本公开一般性涉及适用于给予具有牛乳蛋白过敏症或牛乳蛋白过敏症倾向的儿科受试者的营养组合物。更具体地，本公开涉及经由给予本公开的营养组合物，支持和促进对牛乳具有过敏症和/或这样的过敏症倾向的儿科受试者的营养的方法。在一些实施方案中，营养组合物包含非乳品蛋白质以及益生菌例如鼠李糖乳杆菌GG (Lacobacillus rhamnosus GG “LGG”)；本公开的组合物还可包括脂肪或脂质(例如某些种类的极性脂质)、包括聚葡萄糖和半乳寡糖的益生元共混物和长链多不饱和脂肪酸的源，其中前述组分可呈现加和和/或协同有益效果。
背景技术：
食物过敏症(例如对牛乳蛋白、大豆蛋白、稻米蛋白和花生的过敏症)正被认识为日益增加的问题。牛乳蛋白过敏症(“CMA”)是在早期童年时最常见的食物过敏症，并且影响2-3%的年轻儿童，带来一些列的免疫球蛋白(Ig-E)和非Ig-E介导的综合征。随着日渐增加的流行性和严重性，食物过敏症持续成为生长健康关注，潜在地提高在生命后期中遗传性过敏症疾病、持续的风险和功能胃肠病症。因此，强烈需要开发有效的治疗。
治疗CMA的第一步是快速消散症状，从饮食消除牛乳蛋白是唯一被证明的治疗。对于小于1岁的婴儿，基于充分水解的蛋白质(酪蛋白或乳清)的配方被常规推荐用以解决CMA。其它配方，例如基于大豆蛋白的或基于氨基酸的配方指示用于对牛乳蛋白也显示极度灵敏度的婴儿或儿童。
发明公开
简要地，在一种实施方案中，本公开涉及一种用于管理儿科受试者食物过敏症(例如CMA)的症状和减少对这样的过敏症的耐受获得的时间的方法和组合物。所述方法包括给予儿科受试者包含非乳品蛋白质以及益生菌例如鼠李糖乳杆菌GG (“LGG”)的营养组合物。所述组合物还可包括脂肪或脂质(例如某些种类的极性脂质)、包括聚葡萄糖和半乳寡糖的益生元共混物和长链多不饱和脂肪酸的源。在某些实施方案中，所述方法包括给予营养组合物，所述组合物包含：
a. 至多约7 g/100 kcal的蛋白质源，更优选约1 g/100 kcal-约5 g/100 kcal的蛋白质源，其中所述蛋白质源基本上由一种或多种非乳品蛋白质组成；
b. 约1×104-约1.5×1012 cfu的益生菌/100 kcal。在一些实施方案中，益生菌的量可为约1×106-约1×109 cfu的益生菌/100 kcal，更优选约1×107 cfu/100 kcal-约1×108cfu的益生菌/100 kcal。在某些实施方案中，益生菌包含LGG；
c. 至多约7 g/100 kcal的脂肪或脂质源，更优选约3 g/100 kcal-约7 g/100 kcal的脂肪或脂质源；
d. 约0.1 g/100 kcal-约1 g/100 kcal的包含PDX和GOS的益生元组合物；和
e. 至少约5 mg/100 kcal的包含二十二碳六烯酸(DHA)的LCPUFA，更优选约5 mg/100 kcal-约75 mg/100 kcal的包含DHA的LCPUFA。
在其它实施方案中，本公开涉及用于管理儿科受试者食物过敏症的症状和降低耐受获得的时间的方法，通过给予受试者包含非乳品蛋白质和益生菌的营养组合物。
应理解的是，前述一般性描述和以下详细说明二者代表本公开的实施方案，并且旨在提供用于理解要求保护的本公开的性质和特性的综述或框架。所述描述用于解释要求保护的主题的原则和操作。在阅读以下公开时，对于本领域技术人员来说，本公开的其它和进一步特征和优点将容易显而易见。
公开详述
现在将详细参考本公开的实施方案，下文描述其一个或多个实施例。通过解释本公开的营养组合物而不是限制的方式，提供每一个实施例。实际上，对于本领域技术人员来说将显而易见的是，在不偏离本公开的范围的情况下，可以对本公开的教导进行各种修改和变化。例如，作为一个实施方案的一部分说明或描述的特征可与另一个实施方案一起使用，以得到再一个实施方案。
