用于收集、洗涤、冷冻保存、回收并且将脂肪抽出物返回给医师进行自体脂肪转移手术的 ...的制作方法
【专利摘要】本发明详述了一种冷冻保护剂和用于制备生物组织的方法以及相关商业方法和系统。本发明是针对用于收集、洗涤、冷冻保存、回收并且将脂肪抽出物返回给医师以在患者体内进行自体脂肪组织转移手术的方法。在一个实施例中，本发明是针对一种用于冷冻保存生物组织的冷冻保护剂溶液，该冷冻保护剂溶液基本为多元醇和类晶体。
【专利说明】用于收集、洗涤、冷冻保存、回收并且将脂肪抽出物返回给 医师进行自体脂肪转移手术的组合物及方法 发明领域
[0001] 本发明是针对用于收集、洗涤、冷冻保存、回收并且将脂肪抽出物返回给医师以在 患者体内进行自体脂肪组织转移手术的方法。 发明背景
[0002] 现今，对一种用于将抽出的脂肪组织以一种在解冻后适于重新注射进患者体内 的形式进行冷冻保存的方法仍存在需要。虽然医师已经进行自体脂肪组织转移手术数十 年，但是这些手术未被标准化，并且结果通常是次优的。这导致对重复手术的需要，并且医 师有时冷冻过量的脂肪抽出物用于后续使用。然而，在没有冷冻保护剂和适当的储存过 程和温度的情况下，此类组织的活力丧失（里戴劳斯特（Lidagoster)等人，2000;乌尔曼 (Ullman)等人，2004 ;摩斯卡特罗（Moscatello)等人，2005 ;沃尔特（Wolter)等人，2005)。 虽然已经针对冷冻的脂肪组织测试了多种冷冻保存液和方法（例如二甲亚砜（DMSO)和胎 牛血清（FBS))，但是没有一种已经使用了适于在人类中用于直接临床使用的试剂（Pu(卜） 等人，2007 ;Cui (崔）等人，2007 ;卜等人，2010)。 发明概述
[0003] 在第一个实施例中，本发明是针对一种用于冷冻保存基本为多元醇和类晶体的生 物组织的冷冻保护剂溶液。
[0004] 在另一个实施例中，本发明是针对一种用于冷冻保存生物组织的系统，该系统包 括一种冷冻保护剂溶液和一种塑料基容器，该冷冻保护剂溶液不会导致从塑料基容器中浸 出。
[0005] 在另一个实施例中，本发明是针对一种用于收集、洗涤、冷冻保存、回收并且将脂 肪抽出物返回给医师进行自体脂肪组织转移手术的方法。根据美国药典（United States Pharmacopea) (USP)，所有试剂都适于临床使用，并且使用的配件都具有美国食品与药品管 理局（U.S. Food and Drug Administration) (FDA)用于临床使用的批准。该方法被设计成 在冷冻保存并解冻脂肪组织后获得高百分比活力的脂肪细胞，包括获得脂肪组织样本和用 洗涤液（包括乳酸林格氏溶液）洗涤该脂肪组织的步骤。
[0006] 在一个另外的实施例中，本发明是针对一种冷冻保存脂肪组织的方法，包括获得 脂肪组织样本和用类晶体溶液的洗涤液洗涤该脂肪组织的步骤。移除该洗涤，其中添加一 种冷冻保护剂溶液，该冷冻保护剂溶液包括等于有待保存的脂肪组织的体积的多元醇和类 晶体。分离并移除下层溶液。测试下层溶液的微生物污染。将冷冻保护的脂肪组织放置于 多个容器中；并且将冷冻保护的脂肪组织以定义的速率冷冻保存。将冷冻保存的脂肪组织 储存在低于-150摄氏度的温度下。
[0007] 在又另一个实施例中，本发明是针对一种用于收集、深冷储存并分配自体生物样 品材料的商业方法。 附图简要说明
