一种白芨快速扩繁方法
【技术领域】
[0001]本发明涉白芨扩繁技术领域，尤其是一种白芨快速扩繁方法。
【背景技术】
[0002]白发(BletillaStriata(Thunb.)Reichb.f.)为兰科(Orchidaceae)植物白发属多年生草本植物，以干燥块茎入药。具有收敛止血，消肿生肌的功效。对咯血、吐血、便血及外伤止血、疮疡肿毒、手足跋裂等有较好疗效，广泛用于治疗肺结核及支气管扩张咯血、胃溃疡出血等症，其白芨胶广泛应用于食品、医药和日用化学品等领域。近年来，野生白芨遭到过度采挖，导致野生资源濒危。人工栽培因其无性繁殖种苗携带病毒、品质退化、有效产量低，导致市场货源极缺，价格连年攀升。
[0003]为此，解决白芨繁殖技术问题成为了缓解白芨市场需求的关键，基于此，有研究者对白芨苗的快速繁殖做出了研究，如专利号为201110175931.1的《一种快速繁殖白芨苗的方法》，按照以下步骤进行:1)选择白芨成熟种子作为外植体；2)种子消毒后接种至萌发培养基，7天左右种子萌发，14天左右形成原球茎，切割原球茎，转接至原球茎增殖培养基；3)原球茎转接至丛生芽诱导及增殖培养基；4)切割丛生芽使其大量繁殖，等丛生芽长成高约3cm的小苗后转接至生根壮苗培养基，待苗长成高约7?1cm时移栽。由此可见，现有技术中，对于白芨苗快速繁殖操作的难度较大，并且采用的培养基培养白芨苗的成本较高，效果较差，尤其是采用的丛生芽诱导及增殖培养基，生根壮苗培养基中的原料成分以及原料配比不恰当，进而导致培养的白芨苗的品质较差，进一步导致白芨的产量受到限制，提高了生产成本。
【发明内容】
[0004]为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供一种白芨快速扩繁方法。
[0005]具体是通过以下技术方案得以实现的:
[0006]—种白芨快速扩繁方法，包括以下步骤:
[0007](I)选择当年成熟饱满，且无霉烂的白芨果实，并将其采用饱和的洗衣粉水浸泡8-12min，再将其置于自来水管下冲洗3_5h，再将其在无菌条件下，采用体积浓度为75%的酒精浸泡4-6min，再将其转入体积浓度为10 %的次氯酸钠溶液中浸泡14_16min，再将其采用无菌水反复冲洗5-6次，再将果实切开，取出种子，并将种子均匀的接种在新芽培养基上;
[0008](2)将步骤I)接种完成的培养基置于温度为24-26°C，光照时间为ll_13h/天，光照强度为1990-2100LX的环境中进行培养一个月，得到新芽；
[0009](3)将步骤2)中培养得到的新芽转接在壮苗培养基中置于温度为24_26°C，光照时间为ll_13h/天，光照强度为1990-2100LX的环境中进行培养，待培养15-25天后，将其进行自然条件下炼苗5-7天，再将其移栽植入大田，即可。
[0010]所述的新芽培养基为MS固体培养基上添加0.19?0.21LNAA和0.24?0.26L6BA。
[0011]所述的壮苗培养基为MS固体培养基上添加0.4?0.6LNAA、0.19?0.21L6BA和占壮苗培养基物料总重量9-11%的土豆汁。
[0012]所述的无菌水为蒸馏水或者自来水在温度为80-100°C的环境中煮30-50min后冷却至常温的冷却水。
[0013]所述的土豆汁，其制备方法是将土豆、磷酸二氢钾、尿素、腐植酸、蚯蚓粪按照质量比为3:1: 0.1:1: 2进行混合后，再将其置于研磨机中研磨成浆，并调整浆的水分含量为50?80%，再将其置于超声波处理器中处理2?5min，再将其送入紫外线灭菌箱中灭菌处理10-20min，再将其置于过滤器中过滤，获得汁液和滤渣，并将滤渣置于烘干箱中烘干至水分含量为0.1-0.7%，再将其置于粉磨机中研磨成130-150目的粉末，再向其中加入2-3倍粉末重量的蒸馏水，再将其超声处理l_3min后，加入汁液中，获得。
[0014]所述的超声波，其频率为30-300HZ。
[0015]与现有技术相比，本发明的技术效果体现在:
[0016]通过对白芨果实进行饱和洗衣粉水浸泡、酒精浸泡以及次氯酸钠溶液浸泡，并结合浸泡的时间控制，再将其新芽培养基中种子培养，并对新芽培养基的营养成分以及营养配比和培养条件进行控制，再结合对壮苗培养基的营养成分以及营养配比的控制，以及转入壮苗培养基的时机进行控制，进而使得培养的白芨苗的产量得到较大幅度提高，相比传统白芨苗培育方法培育出来的白芨苗的产量高出33?38%，并且相比传统的白芨苗培养周期缩短了约半个月左右，进而极大程度的降低了白芨苗的培养成本，提高了白芨苗品质，尤其是提高了白芨苗的抗病性，确保了白芨苗的基因稳定性，降低了种植白芨的成本。
【具体实施方式】