因此，旨在本公开涵盖落入所附权利要求和它们的等价物范围内的这样的修改和变化。本公开的其它目标、特征和方面在以下详细说明中公开或由以下详细说明显然。本领域普通技术人员理解，本发明的讨论仅为示例性实施方案的描述，并且不旨在限制本公开的更宽的方面。
本公开一般性涉及适合给予儿科受试者的营养组合物。另外，本公开涉及经由给予营养组合物，管理儿科受试者食物过敏症的症状和降低耐受获得的时间的方法。
本文使用的“过敏症”定义为"对正常耐受和通常认为无害的物质异常超灵敏度"。存在两个基本阶段涉及过敏应答。第一阶段涉及发展对过敏原的立即-类型的超灵敏度应答的早期阶段。第一次过敏原遇到免疫系统，不发生过敏反应。而是，免疫系统自身为将来与过敏原再次相遇作准备。巨噬细胞(其为清除细胞)围绕并破坏侵入的过敏原。巨噬细胞随后在它们的细胞壁上对T淋巴细胞呈递过敏原碎片，所诉T淋巴细胞是身体的免疫反应的主要协调者（orchestraters）。该认知信号加上若干非认知信号(例如，细胞因子)激活稚T-细胞，并且指导T-细胞分化成为T-细胞效应亚群。在过敏级联中关键的起作用者是Th-2表型(TH-2)的T-细胞。TH-2类型T-细胞表征为分泌若干细胞因子，包括白细胞介素-4 (IL-4)、IL-5和IL-13。细胞因子IL-4和IL-13随后激活B淋巴细胞，其产生亚类E (IgE)的抗体。IgE抗体直接针对特定的过敏原。在效应细胞(肥大细胞和嗜碱性粒细胞)的表面上的特定的IgE抗体与过敏原的相互作用触发所述立即类型超灵敏度应答的早期阶段。
该肥大细胞激活通常在第二次暴露于过敏原之后数分钟内发生。在敏化阶段期间构成的在肥大细胞上的IgE抗体识别过敏原，并且与侵入物结合。一旦过敏原与受体结合，肥大细胞中的颗粒释放它们的内含物。这些内含物或介导物为前炎性物质，例如组胺、血小板-激活因子、前列腺素、细胞因子和白细胞三烯。这些介导物实际上触发过敏症发作。组胺刺激粘液产生并且引起充血、肿胀和炎症。前列腺素收缩气道和扩大血管。
过敏免疫响应的第二阶段表征为在过敏原暴露后在气道中渗透炎性细胞，例如嗜酸性粒细胞。敏化和炎症之间重要的连接用分泌介导物的T-细胞表示，该介导物不仅涉及IgE合成，而且还引起嗜酸性粒细胞募集、激活和存活。组织肥大细胞和邻近的细胞产生化学信使，其信号循环嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞和其它细胞，以迁移至该组织并帮助抗击外来物质。嗜酸性粒细胞分泌它们自身的化学物质，其维持炎症，引起组织破坏和募集又更多的免疫细胞。该阶段可在过敏原暴露后的数小时和数天之间的任何地方发生，并且可持续数小时，甚至数天。
"营养组合物"指满足至少一部分受试者的营养需求的物质或制剂。术语"营养"、"营养配方"、"肠内营养"、"营养组合物"和"营养补充剂"在整个本公开中用作营养组合物的非限制性实例。此外，"营养组合物"指液体、粉末、凝胶、糊膏、固体、浓缩物、悬浮液，或即用形式的肠内配方、口服配方、婴儿配方、儿科受试者配方、儿童配方、成长乳和/或成人配方。
术语"肠内"指通过或在胃肠或消化道内可递送。“肠内给予”包括口服喂食、胃内喂食、经幽门给予或在消化道中的任何其它给予。“给予”比“肠内给予”更宽，并且包括肠胃外给予或将物质吸收入受试者的身体内的任何其它给予路径。
“儿科受试者”指不大于13岁的人。在一些实施方案中，儿科受试者指从出生到8岁之间的人受试者。在其它实施方案中，儿科受试者指1-6岁的人受试者。在再其它实施方案中，儿科受试者指6-12岁的人受试者。术语“儿科受试者”可指婴儿(早产或足月)和/或儿童，如以下描述的。
"婴儿"指年龄从出生到不大于一岁范围内的人受试者，并且包括0-12个月矫正年龄的婴儿。短语“矫正年龄”指婴儿的实足年龄减去婴儿过早出生的时间量。因此，如果婴儿足月生产，则矫正年龄就是其年龄。术语婴儿包括低出生重量婴儿、非常低出生重量婴儿、极低出生重量婴儿和早产婴儿。“早产”指在第37周妊娠结束前出生的婴儿。“晚早产”指第34周-第36周妊娠出生的婴儿。“足月”指在第37周妊娠结束后出生的婴儿。“低出生重量婴儿”指出生重量小于2500 g(约5 lbs，8盎司)的婴儿。“非常低出生重量婴儿”指出生重量小于1500 g(约3 lbs，4盎司)的婴儿。“极低出生重量婴儿”指出生重量小于1000 g(约2 lbs，3盎司)的婴儿。