[0008] 图1是本发明的基本冷冻保存方法的流程图。 发明详细说明
[0009] 在此使用某些术语仅为方便并且不应被当作对本发明的限制。术语包括具体提及 的词语，其衍生物以及具有类似含义的词语。在此讨论的实施例并不旨在是穷尽性的或旨 在将本发明局限于披露的精确形式。选择并描述这些实施例以最好地解释本发明的原理及 其应用和实践用途，并且以使得本领域的其他技术人员可以最好地利用本发明。
[0010] 在第一个实施例中，本发明是针对一种用于冷冻保存生物组织的冷冻保护剂溶 液，该冷冻保护剂溶液基本为多元醇和类晶体。在一个优选实施例中，该多元醇是甘油并且 该类晶体是乳酸林格氏溶液。不限制本发明的概念，在此实施例中选择该多元醇和该类晶 体是用于其与一种生物组织（例如脂肪组织）的相互作用。
[0011] 该甘油和乳酸林格氏溶液对应地处于约1比10的比例。此溶液在与脂肪组织合并 后20分钟内建立平衡。平衡意指在细胞内和细胞外获得稳态浓度的时间相等。本实施例中 的对应地处于约1比10的比例的甘油和乳酸林格氏溶液的组合提供了一种高度有效的冷 冻保护剂，该冷冻保护剂可以直接注射进患者体内用于在美容或手术程序中使用。本领域 的普通技术人员将意识到，处于1比20与1比10之间的比例的甘油和乳酸林格氏溶液的组 合在脂肪组织的冷冻保存中未被认为显著不同，但是可接受的最低比例为1比40(2. 5% )。 另外，本发明的冷冻保护剂溶液不需要本实施例的脂肪组织进行任何类型的消化。因此，本 发明的冷冻保护剂的使用为目前可用的冷冻保护剂提供了一种安全、有效且具有成本效益 的替代方案。
[0012] 在另一个实施例中，本发明是针对一种用于冷冻保存生物组织的系统，该系统包 括一种冷冻保护剂溶液，该冷冻保护剂溶液不会导致从塑料基容器中浸出。如在本领域中 所已知，DMSO是一种常用冷冻保护剂；还意识到，它具有两种显著不利性。首先，DMSO导致 从大多数"塑料"类型袋中"浸出"并且因此，需要具有特殊配方并且昂贵的袋或容器。其 次，并且更重要地，DMSO对身体有毒并且不能大量地注射进体内（如在此所讨论）。
[0013] 本实施例的系统的冷冻保护剂溶液集中于（i) 一种多元醇和（ii) 一种类晶体。如 在先前实施例中所讨论，在本实施例中，该多元醇是甘油并且该类晶体是乳酸林格氏溶液。 因此，与包含DMSO的任何溶液形成对照，本实施例的系统提供用于将冷冻保存的脂肪组织 直接注射进体内并且也是具有成本效益的。这归因于以下认识，本发明的冷冻保护剂的所 有组分都是无毒的并且被食品与药品管理局（FDA)批准用于在患者体内使用；更确切地， 乳酸林格氏注射液（Lactated Ringer's Injection)是一种美国药典（USP)无菌的、无热 原溶液，用于在静脉给药中在单次剂量容器中补充体液和电解质，并且甘油被美国食品与 药品管理局（FDA)分类为"公认安全"（GRAS)。柔性容器由具体地设计用于宽范围的肠胃 外药物的非乳胶塑料材料制成，这些药物包括需要在由聚烯烃或聚丙烯制成的容器中递送 的那些。溶液接触材料不包含PVC、DEHP或其他增塑剂。容器材料的适合性已经通过生物 学评价确立，这些生物学评价已经显示该容器通过了用于塑料容器的VI级USP测试。这些 测试证实了该容器系统的生物学安全性。具有将"解冻的"冷冻保存的脂肪组织运至可以 直接将其注射进患者体内的医师的能力减少了成本，增加手术的有效性并且减少（并且潜 在地）消除污染。
