参照实施例1的方法，设置刮“ η ”皮接种组和钻孔接种对照，并根据树的大小按不同的剂量刮“ η ”皮接种，每个“ η ”裸露木质部上下间隔30cm的环形树皮不处理，具体接种方法和薄层鉴定方法同实施例1;
[0173]结果表明，上述接种方式均可以使白木香结香。其中，以“ η ”面式接菌跟钻孔法接种相比，“η”面式接菌具有结香速度快、结香面大及结香距离长的特点；“η”面式接菌可使白木香在2个月内结香，只是随着时间的延长，结香效果更好，图14为拟层孔菌“ η ”面式接菌(菌液2)操作6个月，将结香的白木香砍下，拍照结果。
[0174]此外，每个“η”裸露木质部的上、下部10-20cm的截段均有点状香分布。
[0175]“ η ”面式接菌操作6个月，将结香的白木香砍下，剖香，然后进行薄层鉴定。FS为拟层孔菌(Fomitopsis sp.)菌株网状接种6个月获得的沉香薄层鉴定看见与ST相似斑点(见图13的FS泳道)。可见拟层孔菌(Fomitopsis sp.)菌株接种6个月后可促进沉香的形成并且“ η ”面式接菌的方法结香效果最佳(见图13的FS泳道和图14，图14-a和图14-b为剖开的结香面，图14-c为裸露木质部的上、下部10-20cm的截段的点状香横截面)。
[0176]效果实施例3
[0177]可可毛色二孢(Las1diplodia theobromae)，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为:CGMCC N0.9591ο
[0178]将可可毛色二孢(L.theobromae)菌株培养3_15d，得到得到菌丝1、菌液2以及菌粉3、膏剂4中的至少一种作为微生物结香剂，参照实施例1的方法，设置刮“ η ”皮接种组和钻孔接种对照，并根据树的大小按不同的剂量刮“ η ”皮接种，每个“ η ”裸露木质部上下间隔50cm的环形树皮不处理，
[0179]具体接种方法和薄层鉴定方法同实施例1 ;
[0180]结果表明，上述接种方式均可以使白木香结香。相比之下，对照组钻孔接种结香距离短。
[0181]其中，以“η ”面式接菌跟钻孔法接种相比，“ η”面式接菌具有结香速度快、结香面大及结香距离长的特点；“η”面式接菌可使白木香在2个月内结香，只是随着时间的延长，结香效果更好，图15为可可毛色二孢菌“ η ”面式接菌(菌液2)操作6个月，将结香的白木香砍下，拍照结果。图15-a和图15-b为剖开的结香面，图15-c为裸露木质部的上、下部10-20cm的截段的点状香横截面)。每个“ η ”裸露木质部的上、下部10-20cm的截段均有点状香分布，如果结香时间延长，点状香分布的距离会更长。
[0182]“ η ”面式接菌操作6个月，将结香的白木香砍下，剖香，然后进行薄层鉴定。LT为可可毛色二孢(L.theobromae)菌株网状接种6个月获得的沉香薄层鉴定看见与ST相似斑点(见图13的LT泳道)。从图13和图15可知，可可毛色二孢(L.theobromae)菌株接种6个月后可促进沉香的形成并且“ η ”面式接菌的方法结香效果佳。
[0183]效果实施例4和5
[0184]将拟盘多毛孢菌株(本实验室分离的菌株，促进沉香形成真菌ASAF05的分离、筛选和鉴定，《中国药学杂志》，2014，Vol.49，陈旭玉等)和木霉菌株培养3-15d，得到得到菌丝1、菌液2以及菌粉3、膏剂4中的至少一种作为微生物结香剂，参照实施例1的方法，设置刮“ η ”皮接种组和钻孔接种对照，并根据树的大小按不同的剂量刮“ η ”皮接种，每个“ η ”裸露木质部上下间隔50cm的环形树皮不处理，
[0185]具体接种方法和薄层鉴定方法同实施例1 ;
[0186]结果表明，上述接种方式均可以使白木香结香。其中，以“ η ”面式接菌跟钻孔法接种相比，“η”面式接菌具有结香速度快、结香面大及结香距离长的特点；“η”面式接菌可使白木香在2个月内结香，只是随着时间的延长，结香效果更好。此外，每个“η”裸露木质部的上、下部10-20cm的截段均有点状香分布。
[0187]图16和17分别为拟盘多毛孢菌和木霉菌“ η ”面式接菌(菌液2)操作6个月，将结香的白木香砍下，拍照结果；其中，图a和b为剖开的结香面，c为裸露木质部的上、下部10-20cm的截段的点状香横截面)。
[0188]将拟盘多毛孢菌和木霉菌“ η ”面式接菌操作6个月，将结香的白木香砍下，剖香，然后分别进行薄层鉴定。图18中的BM为未结香的健康白木香，ST为色酮对照(6，7-二甲氧基-2(2-苯乙基)色酮加甲醇)，ST是检测是否含有沉香成分的标志。CK为钻孔法的结香结果，NP为拟盘多毛孢菌“ η ”面式接种6个月获得的沉香薄层鉴定后获得与ST相似的斑点；ΜΜ为木霉菌“ η ”面式接种6个月获得的沉香薄层鉴定后获得与ST相似的斑点。说明拟盘多毛孢菌和木霉菌菌株接种6个月后可促进沉香的形成，并且相对于钻孔法，“ η ”面式接菌的方法结香效果很好。
[0189]采用如下所述微生物促香剂:硬孔菌、拟层孔菌、可可毛色二孢菌、镰刀菌，拟盘多毛孢菌、头孢菌、霉菌、腐木菌、小球壳菌中的一种或任意两种或任意三种搭配，参照效果实施例I的方法，刮皮进行面式接菌(菌液)，与对照组钻孔接菌相比，本发明提供的面式接菌的方法结香效果最佳。