"儿童"指年龄在12个月-13岁范围内的受试者。在一些实施方案中，儿童为年龄在1-12岁的受试者。在其它实施方案中，术语"儿童"或"儿童"指1-约6岁或约7-约12岁的受试者。在其它实施方案中，术语"儿童"或"儿童"指年龄在12个月-约13岁的任何范围。
"儿童的营养产品"指满足至少一部分儿童的营养需求的组合物。成长乳为儿童的营养产品的实例。
术语“水解度”指通过水解方法破坏肽键的程度。
术语“部分水解的”指具有大于0%但是小于约50%的水解度。
术语“充分水解的”指具有大于或等于约50%的水解度。
术语“不含蛋白质的”指含有不可测量量的蛋白质，其通过标准蛋白质检测方法测量，例如十二烷基(月桂基)硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)或尺寸排阻层析法。在一些实施方案中，营养组合物基本上不含蛋白质，其中“基本上不含”如以下定义。
"婴儿配方"指满足至少一部分婴儿的营养需求的组合物。在美国，婴儿配方的内含物由联邦规章规定，在21 C.F.R.第100、106和107部分中描述。这些规章限定大量营养元素、维生素、矿物质和其它成分水平，以努力模仿人母乳的营养和其它性质。
术语"成长乳"指宽泛种类的营养组合物，其旨在用作不同饮食的一部分，以支持年龄为约1-约6岁的儿童的正常生长和发育。
"营养完全"指可用作营养的唯一源的组合物，其可供应基本上所有每日所需量的维生素、矿物质和/或微量元素，与蛋白质、碳水化合物和脂质组合。实际上，"营养完全"描述提供足够量的支持受试者的正常生长和发育所需的碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件性必需氨基酸、维生素、矿物质和能量的营养组合物。
因此，通过定义，对于早产婴儿"营养完全"的营养组合物将提供早产婴儿生长所需的从品质上和数量上足够量的碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件性必需氨基酸、维生素、矿物质和能量。
通过定义，对于足月婴儿"营养完全"的营养组合物将提供足月婴儿生长所需的从品质上和数量上足够量的所有碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件性必需氨基酸、维生素、矿物质和能量。
通过定义，对于儿童"营养完全"的营养组合物将提供儿童生长所需的从品质上和数量上足够量的所有碳水化合物、脂质、必需脂肪酸、蛋白质、必需氨基酸、条件性必需氨基酸、维生素、矿物质和能量。
当应用于营养物时，术语"必需"指不能以足以正常生长和保持健康的量通过身体合成并因此必需通过饮食供应的任何营养物质。当应用于营养物时，术语"条件性必需的"指在身体不能得到足够量的前体化合物用于内源性合成发生的条件下必需通过饮食供应的营养物质。
“益生菌”指对宿主的健康发挥有益效果的具有低或无致病性的微生物。
术语“非存活的益生菌”指其中提及的益生菌的代谢活性或生殖能力已降低或破坏的益生菌。更具体而言，“非存活的”或“非存活的益生菌”指非活的益生菌微生物、它们的细胞组分和/或其代谢物。这样的非存活的益生菌可能已被加热杀灭或另外失活。然而，“非存活的益生菌”确实在细胞水平仍保留其细胞结构或与细胞关联的其它结构，例如外泌多糖和至少一部分其生物学乙二醇-蛋白质和DNA/RNA结构，因此保留有利地影响宿主健康的能力。反之亦然，术语“存活的”指活的微生物。本文使用的术语“非存活的”与“失活的”同义。