[0014] 该塑料基容器具有至少一个带鲁尔接头（Luer fitting)的管口以及至少一个针 孔（spike port)。需要它来完成冷冻保存的脂肪组织（现在解冻的）的直接转移，如在此 所讨论。确切地，在收到冷冻保存的脂肪组织（现在解冻的）后，医师简单地经由注射器抽 取此组织并且将此组织直接注射进患者的所希望的部位。
[0015] 在另一个实施例中，本发明是针对一种用于在冷冻保存并解冻脂肪组织后获得高 百分比活力的脂肪细胞的方法。该方法包括获得脂肪组织样本和用洗涤液（包括乳酸林格 氏溶液）洗涤该脂肪组织的步骤。向洗涤的脂肪组织中添加甘油于乳酸林格氏溶液中的溶 液，以在最初的容器和至少一个第二容器中获得甘油冷冻保护的脂肪组织。将甘油冷冻保 护的脂肪组织通过以控制速率冷却进行冷冻保存，并且储存在低于-80摄氏度（C)的温度 下。在一种优选方法中，在包含液氮的罐的蒸汽相中，将储存温度维持在低于-150摄氏度。
[0016] 将冷冻保存的甘油冷冻保护的脂肪组织在温度约为35至40摄氏度的液浴中解 冻；（在一种优选方法中，为37摄氏度）以形成回收的甘油保护的脂肪组织。将乳酸林格 氏溶液以约等于甘油保护的脂肪组织的体积的量添加进该容器中，以形成一种悬浮液。分 离该悬浮液，以形成（i)下层物（infranatant)和（ii)脂肪组织；将下层溶液从该容器中 移除。将回收的脂肪组织返回该医师，用于在预定的自体脂肪组织转移手术中使用。
[0017] 如所讨论，本发明的核心是解冻时将一种安全且无毒的冷冻保护剂中的脂肪组织 直接注射进患者体内的能力。本实施例的方法的质量控制步骤是通过获得回收的同一冷冻 保存的脂肪组织的质量控制等分部分开始，其中将大幅大于脂肪组织的体积的量的乳酸林 格氏溶液添加进该质量控制等分部分中。将重新悬浮的回收的脂肪组织离心，以形成（i) 下层物洗涤物和（ii)经洗涤的回收的脂肪组织。将经洗涤的回收的脂肪组织的等分部分 转移至一个包含胶原酶溶液的试管中。将脂肪组织-胶原酶悬浮液在约37摄氏度下孵育， 以将脂肪组织部分地解离为脂肪细胞和基质血管部分细胞。将胶原酶通过向脂肪组织-胶 原酶悬浮液中添加生长培养基而中和，并且通过对经消化回收的脂肪组织进行离心来回收 脂肪组织，以将漂浮的脂肪细胞与游离的基质血管部分细胞分离。将解离的脂肪细胞的一 个样品从回收的脂肪组织转移至一个包含活体染料的试管中，从而基于使用的活体染料， 使用能够区分活的脂肪细胞和死的脂肪细胞的仪器确定该样品中的有活力的脂肪细胞的 百分比。将活力分析的结果分发给收集医师，该医师最常见地进行将解冻的脂肪组织注射 进患者体内的手术。使用此方法，有活力的脂肪组织细胞的百分比典型地大于70. 0%。
[0018] 参考图1，在一个另外的实施例中，本发明是针对一种冷冻保存脂肪组织的方法 10,包括获得脂肪组织样本12和用类晶体溶液的洗涤液洗涤该脂肪组织14的步骤。移除 该洗涤16,其中添加一种冷冻保护剂溶液18,该冷冻保护剂溶液包括等于有待保存的脂肪 组织的体积的多元醇和类晶体。分离并移除下层溶液20。测试下层溶液的微生物污染22。
[0019] 将冷冻保护的脂肪组织放置于多个容器中24并且将冷冻保护的脂肪组织以定义 的速率冷冻保存。26将冷冻保存的脂肪组织储存在低于-150摄氏度的温度下。28
