全雄红鳍东方鲀的制种方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及海水鱼类的养殖领域，具体涉及全雄红鳍东方飩的制种方法和应用。
【背景技术】
[0002] 红鳍东方飩（Takifugurubripus)属鱼类中经济价值最高的一种，也是我国重要 的出口创汇水产品之一，以肉鲜味美、食法多样而闻名于世，在日本、韩国和我国民间嗜食 飩类由来已久，早有"拼死吃河飩"一说，特别是日本，更将红鳍东方飩奉为"鱼中之王"、"百 鱼之首"，其生鱼片独领风骚，价格昂贵，历来是日本食文化的重要代表；红鳍东方飩卵巢、 肝脏、血液、肠、肾、脊髓、脾等含有的河飩毒素（Tetrodotoxin，TTX)及其制剂是缓解肌肉 痉挛和镇痛的高级药物，国际市场上售价高达人民币5~7万元/g;其外皮还可制革，具有 广阔的开发前景。因此，长期以来红鳍东方飩的繁育、养殖、加工利用和遗传等方面的研究 一直是中、日、韩三个友邻国家的研究热点，全雄制种技术更是热点中的重点之一，从上一 世纪90年初期开始至今，日本就先后对红鳍东方飩的雌核发育、性别决定机制和性腺分化 过程等进行了研究。目前国内尚未见红鳍东方飩全雄鱼制种技术研究的报道，但是中国水 产科学院长江水产研究所等单位建立的人工转性三系配套方案，已经成功地应用到全雄罗 非鱼的生产，可以成为红鳍东方飩全雄苗种制种研究很好的借鉴。
[0003] 最近几年，随着养殖规模的盲目扩大和日本、韩国市场需求趋于饱和，养殖红鳍东 方飩成品价格不断下降，养殖利润空间缩小，养殖业户的风险显著增加，投入因此减少，商 品鱼的质量也随着下降，极大地影响了在日韩国际市场的竞争力，成为限制我国红鳍东方 飩养殖业持续稳定发展的主要限制因素。如何依靠科技进步，对红鳍东方飩的养殖品种进 行深入开发，通过对品种质量的提高，在保持现有养殖设施和规模条件不变的情况下，大幅 度地提高提高成鱼的质量和价格，继续推动其养殖产业的持续、健康和稳定发展，已经成为 目前亟须解决的问题。红鳍东方飩雌雄生长速度虽然差异不是很大，但是商品鱼市场价格 差别很大，成熟雄鱼的价格是雌鱼的2倍以上，其所含的精巢在日本又称"白子"，被视为不 可多得的美味，市场价格每公斤600元以上；另外，即使单纯比较肉质，成熟季节雄鱼的肉 质也比雌鱼的好。同时红鳍东方飩的全雄制种技术研究也属当前日本和韩国的研究热点， 因此开展红鳍东方飩全雄制种技术的研究，对于提高我国红鳍东方飩的养殖利润和增强我 国红鳍东方飩养殖产业的国际竞争力都有重要的经济和学术意义。
[0004] 我国红鳍东方飩苗种培育技术在20世纪90年代初即由黄海水产研究所研究开 发成功，但是由于红鳍东方飩有毒，在我国的食用受到限制，阻碍了对它的开发和利用。自 1992年以来，由于日本和韩国市场对红鳍东方飩的需求增加，我国的红鳍东方飩产业化养 殖才逐步在河北秦皇岛和昌黎、辽宁大连、庄河和丹东以及山东烟台和威海等地发展起来， 养殖规模不断扩大，至2006年年养殖产量已高达5, 000吨，产值近5亿元，成为我国北方沿 海海水养殖重要的出口创汇品种之一，对于促进我国北方海水养殖经济发展发挥了重要作 用。
[0005] 目前，红鳍东方飩仅在我国的养殖年产量已经达到5, 000吨，产值近5亿元，是我 国北方沿海海水养殖主要的出口创汇品种之一，红鳍东方飩全雄制种技术一旦建立，不仅 对于我省的红鳍东方飩养殖业有着极大的促进作用，而且会带动我国红鳍东方飩养殖业的 整体发展，极大地提高我国养殖红鳍东方飩在国际市场的竞争力，市场前景广阔，应用潜力 巨大。
[0006] 因此开展红鳍东方飩全雄制种技术的研究，对于提高我国红鳍东方飩的养殖利润 和增强我国红鳍东方飩养殖产业的国际竞争力都有重要的经济和学术意义。红鳍东方飩全 雄制种技术一旦建立，不仅对于我省的红鳍东方飩养殖业有着极大的促进作用，而且会带 动我国红鳍东方飩养殖业的整体发展，极大地提高我国养殖红鳍东方飩在国际市场的竞争 力，市场前景广阔，应用潜力巨大。
【发明内容】
[0007] 本发明解决的技术问题是：红鳍东方飩雄鱼的经济价值、食用价值和药用价值都 高于雌鱼，但目前国内尚未见红鳍东方飩全雄鱼制种技术研究的报道，红鳍东方飩雄鱼的 养殖产量有待提高。
[0008] 本发明的目的是：开发全雄红鳍东方飩的制种方法，此方法可以在不加大投入的 情况下，通过产品价格的提升，将现在的红鳍东方飩养殖产值5亿元提高1倍至10亿元，这 对于继续推动我国北方沿海海水养殖主要的出口创汇品种和辽宁省养殖规模最大的三种 海水鱼类之一的红鳍东方飩的养殖业持续稳定发展意义重大。