"益生元"指通过选择性刺激可改进宿主健康的消化道中的一种或有限数量的细菌的生长和/或活性，有益地影响宿主的非可消化的食物成分。
“极性脂质”为在所有活的有机体中出现的天然膜的主要组成。乳中的极性脂质(即，乳极性脂质)主要位于乳脂肪球膜(MFGM)。这是围绕脂肪小球的高度复杂的生物学膜，因此在乳的连续相中稳定乳。极性脂质也存在于乳以外的其它源，例如蛋、肉和植物。
极性脂质通常分为磷脂和鞘脂(包括神经节苷脂)，其为具有疏水尾和亲水头基的两亲分子。甘油磷脂由甘油骨架组成，在其上在位置sn-1和sn-2上两个脂肪酸被酯化。这些脂肪酸比乳的甘油三酯馏分更加不饱和。在第三个羟基上，可连接具有不同有机基团(胆碱、丝氨酸、乙醇胺等)的磷酸酯残基。总的来说，与在sn-2位置上的相比，在sn-1位置上的脂肪酸链更加饱和。溶血磷脂仅含有一个酰基，其主要位于sn-1位置。头基保持类似。鞘脂的特性结构单元为鞘氨基醇碱（sphingoid base），为含有两个或三个羟基的长链(12-22个碳原子)脂族胺。鞘氨醇(d18:1)，为在哺乳动物鞘脂中最普遍存在的鞘氨基醇碱，其含有18个碳原子，两个羟基和一个双键。当该鞘氨基醇碱的氨基与通常饱和脂肪酸连接时，形成神经酰胺。在该神经酰胺单元上，可结合有机磷酸酯基团以形成鞘磷脂(例如，在神经鞘磷脂的情况下，磷酸胆碱)或结合糖类以形成鞘糖脂(糖基神经酰胺)。单糖基神经酰胺(像糖基神经酰胺或半乳糖基神经酰胺)通常表示为脑苷脂，而具有末端半乳糖胺残基的三-和四糖基神经酰胺表示为红细胞糖苷酯。最后，神经节苷脂为高度复杂的寡糖基神经酰胺，除了葡萄糖、半乳糖和半乳糖胺以外，还含有一个或多个唾液酸基团。
"β-葡聚糖"指所有β-葡聚糖，包括β-葡聚糖的具体类型，例如β-1,3-葡聚糖和β-1,3;1,6-葡聚糖。此外，β-1,3;1,6-葡聚糖为β-1,3-葡聚糖的类型。因此，术语"β-1,3-葡聚糖"包括β-1,3;1,6-葡聚糖。
本文使用的“来自非人源的乳铁蛋白”指通过人母乳以外的源生产或得到的乳铁蛋白。例如，用于本公开的乳铁蛋白包括通过遗传修饰的生物体生产的人乳铁蛋白以及非人乳铁蛋白。本文使用的术语“有机体”指任何连续的有生命的系统，例如动物、植物、真菌或微生物。本文使用的术语“非人乳铁蛋白”指具有与人乳铁蛋白的氨基酸序列相比不同的氨基酸序列的乳铁蛋白。
本文使用的“非人乳铁蛋白”指具有与人乳铁蛋白的氨基酸序列相比不同的氨基酸序列的乳铁蛋白。
“调节”或“调节”指发挥修饰、控制和/或调节影响。在一些实施方案中，术语“调节”指对具体组分的水平/量呈现提高或刺激效果。在其它实施方案中，“调节”指对具体组分的水平/量呈现降低或抑制效果。
除非另外指定，否则本文使用的所有百分数、份和比率按总制剂的重量计。
指定为“每天”给予的所有量可在经24小时时间段给予的一个单位计量中，在单份或在两个或更多个剂量或份中递送。
本公开的营养组合物可基本上不含本文描述的任何任选的或选择的成分，条件是剩余的营养组合物仍含有本文描述的所有所需的成分或特征。在本上下文中，并且除非另外指定，否则术语“基本上不含”指选择的组合物可含有小于功能量的任选的成分，通常小于0.1%重量，并且还包括0%重量的这样的任选的或选择的成分。
除非另外指定，或作出提及的上下文明确暗示相反的情况，否则对本公开的单数特性或限制的所有提及应包括相应的复数特性或限制，反之亦然。
除非另外指定，或作出提及的组合的上下文明确暗示相反的情况，否则本文使用的方法或过程步骤的所有组合可采用任何顺序实施。
本公开的方法和组合物(包括其组分)可包含本文描述的实施方案的基本要素和限制以及本文描述的或另外可用于营养组合物的任何另外的或任选的成分、组分或限制，由其或基本上由其组成。
本文使用的术语"约"应解释为指指定为任何范围的端点的两个数字。对范围的任何提及应认为对在该范围内的任何子集提供支持。