[0020] 冷冻保存的定义的速率是-1摄氏度/分钟到至少-20摄氏度，并且以-1至-2摄 氏度/分钟继续冷却至-80摄氏度。相变（由液体至固体）后的冷却速率临界小于初始冷 却速率。如在本发明中所理解，该多元醇是甘油。并且该类晶体是乳酸林格氏溶液。
[0021] 在又另一个实施例中，本发明是针对一种用于收集、深冷储存并分配自体生物样 品材料的商业方法。该方法是通过以下方式起始：收集用于进行生物样品材料的收集、深冷 储存和分配的定义的服务费用，并且此后通过（i)支付预定的费用以支持用于收集该生物 样品所进行的医师服务并且（ii)提供一种收集系统（该收集系统包括多种用于收集并运 送该生物样品的部件）来协调顾客的生物样品的收集。该商业方法的此起始部分不仅对于 获得样品而言是重要的，对于开始顾客与商业实体的商业关系而言也是重要的。顾客、医师 和商业实体将达成对"大局（big picture)"和此次合作的长期关系的理解，以便理解利益、 权利、义务以及成本（如在此所解释）。
[0022] 医师用于获得生物样品的预定费用将取决于有待处理和冷冻保存的脂肪组织的 总体积而变化，但是将最可能受限于与收集系统、至加工设施的运送和冷冻保存有关的成 本。然而，该成本将是一种一次性设定费用，该费用将在开始获得该样品的程序之前由客户 同意。
[0023] 该收集系统是被设计用于协调该商业方法的所定义的部件组。该收集系统包括一 种用于获得的生物样品的鉴定材料。这最常见地是一个定义组的标准表格，这些标准表格 可以包括用于与编码程序一起使用的编码标签（如在此所讨论）。客户样品袋包括用于与 该编码程序一起使用的同样的编码标签。这些标签将遵从国家和联邦法规，例如21CFR 11。 该收集系统进一步包括一个运送箱，该运送箱可以商业地生产并且与运送承运人（例如联 邦快递（FedEx))配合。除关于装运地点的信息之外，运送标记还将包括用于与同一编码程 序一起使用的同样的编码标签。协调后，该方法通过从客户获得生物样品并且将该生物样 品在收集系统中运至加工设施而继续。
[0024] 在加工设施处，这些收集系统部件经由登录端口被引入至数据库的处理模块；该 模块具有该编码程序。该数据库将是专门设计用于使用专有程序或可商购的程序（例 如Microsoft's Access程序）来加工并储存电子保护的健康信息（eProtected health information)。该数据库将包括但不限于，获得自收集系统用于使"客户样品与该客户"配 合的信息；例如被包括在客户特异性条形码客户样品袋中的信息。此信息还将被包括在一 个标准化表格中。该数据库将被组织在类似于该标准化表格中的组织的模块中，将是可检 索的，并且将被编程，以产生与此过程相关的所有不同表格。该数据库包括用于组织并储存 关于生物样品的信息并记录信息的编码程序。
[0025] 该生物样品是通过用一种洗涤液（包括乳酸林格氏溶液）洗涤该脂肪组织而进行 加工。向洗涤的脂肪组织中添加甘油于乳酸林格氏溶液中的溶液，以在最初的容器和至少 一个第二容器中获得甘油冷冻保护的脂肪组织。将甘油冷冻保护的脂肪组织冷冻保存。