[0190]各组实验结果显示，与对照组钻孔接菌相比，面式接菌具有结香速度快、结香面大及结香距离长的特点；“面式接菌可使白木香在2个月内结香，并随着时间的延长，结香效果更好。此外，每个“H”裸露木质部的上、下部有10-30cm的点状香分布。
[0191]效果实施例6
[0192]将实施例1的6龄以上白木香(Aquilaria sinensis)分别替换为马来沉香(Aquilaria malaccensis)或越南沉香(Aquilaria crassna)，其他步骤同实施例 1。
[0193]结果表明，上述实施例的面状接种方式均可结香，与对照组钻孔接菌相比，本发明提供的面式接菌的方法结香效果最佳。
[0194]各组实验结果显示，与对照组钻孔接菌相比，面式接菌具有结香速度快、结香面大及结香距离长的特点；面式接菌可使白木香在2个月内结香，并随着时间的延长，结香效果更好。此外，每个裸露面的上、下部10-20cm的截段均有点状香分布。
[0195]马来沉香和越南沉香的6个月的结香效果分别如图19-a和19_b所示。
[0196]以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，包括如下步骤A或B的至少一种: 步骤A: A-1)揭开产沉香植物的树皮，露出木质部； A-2)在木质部上接种微生物促香剂；或者在木质部上设置面状分布的凹沟和/或粗糙面，然后在面状分布的凹沟和/或粗糙面的表面接种微生物促香剂； A-3)包覆所述处理过的木质部，至获得沉香； 步骤B: B-1)在产沉香植物的木质部上开设面状分布的凹沟和/或粗糙面； B-2)在面状分布的凹沟和/或粗糙面的表面接种微生物促香剂； B-3)包覆或不包覆所述处理过的木质部，至获得沉香。2.权利要求1所述的适用于微生物促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，所述步骤(A)或(B)中，还包括同时采用输菌液法、通体结香技术的输液法和钻孔接菌中的至少一种对产沉香植物进行处理。3.权利要求1所述的适用于微生物促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，所述步骤(A-1)中，揭开树皮时，沿树干竖直方向保留至少一条完整延续的树皮。4.如权利要求1所述的适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，在步骤(B-1)中，在产沉香植物的木质部上开设面状分布的凹沟和/或粗糙面的步骤具体为:围绕树干竖切至少一圈细沟，每圈细沟集合为面状分布的凹沟和/或粗糙面:其中，每圈细沟中，每隔lmm-50mm的水平距离竖切一细沟。5.如权利要求1所述的适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，所述步骤A或B中，树干竖直方向保留至少一圈高度不大于50cm的环形树皮不做任何处理，优选为不大于20cm的环状树皮。6.如权利要求1所述的适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，所述步骤A或B中，面状分布的凹沟、粗糙面均为任一规则和/或不规则方向的凹沟集合而成；凹沟的造沟深度不超过树的直径，优选为不超过树的半径，进一步优选为不超过5cm07.如权利要求1所述的适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，所述步骤A或B中，所述的微生物促香剂的剂型为微生物和/或微生物发酵液过滤菌体后的滤液的溶液剂、注射剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂、膏剂中的至少一种，进一步优选为菌丝胶囊剂或颗粒剂，或菌液的溶液剂或注射剂。8.如权利要求1所述的适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，所述步骤A或B中，每隔10-150天重新接种微生物促香剂，至获得沉香。9.如权利要求1所述的适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法，其特征在于，所得的沉香包括面状沉香，还包括点状香和/或点线状香。10.如权利要求1所述的适用于微生物的促进产沉香植物产生沉香的方法获得的沉香木在制备工艺品中的应用。
【专利摘要】本发明提供了一种适用于微生物促进沉香属或拟沉香属植物产生沉香的方法及应用，该方法的步骤包括：在木质部表面先设置面状分布的凹沟或粗糙面，植入微生物促香剂后包覆木质部至结香或者直接在木质部植入微生物促香剂后包覆木质部至结香。本方法通过面式接菌的方法来提高菌株与树干的接触面，利用菌株本身的生物学浸染能力，使形成的沉香具有结香快，结香面宽，结香量大及味道接近自然香等特点。此外，本发明采用“面式”接菌的方法，无须开凿深入树干的孔洞，对白木部分的破坏较小，大大提高了白木的利用率。另外，本发明提供的结香方法剖香容易，如不需要把整棵树砍下则把结香部位的沉香剖下即可。
【IPC分类】A01G7/06, A01G17/00, A01G1/00
【公开号】CN105230372
【申请号】CN201510629795
【发明人】陈旭玉, 魏建和, 刘洋洋, 杨云
【申请人】中国医学科学院药用植物研究所海南分所
【公开日】2016年1月13日
【申请日】2015年9月29日