野生松茸人工驯化方法
【技术领域】
[0001 ]本发明涉及松茸栽培领域，具体涉及一种野生松茸人工驯化方法。
【背景技术】
[0002]松茸好生于养份不多且位于寒温带海拔3500米以上的高山林地，一般在秋季生成，通常寄生于赤松、偃松、铁杉、日本铁杉及黑松的根部；由于松茸含有多糖、甾体(steroid)、阜苷(saponin)、蒽醌类(anthraquinone)、酸类(phenols)、縣质(tannin)、生物碱(alkaloids)、香豆素(coumarin)、蔽类酯化合物(terpenoidcompound)、油脂(Iipid)、三蔽(terpenes)、留醇(sterolester)及8种必需氨基酸和维生素，并具有强治疗糖尿病、调节血压、预防心血管疾病及抗癌等作用，故松茸相当具有医药价值;且当松茸生长时，一旦突出地面并张开草伞，其香气就会大量逸失，吃起来的味道也变差，经济价值也随之下滑；因此，松茸之所以珍贵在于松茸成长速度缓慢，且采集困难。
[0003]由于松茸吸收营养方式相当特殊，其由松树的细根上长出外生菌根，并通过外生菌根直接吸取松树通过光合作用产生的糖类，这种特殊的生长方式更使得松茸培育相当不易。此外，现有技术为栽种松树并造林后，再将松茸菌丝体接种至松树等以松树林栽培松茸的方法，但由于现今土地取得不易、栽种松树需长久时间、且须保持松树健康等太多变因，导致人工培育松茸具有相当的难度。
【发明内容】
[0004]为解决上述问题，本发明提供了一种野生松茸人工驯化方法，通过营养成分的合理配比，栽培条件的合理调控，从而成功实现了野生松茸的人工代料栽培和出菇，具有现实的意义和作用。
[0005]为实现上述目的，本发明采取的技术方案为:
[0006]野生松茸人工驯化方法，包括如下步骤:
[0007]S1、按重量份称取马铃薯粉30?40份、葡萄糖11?15份，琼脂7?13份，松针营养液50?110份、葡萄叶粉18?20份、硫酸镁0.1?0.3份、磷酸二氢钾0.2?0.6份、氨基酸螯合锰
0.1?0.3份、一水硫酸锌0.1?0.3份混合混匀后装入三角瓶中，经灭菌、冷却、摆成斜面，接种野生松茸的子实体菌肉组织，25°C恒温暗培养6d?1d后，从菌落边缘挑取尖端菌丝体，移植到常规PDA培养基斜面上，25 °C恒温暗培养至菌丝长满整个斜面，如此重复3次，分离筛选保藏的菌种转管扩繁至PDA培养基斜面上，置25°C恒温暗培养至菌丝长满整个培养基斜面；
[0008]S2、取玉米芯26?40份、红薯藤5?15份、鼠尾草25?35份、荔枝木肩5?10份、大蒜末5?15份、海藻酸纤维5?10份、葛仙米45?55份置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.8?1.4MPa，爆破处理11?27min;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.4?