[0026] 根据要求，将冷冻保存的甘油冷冻保护的脂肪组织在温度约为37摄氏度的液浴 中解冻，以形成回收的甘油保护的脂肪组织。将乳酸林格氏溶液以大约等于甘油保护的脂 肪组织的体积的量添加进该容器中，以形成一种悬浮液。分离该悬浮液，以形成（i)下层物 和（ii)脂肪组织；将下层溶液从该容器中移除。将回收的脂肪组织返回该医师，用于在预 定的自体脂肪组织转移手术中使用。
[0027] 回收同一冷冻保存的脂肪组织的一个质量控制等分部分，并且将大幅大于脂肪组 织的体积的量的乳酸林格氏溶液添加进该质量控制等分部分中。将重新悬浮的回收的脂肪 组织离心，以形成（i)下层物洗涤物和（ii)经洗涤的回收的脂肪组织。将经洗涤的回收的 脂肪组织的等分部分转移至一个包含胶原酶溶液的试管中。将脂肪组织-胶原酶悬浮液在 大约37摄氏度下孵育，以将脂肪组织部分地解离为脂肪细胞和基质血管部分细胞。将胶 原酶通过向脂肪组织-胶原酶悬浮液中添加生长培养基而中和，并且然后将经消化回收的 脂肪组织离心，以将漂浮的脂肪细胞与游离的基质血管部分细胞分离。将解离的脂肪细胞 的一个样品从回收的脂肪组织转移至一个包含活体染料的试管中，从而基于使用的活体染 料，使用能够区分活的脂肪细胞和死的脂肪细胞的仪器确定该样品中的有活力的脂肪细胞 的百分比。活力分析的结果将被报告给收集医师。使用此方法，有活力的脂肪组织细胞的 百分比典型地大于70.0%。
[0028] 将分离的材料分发给自其获得生物样品的顾客；并且基于预定的患者手术，按照 请求指示，将包含冷冻保护的脂肪组织的解冻容器在运送系统中进行运送。
[0029] 脂肪组织的直接冷冻保存的开发
[0030] 在四种不同冷冻保存条件下评价脂肪组织的冷冻，两种用广泛使用的二甲亚砜 (DMSO,在CryoStor CS-5和CS-10中，分别具有5 %和10% DMSO);并且两种用10 %甘油 (一种较老但仍然有用的冷冻保护剂），使用和不使用〇. 2M海藻糖。海藻糖是一种非常稳 定的二糖（糖），它已经被发现可用于各种各样的细胞类型（包括脂肪组织）的冷冻保存。 事实上，甘油和海藻糖两者均由某些生物体作为冷冻保护剂而内源地产生。卜（Pu)等人 将脂肪抽出物的小样品冰冻于3. 3% DMS0+0. 2M海藻糖中（2004)，并且随后冰冻于单独的 0.2M海藻糖中（2005)，并且发现就脂肪组织的解冻后活力而言，这些表现良好。我们先前 测试了 10% DMS0、7. 5% DMSO+聚乙烯吡咯烷酮（PVP)、10%甘油以及具有10% FBS的10% 甘油（2005)，并且发现用DMSO冷冻保存给出优于甘油的结果（摩斯卡特罗（Moscatello) 等人，2005)。然而，在那些实验中，我们没有像我们在当前实验中那样在冷冻保存之前，测 试脂肪组织与冷冻保护剂的平衡。平衡时间对于甘油而言比对于DMSO而言更可能是一种 重要变量，因为DMSO比甘油更加迅速地穿透细胞（江（Jiang)，2008)，但是DMSO在室温或 体温下对细胞有毒，而甘油是无毒的。
[0031] 在进行的实验中，冷冻在甘油和DMSO中的脂肪组织都产生了类似的解冻后脂肪 细胞活力（表1)。这通过将冷冻保存的脂肪组织（AT)在37°C水浴中迅速解冻并且用乳 酸林格氏溶液洗涤，随后用lmg/mL胶原酶消化而确立。将消化的脂肪组织再次洗涤，并且 将漂浮的解离脂肪细胞与等体积的吖啶橙（AO)或碘化丙啶（PI)储备溶液混合。示于表 中的AO和PI两个测定的数目是有活力的细胞百分比。在AO测定的情况下，这是％ AO阳 性（#A0+/#BR细胞X 100%)，并且在PI测定的情况下，这是（#BR+-#PI+V(#BR细胞）x 100%。换言之，在两个测定中，使用亮场图像确定计数的脂肪细胞的总数。在AO测定中， AO-阳性细胞被认为是有活力的，并且在PI测定中，PI-阳性细胞被认为是无活力的，但是 两种情况的目的都是估计活力百分比。软件进行计算，这些计算对正在使用的染料是特异 的。