本公开涉及包含非乳品蛋白质和至少一种益生菌的营养组合物、其用途和包括给予那些营养组合物的方法。本公开的营养组合物促进管理儿科人受试者(例如婴儿(早产和/或足月)或儿童)的食物过敏症症状和降低耐受获得的时间。
如所述的，本公开的营养组合物可包含至少一种非乳品蛋白质源。非乳品蛋白质源可为植物蛋白质，例如大豆、豌豆、稻米、马铃薯、杏仁、苋菜、奎藜籽(quinoa)或椰子蛋白质或它们的组合。在某些其它实施方案中，非乳品蛋白质源可为藻类蛋白质或肉类蛋白质，例如水解的鸡肉，用于替代前述植物蛋白质或添加入前述植物蛋白质。在一些实施方案中，营养组合物包含至多约7 g/100 kcal的蛋白质源；在其它实施方案中，组合物包括约1 g-约5 g的蛋白质源/100 kcal。在某些其它实施方案中，营养组合物包含约3.5 g-约4.5 g的蛋白质/100 kcal。除了管理CMA以外，包括这样的非乳品蛋白质可能对于营养、味道、加工和宗教原因是有利的。
此外，蛋白质可为完整的或者其可为水解的蛋白质，尤其是在大豆、豌豆或稻米蛋白的情况下。因此，在一些实施方案中，营养组合物的蛋白质作为完整的蛋白质提供。在其它实施方案中，蛋白质作为完整的蛋白质和水解的蛋白质二者的组合提供。在某些实施方案中，蛋白质可为部分水解的或充分水解的。水解的蛋白质可用酶处理，以破坏一些或大多数引起不利症状的蛋白质，目标是降低过敏反应、不耐受和敏化。此外，蛋白质可通过本领域已知的任何方法水解。
术语“蛋白质水解产物”或“水解的蛋白质”在本文中可互换使用，并且指水解的蛋白质，其中水解度可为约1%-约95%，或约30%-约80%，或甚至约40%-约60%。水解度为肽键通过水解方法被破坏的程度。就表征营养组合物的水解的蛋白质组分的目的，蛋白质水解的程度容易由制剂领域普通技术人员测定，通过定量选择的制剂的蛋白质组分的氨基氮与总氮比率(AN/TN)。氨基氮组分通过用于测定氨基氮含量的USP滴定方法定量，而总氮组分通过Kjeldahl方法测定，所述方法均为分析化学领域普通技术人员公知的方法。
当蛋白质中的肽键通过酶水解破坏时，对于每一个破坏的肽键，释放一个氨基，这引起提高氨基氮。应注意到，甚至非水解的蛋白质将含有一些暴露的氨基。水解的蛋白质将还具有与形成它们的非水解的蛋白质不同的分子量分布。水解的蛋白质的功能和营养性质可受到不同尺寸肽的影响。分子量特性通常通过列举具体范围的分子量(以道尔顿计)馏分(例如，2,000-5,000道尔顿，大于5,000道尔顿)的重量百分数而给出。
在一些实施方案中，本公开的营养组合物基本上不含完整的蛋白质。根据本公开的营养组合物基本上不含完整的蛋白质的程度通过2000年8月American Academy of Pediatrics的政策声明来测定，其中低过敏原配方定义为在适当的临床研究中证明其不在90%的具有证实的牛乳过敏症的婴儿或儿童中引起反应的配方，当在前瞻性随机、双盲、安慰剂-对照试验中给出时，具有95%置信度。
在一个具体的实施方案中，营养组合物还含有游离氨基酸作为蛋白质等价物源。在该实施方案中，氨基酸可包含但不限于组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、苏氨酸、色氨酸、缬氨酸、丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、脯氨酸、丝氨酸、肉碱、牛磺酸和它们的混合物。在一些实施方案中，氨基酸可为支链氨基酸。在其它实施方案中，可包括小的氨基酸肽作为营养组合物的蛋白质组分。这样的小的氨基酸肽可为天然存在的或合成的。在营养组合物中游离氨基酸的量可在约1-约5 g/100 kcal变化。在一种实施方案中，100%的游离氨基酸具有小于500道尔顿的分子量。
