克，琼脂20克，蒸馏水1000ml，调节pH值7.5。
[0154]3.二级菌种培养:将燕麦粒，杂木肩，用凉水浸泡12小时后，控干，上锅蒸三十分钟后，降温至15?20°C，加蔗糖，麸皮，各物料配比为燕麦粒96%，鹿糖I %，麸皮I %，杂木肩2%，调节pH值8.5，加水至含水量达到总质量的65%;搅拌均匀，装瓶灭菌，采用1.5Kg/cm2,121°C的高压灭菌方式，灭菌3小时，出锅后，降温至30°C，接入一级菌种；培养温度为25°C，养菌时间20天，得到二级菌种。
[0155]4.三级菌种培养:
[0156](I)培养料的配方比例为杂木肩60%，麦麸10%，碳酸钙5%同，白糖2%，过磷酸钙3%，棉仔壳20%，调节pH值至8.5 ;
[0157](2)将培养料装袋，所用培养袋为17cmX33cm聚丙烯塑料袋，培养料松紧度要求上紧下松，袋口用劲圈加棉塞或无棉盖体盖好，调节袋内含水量至60% ;
[0158](3)灭菌:装好袋后装锅灭菌；灭菌可采用常压灭菌或高压灭菌；常压灭菌，快速升温，温度达到100°C后，不降温，保持15小时；
[0159](4)将步骤3中生成的二级菌种接入培养料培养温度为25°C，养菌时间30天，得到三级菌种。
[0160]5.白蜡伞采用袋栽方式培养:
[0161](I)培养料的配方比例为杂木肩60%，麦麸10%，碳酸钙5%同，白糖2%，过磷酸钙3%，棉仔壳20%，调节pH值至8.5 ;
[0162](2)培养料装袋，将三级菌种分上中下三层装袋与培养料混合装袋，每袋三级菌种分装到10?12袋培养料中，所用培养袋为55cmX 18cm聚丙烯塑料袋，袋口用劲圈加棉塞或无棉盖体盖好，调节袋内含水量至65% ;
[0163](3)灭菌:装好袋后装锅灭菌，高压灭菌需要1.5Kg/cm2，121°C，保持3小时；
[0164](4)接种:接种采用的是步骤3培养出的二级菌种；接种需在接菌室或接种箱中进行；当袋中料温冷却到30°C以下时，开始接种，每袋接种13g菌种。
[0165]6.养菌:
[0166](I)菌种培养温度为25°C ;
[0167](2)接种后2天，接种块上萌发出纤细的菌丝，并逐步“吃料”，向新的培养料中生长;
[0168](3)接种后30天，菌袋内菌丝将培养料长满，但未将培养料完全覆盖；
[0169](4)接种后50天，此时菌丝积累了大量营养，用手捏菌袋，有顶手尖硬感，此时白蜡伞菌种达到生理成熟。
[0170]7.出菇:白蜡伞菌种生理成熟后，除去棉塞和劲圈除去袋口覆盖物，挖掉表面老种块；将袋口拉直成圆筒状，上面覆盖地膜保湿，地面喷水增湿；空气相对湿度控制在85%，温度25°C ;给予微弱的散射光照和每天两次，每次I?2小时的通风换气进行催蕾，7天培养料表面形成大量燕蕾。
[0171]8.采收:双手洗净，消毒，将子实体从袋中连根取出，获得第一茬菇；向菌袋内喷25ml 7K，将袋口封好，空气相对湿度控制在85%，温度25°C，15天可收二茬菇；35天可收三茬菇，65天可收四茬菇，平均每袋可产鲜菇500克。
[0172]对比例
[0173]1.采集白蜡伞子实体。
[0174]2.除去子实体表面杂物，用75%酒精表面消毒，用无菌镊子夹取5mmX3mmX3mm菌组织移接到母种试管斜面培养基上，塞上棉塞，置25°C恒温下培养5天后即可见到组织块上产生白色毛状菌丝；15天毛状菌丝长满斜面试管，得到一级菌种。
[0175]上述母种试管斜面培养基配方为可溶性淀粉2克，麦芽糖2克，葡萄糖2克，硫酸镁0.5克，硫酸钙0.5克，磷酸二氢钾0.25克，琼脂20克，蒸馏水1000ml，调节pH值7.5。
[0176]3.二级菌种培养:
[0177]分别按以下配方配制培养料:
[0178](I)杂木肩77%，麦麸20%，白糖1%，黄豆粉1% ;
[0179]⑵棉仔壳98%，石膏粉1%，白糖1% ;
[0180](3)棉仔壳36%，木肩40%，麦麸20%，石膏粉2%，过磷酸钙0.5%，蔗糖1%，尿素1% ;
[0181](4)玉米粒95%，杂木肩4%，蔗糖1% ;
[0182]各培养料处理方法与实施例5中第3步相同，调节pH值8.5，加水至含水量达到总质量的65% ;搅拌均匀，装瓶灭菌，采用1.5Kg/cm2，12rC的高压灭菌方式，灭菌3小时，出锅后，降温至30°C，接入一级菌种；培养温度为25°C，养菌时间15天，未出燕。