【权利要求】
1. 一种用于冷冻保存生物组织的冷冻保护剂溶液，主要由以下项组成： a. -种多元醇；以及 b. -种类晶体。
2. 如权利要求1所述的冷冻保护剂溶液，其中该多元醇是甘油。
3. 如权利要求2所述的冷冻保护剂溶液，其中该类晶体是乳酸林格氏溶液。
4. 如权利要求3所述的冷冻保护剂溶液，其中该生物组织是脂肪组织。
5. 如权利要求4所述的冷冻保护剂溶液，其中该甘油和乳酸林格氏溶液对应地处于约 1比10的比例。
6. 如权利要求5所述的冷冻保护剂溶液，其中该溶液在与脂肪组织合并后在30分钟内 建立平衡。
7. -种用于冷冻保存生物组织的系统，包括： a. -种冷冻保护剂溶液，该冷冻保护剂溶液不会导致从塑料基容器中浸出； b. -种塑料基容器。
8. 如权利要求7所述的系统，其中该冷冻保护剂溶液包括（i) 一种多元醇和（ii) 一种 类晶体。
9. 如权利要求8所述的系统，其中该多元醇是甘油。
10. 如权利要求9所述的系统，其中该类晶体是乳酸林格氏溶液。
11. 如权利要求10所述的系统，其中该塑料基容器包括至少一个鲁尔管端口以及至少 一个针孔。
12. -种用于在冷冻保存并解冻脂肪组织后获得高百分比活力的脂肪细胞的方法，包 括以下步骤： a. 获得一个脂肪组织样本； b. 用一种包括乳酸林格氏溶液的洗涤液洗涤该脂肪组织； c. 向该洗涤的脂肪组织中添加一种甘油于乳酸林格氏溶液中的溶液，以在最初的容器 和至少一个第二容器中获得甘油冷冻保护的脂肪组织； d. 冷冻保存这种甘油冷冻保护的脂肪组织； e. 将这种冷冻保存的甘油冷冻保护的脂肪组织在约37摄氏度温度的液浴中解冻，以 形成一种回收的甘油保护的脂肪组织； f. 将乳酸林格氏溶液以约等于甘油保护的脂肪组织的体积的量添加进该容器中，以形 成一种悬浮液； g. 分离该悬浮液，以形成⑴下层物和（ii)脂肪组织； h. 将这些下层物从该悬浮液中移除 i. 将这种回收的脂肪组织返回到医师，以用于在预定的自体脂肪组织转移手术中使 用； j. 回收同一冷冻保存的脂肪组织的一个质量控制等分部分； k. 将大幅大于脂肪组织的体积的量的乳酸林格氏溶液添加进该质量控制等分部分 中； l. 将该重新悬浮的回收的脂肪组织离心，以形成（i)下层物洗涤物和（ii)经洗涤的回 收的脂肪组织； m. 将这种经洗涤的回收的脂肪组织的一个等分部分转移至一个包含胶原酶溶液的试 管中； n. 将该脂肪组织-胶原酶悬浮液在约37摄氏度下孵育，以将该脂肪组织部分地解离为 脂肪细胞和基质血管部分细胞； 〇.通过向该脂肪组织-胶原酶悬浮液中添加生长培养基而中和该胶原酶；将这种经消 化的回收的脂肪组织离心，以将这些漂浮的脂肪细胞与游离的基质血管部分细胞分离； P.将这些解离的脂肪细胞的一个样品从这种回收的脂肪组织转移至一个包含活体染 料的试管中； q. 基于使用的该活体染料，使用一种能够区分活的脂肪细胞和死的脂肪细胞的仪器确 定该样品中的有活力的脂肪细胞的百分比；并且 r. 将活力分析的结果报告给收集的医师。