本公开的营养组合物还包括至少一种益生菌；在一种优选的实施方案中，益生菌包含LGG。在某些其它实施方案中，益生菌可选自任何其它乳酸杆菌物类、双歧杆菌物类、长双歧杆菌BB536(Bifidobacterium longum BB536) (BL999，ATCC：BAA-999)、长双歧杆菌AH1206(Bifidobacterium longum AH1206) (NCIMB：41382)、短双歧杆菌AH1205(Bifidobacterium breve AH1205) (NCIMB：41387)、婴儿双歧杆菌35624(Bifidobacterium infantis 35624 ) (NCIMB：41003)和乳酸双歧杆菌动物亚物类BΒ-12(Bifidobacterium animalis subsp. lactis BΒ-12) (DSM No. 10140)或它们的任何组合。
益生菌的量可在约1×104-约1.5×1012 cfu的益生菌/100 kcal变化。在一些实施方案中，益生菌的量可为约1×106-约1×109 cfu的益生菌/100 kcal。在某些其它实施方案中，益生菌的量可在约1×107 cfu/100 kcal-约1×108 cfu的益生菌/100 kcal变化。
如所述的，在一种优选的实施方案中，益生菌包含LGG。LGG为从健康的人肠菌群分离的益生菌菌株。其在Gorbach等人的美国专利5,032,399中报道过，该专利通过引用而全文结合到本文中。LGG耐大多数抗生素，在酸和胆汁存在下稳定，并且热衷地（avidly）附着到人肠道的粘膜细胞上。其在大多数个体中存活1-3天，在30%的受试者中存活多至7天。除了其集群能力以外，LGG还有益地影响粘膜免疫响应。LGG在登记号ATCC 53103下，由American Type Culture Collection (“ATCC”)保管机构存放。
在一种实施方案中，益生菌可为存活的或非存活的。可用于本公开的益生菌可为天然存在的、合成的或通过生物体的遗传操纵而发展的，无论这种源是现在已知或后来开发的。
在一些实施方案中，营养组合物可包括包含益生菌细胞等价物的源，所述细胞等价物指与相同数量的存活的细胞等价的非存活的、非复制益生菌的水平。术语“非复制”理解为由相同量的复制细菌得到的一定量的非复制微生物(cfu/g)，包括失活的益生菌、DNA的碎片、细胞壁或胞浆化合物。换言之，没有生命的、非复制生物体的量关于cfu表述，就好像所有微生物是活的，无论它们是死的、非复制、失活的、破碎的等。在非存活的益生菌包括在营养组合物中时，益生菌细胞等价物的量可在约1×104-约1.5×1010益生菌的细胞等价物/100 kcal内变化。在一些实施方案中，益生菌细胞等价物的量可为约1×106-约1×109益生菌的细胞等价物/100 kcal 营养组合物。在某些其它实施方案中中，益生菌细胞等价物的量可在约1×107-约1×108益生菌的细胞等价物/100 kcal的营养组合物内变化。
在一些实施方案中，掺入到营养组合物中的益生菌源可包含存活的集落形成单元和非存活的细胞-等价物二者。
在一些实施方案中，营养组合物包括来自益生菌分批-培养过程的晚期指数生长阶段的培养物上清液。不希望束缚于理论，我们认为培养物上清液的活性可归因于在益生菌的分批培养的指数(或“log”)阶段的往期阶段，在培养基中释放的发现的组分(包括蛋白质材料，并且可能包括(胞外)多糖材料)的混合物。本文使用的术语“培养物上清液”包括在培养基中发现的组分的混合物。在细菌的分批培养中公认的阶段为技术人员已知的。这些为“停滞”、“log” (“对数”或“指数”)、“稳定”和“死亡” (或“对数下降”)阶段。在期间存在活的细菌的所有阶段，细菌代谢来自培养基的营养物，并且在培养基中分泌(发挥，释放)材料。在生长阶段的给定时间点，分泌物质的组成通常不可预测。
在一种实施方案中，通过包括以下步骤的过程可得到培养物上清液：(a) 使用分批过程，在合适的培养基中使益生菌(例如LGG)经历培养；(b) 在培养步骤的晚期指数生长阶段，收获培养物上清液，该阶段参考分批-培养过程的停滞阶段和稳定阶段之间的时间后一半来定义；(c) 任选从上清液除去低分子量组成，以保留超过5-6千道尔顿(kDa)的分子量组成；(d) 从培养物上清液除去液体内含物，以得到组合物。