[0017]下面结合具体的实施方式来对本发明的技术方案做进一步的限定，但要求保护的范围不仅局限于所作的描述。
[0018]本发明所述的NAA 为萘乙酸(1-Naphthaleneacetic acid)。
[0019]本发明所述的6BA为6-苄氨基嘌呤。
[0020]实施例1
[0021 ] 一种白芨快速扩繁方法，包括以下步骤:
[0022](I)选择当年成熟饱满，且无霉烂的白芨果实，并将其采用饱和的洗衣粉水浸泡8min，再将其置于自来水管下冲洗3h，再将其在无菌条件下，采用体积浓度为75 %的酒精浸泡4min，再将其转入体积浓度为10 %的次氯酸钠溶液中浸泡14min，再将其采用无菌水反复冲洗5次，再将果实切开，取出种子，并将种子均匀的接种在新芽培养基上；
[0023](2)将步骤I)接种完成的培养基置于温度为24°C，光照时间为Ilh/天，光照强度为1990LX的环境中进行培养一个月，得到新芽；
[0024](3)将步骤2)中培养得到的新芽转接在壮苗培养基中置于温度为24°C，光照时间为Ilh/天，光照强度为1990LX的环境中进行培养，待培养15天后，将其进行自然条件下炼苗5天，再将其移栽植入大田，即可。
[0025]所述的新芽培养基为MS固体培养基上添加0.19LNAA和0.24L6BA。
[0026]所述的壮苗培养基为MS固体培养基上添加0.4LNAA、0.19L6BA和占壮苗培养基物料总重量9%的土豆汁。
[0027]实施例2
[0028]—种白芨快速扩繁方法，包括以下步骤:
[0029](I)选择当年成熟饱满，且无霉烂的白芨果实，并将其采用饱和的洗衣粉水浸泡12min，再将其置于自来水管下冲洗5h，再将其在无菌条件下，采用体积浓度为75%的酒精浸泡6min，再将其转入体积浓度为10 %的次氯酸钠溶液中浸泡16min，再将其采用无菌水反复冲洗6次，再将果实切开，取出种子，并将种子均匀的接种在新芽培养基上；
[0030](2)将步骤I)接种完成的培养基置于温度为26°C，光照时间为13h/天，光照强度为2100LX的环境中进行培养一个月，得到新芽；
[0031](3)将步骤2)中培养得到的新芽转接在壮苗培养基中置于温度为26°C，光照时间为13h/天，光照强度为2100LX的环境中进行培养，待培养25天后，将其进行自然条件下炼苗7天，再将其移栽植入大田，即可。
[0032]所述的新芽培养基为MS固体培养基上添加0.21LNAA和0.26L6BA。
[0033]所述的壮苗培养基为MS固体培养基上添加0.6LNAA、0.21L6BA和占壮苗培养基物料总重量11%的土豆汁。
[0034]所述的无菌水为自来水在温度为80 °C的环境中煮30min后冷却至常温的冷却水。
[0035]所述的土豆汁，其制备方法是将土豆、磷酸二氢钾、尿素、腐植酸、蚯蚓粪按照质量比为3: I: 0.1: I: 2进行混合后，再将其置于研磨机中研磨成浆，并调整浆的水分含量为50%，再将其置于超声波处理器中处理2min，再将其送入紫外线灭菌箱中灭菌处理lOmin，再将其置于过滤器中过滤，获得汁液和滤渣，并将滤渣置于烘干箱中烘干至水分含量为0.1%，再将其置于粉磨机中研磨成130目的粉末，再向其中加入2倍粉末重量的蒸馏水，再将其超声处理Imin后，加入汁液中，获得。
[0036]所述的超声波，其频率为30Hz。
[0037]实施例3
[0038]—种白芨快速扩繁方法，包括以下步骤:
[0039](I)选择当年成熟饱满，且无霉烂的白芨果实，并将其采用饱和的洗衣粉水浸泡1min,再将其置于自来水管下冲洗4h，再将其在无菌条件下，采用体积浓度为75%的酒精浸泡5min，再将其转入体积浓度为10 %的次氯酸钠溶液中浸泡15min，再将其采用无菌水反复冲洗5次，再将果实切开，取出种子，并将种子均匀的接种在新芽培养基上；
[0040](2)将步骤I)接种完成的培养基置于温度为25°C，光照时间为12h/天，光照强度为2000LX的环境中进行培养一个月，得到新芽；
[0041](3)将步骤2)中培养得到的新芽转接在壮苗培养基中置于温度为25°C，光照时间为12h/天，光照强度为2000LX的环境中进行培养，待培养20天后，将其进行自然条件下炼苗6天，再将其移栽植入大田，即可。
[0042]所述的新芽培养基为MS固体培养基上添加0.2LNAA和0.25L6BA。
[0043]所述的壮苗培养基为MS固体培养基上添加0.5LNAA、0.2L6BA和占壮苗培养基物料总重量10%的土豆汁。
[0044]所述的无菌水为自来水在温度为90 °C的环境中煮40min后冷却至常温的冷却水。
[0045]所述的土豆汁，其制备方法是将土豆、磷酸二氢钾、尿素、腐植酸、蚯蚓粪按照质量比为3: I: 0.1: I: 2进行混合