13. 如权利要求12所述的方法，其中有活力的脂肪组织细胞的百分比大于70. 0%，如 通过吖啶橙（A0)染色所确定的。
14. 如权利要求13所述的方法，其中冷却的定义的速率是-1摄氏度/分钟至至少-20 摄氏度，并且以-1至-2摄氏度/分钟继续冷却至-80摄氏度。
15. -种冷冻保存脂肪组织的方法，包括以下步骤： a. 获得一个脂肪组织样本； b. 用一种包括类晶体溶液的洗涤液洗涤该脂肪组织； c. 移除该洗涤； d. 添加一种冷冻保护剂溶液，该冷冻保护剂溶液包括等于有待保存的脂肪组织的体积 的一种多元醇和一种类晶体； e. 分离并移除下层溶液； f. 测试该下层溶液的微生物污染； g. 将这种冷冻保护的脂肪组织放置于多个容器中； h. 将这种冷冻保护的脂肪组织以定义的速率冷冻保存；并且 i. 将这种冷冻保存的脂肪组织储存在低于-150摄氏度的温度下。
16. 如权利要求15所述的方法，其中冷冻保存的该定义的速率是-1摄氏度/分钟至至 少-20摄氏度，并且以-1至-2摄氏度/分钟继续冷却至-80摄氏度。[解释]相变（由液 体至固体）后的冷却速率临界小于初始冷却速率。
17. 如权利要求16所述的方法，其中该多元醇是甘油。
18. 如权利要求17所述的方法，其中该类晶体是乳酸林格氏溶液。
19. 一种用于在冷冻保存并解冻脂肪组织后获得高百分比活力的脂肪细胞以供运送并 在患者手术中使用的商业方法，包括以下步骤： a. 收集针对生物样品材料的收集、运送、深冷储存和分配而定义的服务的费用； b. 协调顾客的生物样品的收集，包括（i)支付预定的费用以支持用于收集该生物样品 所进行的医师服务并且（ii)提供一种收集系统，该收集系统包括多种用于收集并运送该 生物样品的部件； c. 从该客户获得该生物样品； d. 将在该收集系统中的该生物样品运送至加工设施； e. 将来自这些收集系统部件的信息引入至数据库的处理模块； f. 将该生物样品冷冻保护在一种溶液中，该溶液包括用于冷冻保存的（i)甘油和（ii) 乳酸林格氏溶液； g. 针对用于冷冻保存的所分离的材料的质量控制进行测试； h. 冷冻保存这种分离的材料； i. 解冻这种冷冻保存的生物样品； j. 将这种分离的材料分配给自其获得生物样品的顾客；并且 k. 按照基于预定的患者手术的要求所指示的，将包含这种冷冻保护的脂肪组织的解冻 容器在一个运送系统中进行运送。
20. 如权利要求18所述的商业方法，其中该收集系统包括： a. 用于所获得的生物样品的鉴定材料； b. 用于与编码程序一起使用的编码标签； c. 客户样品袋； d. 运送箱；以及 e?运送标记。
21. 如权利要求2所述的商业方法，其中这些收集系统部件通过扫描完成的记录信息 中的该客户样品袋上的条形码经由登录端口被引入至数据库的处理模块。
22. 如权利要求3所述的商业方法，其中这种获得的生物样品是一种脂肪组织样品。
【文档编号】C12N5/07GK104487567SQ201380039198
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2013年6月6日 优先权日:2012年6月7日
【发明者】大卫·摩斯卡特罗 申请人:大卫·摩斯卡特罗