培养物上清液可包含由晚期指数阶段收获的分泌物质。在中期指数阶段之后及时发生晚期指数阶段(其为指数阶段的持续时间的一半时间，因此，晚期指数阶段是指在停滞阶段和稳定阶段之间的时间的后一半)。特别是，术语“晚期指数阶段”在本文用于指在LGG分批-培养过程的停滞阶段和稳定阶段之间的时间的后四分之一部分。在一些实施方案中，在指数阶段的持续时间的75%-85%的时间点收获培养物上清液，并且可当指数阶段逝去约5/6的时间时进行收获。
不束缚于任何理论，认为非乳品蛋白质和益生菌(尤其是LGG)的所公开的组合提供较高的潜能使患有过敏症的婴儿和儿童带到正常饮食，快速管理CMA表现形式，以改进湿疹和遗传性过敏症皮炎得分，其益处是降低胃肠症状和改善发炎的结肠粘膜的恢复，并且可加速受CMA影响的婴儿的耐受获得的发展。此外，我们认为存在将类似益处扩展至为具有大豆蛋白、花生、树坚果、小麦、玉米或稻米蛋白过敏症的婴儿和儿童提供改进的耐受获得的可能性。
认为在所公开的营养组合物中营养物的独特的组合能为婴儿和儿童提供新的和意想不到的益处。此外，认为该营养组合物的益处在婴儿期期间获得，并且当儿童及其脑继续成长和发育时，也通过包括其作为多种饮食的一部分而获得。
在某些实施方案中，本公开的营养组合物还可包括脂肪或脂质源。合适的脂肪或脂质源可为本领域中任何已知的或使用的，包括但不限于，动物源，例如，乳脂肪、黄油、黄油脂肪、蛋黄脂质；海洋源，例如鱼油、海洋油、单细胞油；植物和植物油，例如玉米油、低芥酸菜子油、葵花油、大豆油、棕榈油精油、椰油、高油酸葵花油、月见草油、油菜籽油、橄榄油、亚麻子(亚麻子)油、棉籽油、高油酸红花油、棕榈硬脂酸甘油酯、棕榈仁油、小麦胚芽油；中链甘油三酯油和脂肪酸的乳液和酯；和它们的任何组合。在一个具体的实施方案中，脂肪或脂质源包含相对同等份数的棕榈油、葵花油和红花油的混合物。
在某些实施方案中，通过使用富含SDA的植物油，尤其是富含SDA的蔬菜油，脂肪或脂质源提供十八碳四烯酸(“SDA)”和/或γ-亚麻酸(“GLA”)。总的来说，使用SDA富集植物油可通过多种方法的任一种来完成，包括通过遗传修饰油的植物-源。例如，由Monsanto Co.与The Solae Co.开发的SDA-和GLA-富集的大豆油通过引入编码蛋白质的两种去饱和酶基因(Primula juliae Δ6去饱和酶和Neurospora crassa Δ15去饱和酶)而生产。大豆缺乏Δ6去饱和酶，在大豆中产生SDA的最低要求是引入编码Δ6去饱和酶的基因。然而，Δ6去饱和酶还可导致产生GLA。加入具有与Δ6去饱和酶的临时表达类似的Δ15去饱和酶提高ALA到SDA的通量。Δ15去饱和酶还降低GLA产生的底物池。
脂肪或脂质源存在于营养组合物中，其量为至多约7 g/100 kcal；在实施方案中，脂肪或脂质源以约3 g/100 kcal-约7 g/100 kcal存在。当补充SDA-富集的植物油时，脂肪或脂质源包含至少约0.25 g/100 kcal，更优选约0.3 g/100 kcal-约.7 g/100 kcal的富含十八碳四烯酸的植物油，例如SDA-富集的大豆油。
在一些实施方案中，脂肪或脂质源包含极性脂质，以约0.5 mg/100 kcal-约470 mg/ 100 kcal的水平存在于营养组合物中；在一些实施方案中，极性脂质以约10 mg/100 kcal-约350 mg/ 100 kcal的水平存在；在又其它实施方案中，极性脂质以约20 mg/100 kcal-约260 mg/ 100 kcal的水平存在于营养组合物中。在某些实施方案中，极性脂质包含乳极性脂质。