[0183]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种人工栽培白蜡伞的方法，包括: 51.采集白蜡伞子实体； 52.除去子实体表面杂物，用75%酒精表面消毒，取5mmX3mmX 3mm菌组织移接到母种斜面试管培养基上，5?36°0〖旦温培养，15?18天，得到一级菌种； 所述母种试管斜面培养基配方为可溶性淀粉2克、麦芽糖2克、葡萄糖2克、硫酸镁0.5克、硫酸钙0.5克、磷酸二氢钾0.25克、琼脂20克，或麦芽浸膏30克、磷酸二氢钾8克、碳酸钾6克、琼脂25克，加蒸馏水1000ml，调节pH至6.5?7.5 ; 53.二级菌种培养:将燕麦粒，杂木肩，用水浸泡12小时后，烘干，蒸30min后，降温至15?20°C，加蔗糖，麸皮，各物料质量配比为燕麦粒96 %，鹿糖I %，麸皮I %，杂木肩2%，调节PH值7.5?8.5，加水至含水量达到总质量的50?70% ;搅拌均匀，装瓶灭菌，采用1.5Kg/Cm2，121°C的高压灭菌方式，灭菌3小时，降温至30°C，接入一级菌种；培养温度为5?36°C，养菌时间20?30天，得到二级菌种； 54.三级菌种培养，包括步骤: 541.培养料的配方质量比例为杂木肩60?70%，麦麸10?15%，碳酸钙2?3%，白糖I?3%，过磷酸钙I?3%，棉仔壳20?26%，调节pH值至7.5?8.5 ; 542.将培养料装袋，所用培养袋为17cmX33cm聚丙烯塑料袋，袋口密封，调节袋内含水量至50?70% ； 543.灭菌:装好袋后装锅灭菌； 544.将步骤S3中生成的二级菌种接入培养料，培养温度为5?36°C，养菌时间30?40天，得到三级菌种； 55.白蜡伞采用袋栽方式培养，包括步骤: 551.培养料的配方质量比例为杂木肩60?70%，麦麸10?15%，碳酸钙2?3%，白糖I?3 %，过磷酸|丐I?3 %，棉仔壳26?30 %，调节pH值至7.5?8.5 ; 552.培养料装袋，将三级菌种与培养料混合装袋，每袋三级菌种分装到10?12袋培养料中，所用培养袋为55cmX 18cm聚丙烯塑料袋，袋口密封，调节袋内含水量至50?70% ； 553.灭菌:装好袋后装锅灭菌； 554.接种:接种采用的是步骤S3培养出的二级菌种；当袋中料温冷却到30°C以下时，开始接种，每袋接种10?13g菌种； 56.养菌:接种后养菌50?60天，培养温度为5?36°C； 57.出菇:白蜡伞菌种生理成熟后，除去袋口覆盖物；控制空气相对湿度70?95%，温度20?25°C，散射光照，每天两次、每次I?2小时通风换气，6?8天培养料表面形成菇蕾； 58.采收:在无菌环境中，将子实体从袋中取出，获得第一茬菇；向菌袋内喷25ml水，将袋口密封，控制空气相对湿度70?95%，温度20?25°C，15?30天收二茬菇；每袋可收3?4茬菇，整个生长期60?70天。2.根据权利要求1所述人工栽培白蜡伞的方法，其特征在于，步骤S2、S3、S44或S6任意一步中，所述培养温度为20?30°C。3.根据权利要求2所述人工栽培白蜡伞的方法，其特征在于，步骤S2、S3、S44或S6任意一步中，所述培养温度为25 °C。4.根据权利要求1所述人工栽培白蜡伞的方法，其特征在于，步骤S7或S8中，所述空气相对湿度85?95%。5.根据权利要求1所述人工栽培白蜡伞的方法，其特征在于，步骤S43或S53所述灭菌方法可采用常压灭菌或高压灭菌，常压灭菌为100°C，保持15小时；高压灭菌方法为1.5Kg/cm2，121°C的压力，保持2?3小时。
【专利摘要】本发明涉及一种人工栽培白蜡伞的方法。白蜡伞微量元素含量高，为此被列为菌中之极品。本发明利用野外采集到的白蜡伞子实体，通过合理配置一级、二级、三级菌种培养配方，控制菌类培养过程中营养、温度、湿度、光照、空气环境、酸碱度等因素，实现了白蜡伞菌种人工栽培，具有较高的栽培效率，同时具有较大的研究和开发价值。
【IPC分类】A01G1/04, C12N1/14
【公开号】CN105052543
【申请号】CN201510465397
【发明人】贾富海
【申请人】贾富海
【公开日】2015年11月18日
【申请日】2015年7月31日