一种有效避免砗磲贝自体受精的物理方法
【专利摘要】本发明公开了一种有效避免砗磲贝自体受精的物理方法。所有催产的砗磲分配ID号，分别将它们置于盛有常温海水的精子排放桶中，精子排放2?3分钟后，移出砗磲并用500目筛绢过滤组织块，滤液即为精液，标记精液号“号”；同时将移出的砗磲贝置于盛有中温海水的中间桶1分钟，然后取出并置于盛有低温海水的卵子排放桶，在卵子排放桶内让砗磲继续排放卵子15?20分钟，排放完毕后，将砗磲取出，得到卵液，同时用300目筛绢网过滤卵液，卵子位于筛绢网上，收集卵子，记录卵子标号为“♀+ID号”，将收集到的卵子按照标号分别置于盛有常温海水的桶内，恢复以备受精。
【专利说明】
一种有效避免砗磲贝自体受精的物理方法
技术领域
[0001]本发明属于海洋水产行业中砗磲贝类繁育、生态资源恢复领域，具体涉及一种有效避免砗磲贝自体受精的物理方法。
【背景技术】
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[0002]砗磲贝，是一种重要海洋经济贝类，其肉鲜甜脆爽、有报道具备滋阴补阳功效，同时，其贝壳可雕刻加工成极具价值的工艺品。我国南海曾经有大量分布，有数据表明，我国南海主要分布有长砗磲、番红砗磲、鳞砗磲、砗蚝等种类。目前库式砗磲在我国已近绝迹，其它砗磲种类也面临盗采盗挖以及生态环境变化等不利局面，当前国际(美国华盛顿公约)规定了系列砗磲种类野生个体为禁止采卖种类，我国将库式砗磲列为国家一级保护动物，磷砗磲列为二级保护动物。因此开展砗磲贝类的人工繁育技术对于恢复我国南海资源，保护南海生态环境具有十分重要的意义。
[0003]砗磲是种雌雄同体贝类，通常雄性先熟，精卵排放时首先释放精子，最后释放卵子，中间往往还夹杂精卵混合物释放。人工繁育时如何有效避免大量自交后代的出现，对于砗磲人工繁育产业化发展和种质资源的保护具有十分重要的意义。用低温的方法保存水产动物精子，已经有大量文献报道。但利用低温对精子受精活力进行抑制，并通过物理过滤法去除精子获得未受精卵子，从而避免来自相同个体的精卵受精，为砗磲贝人工苗种培育以及防止种质退化提供技术支持未见报道。
【发明内容】
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[0004]本发明的目的是提供一种有效避免砗磲贝自体受精的物理方法。
[0005]本发明的有效避免砗磲贝自体受精的物理方法，其特征在于，所有催产的砗磲分配ID号，分别将它们置于盛有常温海水的精子排放桶中，精子排放2-3分钟后，移出砗磲并用500目筛絹过滤组织块，滤液即为精液，标记精液号“c^ID号”；同时将移出的砗磲贝置于盛有中温海水的中间桶I分钟，然后取出并置于盛有低温海水的卵子排放桶，在卵子排放桶内让砗磲继续排放卵子15-20分钟，排放完毕后，将砗磲取出，得到卵液，同时用300目筛絹网过滤卵液，卵子位于筛絹网上，收集卵子，记录卵子标号为“早+ID号”，将收集到的卵子按照标号分别置于盛有常温海水的桶内，恢复以备受精；
[0006]检查精卵配子质量后弃用劣质配子，据此将来源不同的精子与卵子按需要进行人工受精处理。
[0007]优选，所述的海水都为砂滤海水，所述的将砗磲取出是将砗磲取出用中温海水反复清洗，然后置于恢复培养池。
[0008]优选，所述的常温海水为28°C左右的海水，所述的中温海水为24°C左右的海水，所述的低温海水为20°C左右的海水。
[0009]本发明利用低温对精子受精活力进行抑制，并通过物理过滤法去除精子获得未受精卵子，从而避免来自相同个体的精卵受精，为砗磲贝人工苗种培育以及防止种质退化提供技术支持。
【具体实施方式】
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[0010]以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。
[0011 ] 实施例1长砗磲Tridacna maxima自体受精的避免与防范:
[0012]2016年初，我们于中国科学院海南三亚综合试验站开展了长砗磲(Tridacnamaxima)全人工育苗技术研究，人工催产方法催产种贝2个，为避免自体受精，提高苗种繁育效率具体操作如下:
[0013]1、事先准备干净沙滤海水，并制成常温海水(28°C左右)、中温(过渡)海水(24°C)、低温海水(20°C)各30L备用。