[0009] 具体来说，为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：
[0010] -种全雄红鳍东方飩的制种方法，其特征在于，包括下述步骤：
[0011] (1)采用雌鱼激素诱导原系红鳍东方飩雄鱼性转化为转化系功能雌鱼；
[0012] (2)转化系功能雌鱼与正常雄鱼交配，获得超雄鱼；
[0013] (3)超雄鱼与正常的雌鱼交配，获得基因型全部为雄性的仔鱼。
[0014] 优选的，上述方法中，所述性转化过程包括下述步骤：
[0015] (1)将雌鱼激素与幼鱼饲料混合均匀，配置成50-200mg/kg的雌鱼激素饲料；优选 为 100-150mg/kg;
[0016](2)用雌鱼激素喂养原系红鳍东方飩雄鱼，得到转化系功能雌鱼。
[0017] 优选的，上述方法中，其中雌鱼激素为苯甲酸雌二醇或乙炔基雌二醇。
[0018] 优选的，上述方法中，在获得超雄鱼后还包括用以筛选超雄鱼的测交筛选技术。
[0019] 优选的，上述方法中，所述测交筛选技术包括下述步骤：
[0020] 将超雄鱼与原系雌鱼逐尾测交，根据性别分离规律，用子代的雄性率来判别父本 是否为超雄鱼，子代雄性率为90% -100%的父本，可鉴别父本为超雄鱼。
[0021] 优选的，上述方法中，在获得基因型全部为雄性的仔鱼后，还包括下述步骤：
[0022] 通过对苗种培育环境条件的控制，使生产的苗种全部成为表现型为雄性的红鳍东 方飩苗种。
[0023] 优选的，上述方法中，所述环境条件为：水温为15-30Γ，优选为20-25Γ;盐度为 10-35,优选为 15-25;pH值为 6. 8-8. 5,优选为 7. 0-8. 0。
[0024] 优选的，上述方法中，所述环境条件为：水温20°C，盐度为15,pH为7.0。
[0025] 优选的，上述方法中，所述环境条件为：水温25 °C，盐度为25,pH为8.0。
[0026] 本发明还提供由上述方法获得的全雄红鳍东方飩。
[0027] 本发明还提供由上述方法获得的超雄红鳍东方飩。
[0028] 本发明还提供上述全雄红鳍东方飩和超雄红鳍东方飩在生物技术领域、食品领 域、医药领域或美容护肤品领域的应用。
[0029] 利用本发明的制种方法生产的红鳍东方飩苗种，基因型全部为雄性（ΧΥ，?)，全 雄鱼存活率可达90%以上，经一定环境条件下培育后，可得100 %表现型为雄性的苗种，市 场前景广阔，应用潜力巨大。
【附图说明】
[0030] 图1为实施例一~四中采用人工转性和三系配套方案生产全雄红鳍东方飩苗种 的技术路线图。
【具体实施方式】
[0031] 红鳍东方飩的性别决定机制为雌性同配（XX早一ΧΥ?型），拟采用人工转性三系 配套的方案生产全雄红鳍东方飩苗种。首先采用雌鱼激素（苯甲酸雌二醇或乙炔基雌二 醇）诱导红鳍东方飩雄鱼（原系）性转化为功能上的雌鱼（转化系），再与正常的雄鱼交 配，获得部分超雄鱼（纯合系）。筛选出这种超雄鱼，并与正常的红鳍东方飩雌鱼交配，即可 获得基因型全部为雄性的仔鱼，再通过对苗种培育环境条件的控制，使生产的苗种全部成 为表现型为雄性的红鳍东方飩苗种。
[0032] 下面通过具体实施例来进一步说明本发明所述全雄红鳍东方飩的制种方法。
[0033] 实施例中所用试剂的信息如下：
[0034] 苯甲酸雌二醇：化学名称：3_羟基雌甾-1，3, 5 (10)-三烯-17b-醇-3-苯甲酸酯， 含量：多99%，厂家：济南恒佳化工技术开发有限公司。
[0035] 乙炔基雌二醇：17α-乙炔基雌二醇，化学名称：17α-雌甾三烯-20-炔-3, 17-二 醇，厂家：广州和为化工有限公司。
[0036] 幼鱼饲料：型号：601系列，厂家：佛山市顺德区海皇实业有限公司。
[0037] 实施例一
[0038] 1.采用雌鱼激素诱导原系红鳍东方飩雄鱼性转化成转化系功能雌鱼
[0039] (1)配制雌激素饲料
[0040] 将100mg苯甲酸雌二醇作为雌鱼激素与100mL的医用100 %酒精混合，再加入1kg 幼鱼饲料混合均匀，配置成l〇〇mg/kg的饲料，在室温下摊放24小时，直至乙醇挥发后，装袋 冷减。
[0041] (2)诱导过程
[0042] 选取10日龄的30尾红鳍东方飩雄鱼（ΧΥ，?)，投喂l〇〇mg/kg激素饲料，每天上 午8点投喂，投喂量为体质量的1 %，8小