人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体及低温保存方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及生殖医学领域，且特别设及一种人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体 及低溫保存方法。
【背景技术】
[0002] 目前，如何构建理想的人类分裂期胚胎和囊胚冷冻保存体系，提高冻融分裂期胚 胎和囊胚成功率是辅助生殖技术中提高活产率的重要课题之一。
[0003] 玻璃化冷冻是指使细胞及其保护剂溶液W足够快的降溫速度，形成一种高黏度的 介于液态和固态之间、非晶体的、透明的玻璃化状态。玻璃化冷冻技术同慢速冷冻法相比， 需要更快的冷冻降溫速度，因此，对玻璃化冷冻载体提出很高的要求。
[0004] 目前通用的玻璃化冷冻方法是采用开放式载体或封闭式载体进行，使用开放式载 体可W使分裂期胚胎和囊胚直接与液氮接触，从而能够很好地实现冷冻和复苏过程中的迅 速降溫和复溫的目的。但开放式载体使分裂期胚胎和囊胚直接与液氮接触，因而液氮中的 病毒(包括乙肝病毒，丙肝病毒、航病毒或人免疫缺陷病毒等)及其他病原微生物可能会感 染分裂期胚胎和囊胚，对后代安全性带来巨大隐患。而封闭式玻璃化冷冻方法由于液氮和 分裂期胚胎(囊胚)间有冷冻管壁相隔，阻碍了溫度传递，其结果降低了冷冻速率，影响玻璃 化冷冻效果。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的在于提供一种人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体，该冷冻载体既 能实现人分裂期胚胎及囊胚的快速冻融，同时也能分隔人分裂期胚胎及囊胚与液氮，防止 液氮中病原微生物污染人分裂期胚胎及囊胚。
[0006] 本发明的另一目的在于提供一种人分裂期胚胎及囊胚深低溫保存的方法，W提高 人分裂期胚胎及囊胚的冻融成功率。
[0007] 本发明是采用W下技术方案实现的：
[000引一种人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体，包括管体，所述管体包括依次连接的 第一管体、第二管体和第=管体，所述第一管体远离第二管体的一端设置第一开口，所述第 =管体远离第二管体的一端设置第二开口，所述第一开口设置有用于封堵所述第一开口的 第一封堵装置，所述第二开口设置有用于封堵所述第二开口的第二封堵装置，所述第二管 体由金属制成。
[0009] 在本发明较佳实施例中，上述管体由=段不同的管体构成，在使用时，人分裂期胚 胎及囊胚是保存于第二管体中，由于第二管体采用金属材料制成，其溫度传导速率快，相较 于使用普通的塑料制冷冻管，溫度传导速率高出数倍。
[0010] 第一管体和第=管体分别位于第二管体的两端，在将整个管体放入液氮环境中 时，通过第一封堵装置和第二封堵装置将液氮与人分裂期胚胎及囊胚分隔，运样液氮不会 与人分裂期胚胎及囊胚进行直接接触，也就杜绝了液氮中的病原微生物对人分裂期胚胎及 囊胚的污染问题，防止对后代安全性带来隐患。
[0011] 为了提高冷冻速率，第二管体优选采用热传导效率更高的金属制成。
[0012] 进一步地，所述第一封堵装置包括封口棉塞，所述封口棉塞卡设于所述第一管体 的内壁，所述封口棉塞位于所述第一管体的中部。
[0013] 封口棉塞在与液态的液氮接触后，会发生膨胀并将第一管体封闭。
[0014] 使用上述的冷冻载体，本发明同时提出一种人分裂期胚胎及囊胚低溫保存的方 法，其包括W下步骤:将所述分裂期胚胎及囊胚置于上述的人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷 冻载体的所述第二管体中，分别利用所述第一封堵装置封堵所述第一管体的所述第一开口 和利用所述第二封堵装置封堵所述第=管体的所述第二开口，将所述人分裂期胚胎及囊胚 封闭式冷冻载体置于液氮环境中。
[0015] 将人分裂期胚胎及囊胚放入第二管体中后，通过第一封堵装置和第二封堵装置封 闭第一开口和第二开口，实现整个冷冻载体与外界的隔绝，利用金属材质的第二管体进行 热传导，使人分裂期胚胎及囊胚能被迅速冷冻，同时又不会与液氮接触，防止人分裂期胚胎 及囊胚被污染。
[0016] 本发明的有益效果是：（1)通过将冷冻管设置成分段式的结构，将人分裂期胚胎及 囊胚置于中间的第二管体中进行保存，利用金属介质良好的热传导效果，实现人分裂期胚 胎及囊胚的快速冷冻，避免人分裂期胚胎及囊胚上出现冰晶，造成不可逆损伤。
[0017] (2)通过第一管体和第=管体上的第一封堵装置和第二封堵装置将整个管体封 闭，隔绝外界液氮，有效的防止了液氮中的病原微生物对人分裂期胚胎及囊胚进行污染，为 后代带来安全隐患。
【附图说明】
[0018] 为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附 图作简单地介绍，应当理解，W下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对 范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可W根据运 些附图获得其他相关的附图。
[0019] 图1是本发明实施例提供的人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体的结构示意图；
[0020] 图2是本发明实施例提供的人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体中第一管体的结 构示意图；
[0021] 图3是本发明实施例提供的人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体中第=管体的结 构示意图。
[00。]图中标记分别为：
[0023] 冷冻载体100;管体101;第一管体110;第一开口 111;第一封堵装置112;第二管体 120;第S管体130;第二开口 131;第二封堵装置132。
【具体实施方式】
[0024] 为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例 中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是 本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。因此，W下对在附图中提供的本发明的实施例 的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。 基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有 其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0025] W下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
[0026] 本实施例提供一种人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体100,图1是本实施例提供 的人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体的结构示意图，冷冻载体100包括管体101，管体101 包括依次连接的第一管体110、第二管体120和第=管体130,第一管体110、第二管体120和 第=管体130是相互连通的。
[0027] 第一管体110和第=管体130均使用麦管，麦管是通常用于封闭式冷冻法的冷冻用 载体，其由聚对苯二甲酸乙二醇醋-1,4-环己烧二甲醇醋（cylclohexyIenedimethyIene， PETG)制成。阳TG塑料制品高度透明，抗冲击性能优异，较适宜成型厚壁透明制品。
[0028] 图2是本实施例提供的人分裂期胚胎及囊胚封闭式冷冻载体中第一管体的结构示 意图，第一管体110远离第二管体120的一端设置第一开口 111，第一开口 111设置有用于封 堵第一开口 111的第一封堵装置112，第一封堵装置112采用封口棉塞，封口棉塞在遇有液体 时，会发生膨胀并将第一管体110的管壁完全密封，密封性能好，可W在液氮环境下有效的 隔绝液氮，防止液氮与人分裂期胚胎及囊胚接触造成污染。使用时，封口棉塞卡设于第一管 体110的内壁，并且封口棉塞位于第一管体110的中部。第一管体110长为30mm，管壁厚为 0.14mm。
[0029] 第二管体120位于第一管体110和第=管体