[0014]2、常温条件下收集精子。将所有催产的砗磲分配ID号，分别将它们置于常温精子排放桶(进行精子收集)，在5-羟色胺注射后，5分钟开始出现精子排放，精子排放时长约2-3分钟后，移出砗磲并用500目筛絹过滤精液中的组织块和其他杂物，滤液即为精液，并标记‘济ID号”。同时将砗磲置于盛有中温海水的中间桶(ID对应)1分钟，然后取出并将其置于盛有低温海水的卵子排放桶(ID号对应)。
[0015]3、低温条件下收集卵子。在盛有低温海水的卵子排放桶内让砗磲继续排放性腺混合产物(卵子)15-20分钟，排放基本完毕后，得到卵液，将砗磲取出用中温海水反复清洗，然后置于恢复培养池，同时用300目筛絹网过滤卵液，卵子位于筛絹网上，收集卵子，记录卵子标号为“早+ID号” ο
[0016]4、卵子的常温恢复。将收集到的卵子按照标号分别置于盛有常温海水的桶内，恢复5分钟以备受精，卵子标识为“早+ID”
[0017]5、显微镜检查精卵配子质量弃用劣质配子，据此将来源不同的精子与卵子按需要在常温下进行人工受精处理。
[0018]本实施例中通过完全可控的方式，异源授精获得砗蚝受精率达到90%、孵化率85%以上的理想预期结果。
[0019]实施例2:砗蛇Hippopus hippopus的自体受精的避免与防范:
[0020]2016年初，200L容量塑料桶4个，开展了砗蚝(Hippopus hippopus)的人工繁育工作。为避免自体受精，提高苗种繁育效率具体操作如下:
[0021 ] 1、事先准备干净沙滤海水，并制成常温海水(28 °C左右)、中温(过渡)海水(24°C)、低温海水(20°C)各30L备用。
[0022]2、常温条件下收集精子。将所有催产的砗蚝分配ID号，分别将它们置于常温精子排放桶(进行精子收集)，在5-羟色胺注射后，5分钟开始出现精子排放，精子排放时长约2-3分钟后，移出砗蚝并将该精液用500目筛絹过滤组织块和其他杂物，滤液即为精液，标记精液号‘济ID”。同时将砗蚝置于盛有中温海水的中间桶(ID对应)I分钟，然后取出并将其置于盛有低温海水的卵子排放桶(ID号对应)。
[0023]3、低温条件下收集卵子。在盛有低温海水的卵子排放桶内让砗蚝继续排放性腺混合产物(卵子)15-20分钟，排放基本完毕后，得到卵液，将砗蚝取出用中温海水反复清洗，然后置于恢复培养池。同时用300目筛絹网过滤卵液，去除失去活力的精子，卵子位于筛絹网上，收集卵子，将卵子置于事先准备好的常温海水中，记录对应砗磲ID号，卵子标识为“早+ID，，。
[0024]4、卵子的常温恢复。将收集到的卵子按照标号分别置于盛有常温过滤海水的桶内，恢复5分钟以备受精，卵子标识为“早+ID” ；
[0025]5、显微镜检查精卵配子质量弃用劣质配子，据此将来源不同的精子与卵子按需要在常温下进行人工受精处理。
[0026]本实施例中通过完全可控的方式，异源授精获得砗蚝受精率达到90%、孵化率85%以上的理想预期结果。
【主权项】
1.一种有效避免砗磲贝自体受精的物理方法，其特征在于，所有催产的砗磲分配ID号，分别将它们置于盛有常温海水的精子排放桶中，精子排放2-3分钟后，移出砗磲并用500目筛絹过滤组织块，滤液即为精液，标记精液号‘济ID号”；同时将移出的砗磲贝置于盛有中温海水的中间桶I分钟，然后取出并置于盛有低温海水的卵子排放桶，在卵子排放桶内让砗磲继续排放卵子15-20分钟，排放完毕后，将砗磲取出，得到卵液，同时用300目筛絹网过滤卵液，卵子位于筛絹网上，收集卵子，记录卵子标号为“早+ID号”，将收集到的卵子按照标号分别置于盛有常温海水的桶内，恢复以备受精;检查精卵配子质量后弃用劣质配子，据此将来源不同的精子与卵子按需要进行人工受精处理。2.根据权利要求1所述的有效避免砗磲贝自体受精的物理方法，其特征在于，所述的海水都为砂滤海水，所述的将砗磲取出是将砗磲取出用中温海水反复清洗，然后置于恢复培养池。3.根据权利要求1所述的有效避免砗磲贝自体受精的物理方法，其特征在于，所述的常温海水为28 0C的海水，所述的中温海水为24°C的海水，所述的低温海水为20 0C的海水。
【文档编号】A01K61/00GK106035166SQ201610454759
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月20日
【发明人】肖述, 张跃环, 喻子牛, 马海涛, 向志明
【申请人】中国科学院南海海洋研究所