1.9MPa，蒸汽爆破处理0.7?2.5min，得混合物；
[0009]S3、将所得的混合物自然冷却置常温，取5?11份混合菌液稀释2?5倍后喷入原料中并混匀；同时按1.3?2.2L/m3用量的比例将过氧化尿素喷洒到原料上翻拌混合均匀，此后每周喷施I次混合菌液，翻拌均匀形成稳定菌落体，连续接种4?5周后使原料进入分解阶段，停止分解菌接种，再每隔5天翻拌I次原料，持续4?5周，保持原料堆内的有氧条件，原料堆内湿度保持在70 %?80 % ；
[0010]S4、发酵结束后装入食用菌袋，每袋折装干料200?300克，松紧要适度，用细绳扎紧两端袋口，常压下先将温度升至100?105°c，保温20?25min;然后将温度上升至110?115°C，保温60?70min;再将温度升至120?125°C，在压力为0.13?0.14MPa的情况下保温60?70min，最后再闷置30?35min，停止加热，让其自然冷却到24°C以下，无菌条件下接种步骤SI所得的菌丝，放入培养暗室18?23°C避光培养直至培养基表面长出白色菌丝时，采用钴-60 γ射线处理后，揭开瓶盖将栽培瓶侧放进行培育，白天房间温度保持在15?20°C，昼夜温差控制在5?8°C，每天给予500?100lx散射光，每天饶水，当子座长齐、尖端膨大、孢子形成时即可采收。
[0011]其中，混合菌液由乳酸杆菌、地衣芽孢杆菌、谷氨酸棒杆菌混合而成。
[0012]其中，所述乳酸杆菌:地衣芽孢杆菌:谷氨酸棒杆菌的质量为1:2:1。
[0013]其中，所述松针营养液的制备方法为:取生长六年以上的干油松松针，加9?11倍量水煮沸I.5?2小时，取滤液，加水补足至初始液体量，加入16?24%蚕蛹粉后混合即得。
[0014]其中，每天的浇水量为10?30毫米的降水量。
[0015]本发明具有以下有益效果:
[0016]通过营养成分的合理配比，栽培条件的合理调控，从而成功实现了野生松茸的人工代料栽培和出菇，具有现实的意义和作用。
【具体实施方式】
[0017]为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0018]以下实施例中，所使用的混合菌液由乳酸杆菌:地衣芽孢杆菌:谷氨酸棒杆菌按质量1: 2:1混合所得，所述松针营养液的制备方法为:取生长六年以上的干油松松针，加9?11倍量水煮沸1.5?2小时，取滤液，加水补足至初始液体量，加入16?24%蚕蛹粉后混合即得。
[0019]实施例1
[0020]S1、按重量份称取马铃薯粉30份、葡萄糖11份，琼脂7份，松针营养液50份、葡萄叶粉18份、硫酸镁0.1份、磷酸二氢钾0.2份、氨基酸螯合锰0.1份、一水硫酸锌0.1份混合混匀后装入三角瓶中，经灭菌、冷却、摆成斜面，接种野生松茸的子实体菌肉组织，25°C恒温暗培养6d后，从菌落边缘挑取尖端菌丝体，移植到常规PDA培养基斜面上，25 °C恒温暗培养至菌丝长满整个斜面，如此重复3次，分离筛选保藏的菌种转管扩繁至TOA培养基斜面上，置25 °C恒温暗培养至菌丝长满整个培养基斜面；
[0021]S2、取玉米芯26份、红薯藤5份、鼠尾草25份、荔枝木肩5份、大蒜末5份、海藻酸纤维5份、葛仙米45份置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.8MPa，爆破处理27min ；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.4MPa，蒸汽爆破处理2.5min，得混合物；
[0022]S3、将所得的混合物自然冷却置常温，取5份混合菌液稀释2倍后喷入原料中并混匀；同时按2.2L/m3用量的比例将过氧化尿素喷洒到原料上翻拌混合均匀，此后每周喷施I次混合菌液，翻拌均匀形成稳定菌落体，连续接种4周后使原料进入分解阶段，停止分解菌接种，再每隔5天翻拌I次原料，持续4周，保持原料堆内的有氧条件，原料堆内湿度保持在70%%；
[0023]S4、发酵结束后装入食用菌袋，每袋折装干料200克，松紧要适度，用细绳扎紧两端袋口，常压下先将温度升至100°C，保温25min;然后将温度上升至110°C，保温70min;再将温度升至120°C，在压力为0.13MPa的情况下保温70min，最后再闷置30min，停止加热，让其自然冷却到24 °C以下，无菌条件下接种步骤SI所得的菌丝，放入培养暗室18°C避光培养直至培养基表面长出白色菌丝时，采用钴-60 γ射线处理后，揭开瓶盖将栽培瓶侧放进行培育，白天房间温度保持在15 °C，昼夜温差控制在5°C，每天给予5001X散射光，每天浇水，每天的浇水量为10毫米的降水量，当子座长齐、尖端膨大、孢子形成时即可采收。
[0024]实施例2
[0025]S1、按重量份称取马铃薯粉40份、葡萄糖15份，琼脂13份，松针营养液110份、葡萄叶粉20份、硫酸镁0.3份、磷酸二氢钾0.6份、氨基酸螯合锰0.3份、一水硫酸锌0.3份混合混匀后装入三角瓶中，经灭菌、冷却、摆成斜面，接种野生松茸的子实体菌