在一些实施方案中，极性脂质包含神经节苷脂和磷脂，其中神经节苷脂以约0.5 mg/100 kcal-约18 mg/100 kcal的水平存在，而磷脂以约10 mg/100 kcal-约450 mg/100 kcal的水平存在。在另一个实施方案中，神经节苷脂以1 mg/100 kcal-约9 mg/100 kcal存在，而磷脂以约20 mg/100 kcal-约250mg/100 kcal存在。
神经节苷脂和磷脂的水平对于更具体年龄的受试者婴儿或儿童可为关键的。例如，对于婴儿，神经节苷脂可以约0.5 mg/100 kcal-约12mg/100 kcal的水平存在，更优选约1 mg/100 kcal-约9 mg/100 kcal，而磷脂可以约20 mg/100 kcal-约250 mg/100 kcal的水平存在，更优选约20 mg/100 kcal-约50 mg/100 kcal。对于儿童，神经节苷脂可以约1 mg/100 kcal-约18 mg/100 kcal的水平存在，更优选约1.5 mg/100 kcal-约12 mg/100 kcal，而磷脂可以约20 mg/100 kcal-约450 mg/100 kcal的水平存在，更优选约20 mg/100 kcal-约250 mg/100 kcal。
在一些实施方案中，营养组合物包含至少一种碳水化合物源。碳水化合物源可为本领域使用的任何碳水化合物源，例如，乳糖、葡萄糖、果糖、玉米糖浆固体、麦芽糖糊精、蔗糖、淀粉、稻米糖浆固体等。在营养组合物中碳水化合物组分的量通常可在约5 g-约25 g/100 kcal之间变化。在一些实施方案中，碳水化合物的量为约6 g-约22 g/ 100 kcal。在其它实施方案中，碳水化合物的量为约12 g-约14 g/100 kcal。在一些实施方案中，优选玉米糖浆固体；在其它实施方案中，优选麦芽糖糊精。此外，由于它们容易消化性，可期望将水解的、部分水解的和/或充分水解的碳水化合物包括在营养组合物中。特别是，水解的碳水化合物不那么可能含有过敏原表位。
适合于本文使用的碳水化合物材料的非限制性实例包括蜡状或非蜡状形式的源自玉米、木薯淀粉、稻米或马铃薯的水解的或完整的、天然或化学改性的淀粉。合适的碳水化合物的非限制性实例包括各种水解的淀粉(其特征为水解的玉米淀粉)、麦芽糖糊精、麦芽糖、玉米糖浆、葡萄糖、玉米糖浆固体、葡萄糖和各种其它葡萄糖聚合物和它们的组合。其它合适的碳水化合物的非限制性实例包括通常称为蔗糖、乳糖、果糖、高果糖玉米糖浆、可消化的寡糖(例如果糖寡糖)和它们的组合的那些。
在一个具体的实施方案中，营养组合物的碳水化合物组分包含100%乳糖。在另一个实施方案中，碳水化合物组分包含约0%-60%乳糖。在另一个实施方案中，碳水化合物组分包含约15%-55%乳糖。在又一个实施方案中，碳水化合物组分包含约20%-30%乳糖。在这些实施方案中，碳水化合物的剩余源可为本领域已知的任何碳水化合物。
在某些实施方案中，营养组合物还可含有一种或多种益生元(其也称为益生元组分)。益生元发挥健康益处，其可包括但不限于选择性刺激一种或有限数量种有益肠细菌的生长和/或活性，刺激摄取的益生菌微生物的生长和/或活性，选择性降低肠病原体，和对肠短链脂肪酸分布型有利的影响。这样的益生元可为天然存在的、合成的或通过生物体和/或植物的遗传操纵发展的，无论这样的新源是现在已知或后来开发的。可用于本公开的益生元可包括寡糖、多糖和含有果糖、木糖、大豆、半乳糖、葡萄糖和甘露糖的其它益生元。
更具体而言，可用于本公开的益生元可包括聚葡萄糖、聚葡萄糖粉末、乳果糖、乳蔗糖、棉子糖、葡寡糖、菊粉、果寡糖、异麦芽寡糖、大豆寡糖、乳蔗糖、木寡糖、壳寡糖、甘露寡糖、aribino-寡糖、唾液酸寡糖、岩藻寡糖、半乳寡糖和龙胆寡糖。
在一种实施方案中，存在于营养组合物中的益生元的总量可为约1.0 g/L-约10.0 g/L的组合物。更优选，存在于营养组合物中的益生元的总量可为约2.0 g/L-约8.0 g/L的组合物。在一些实施方案中，存在于营养组合物中的益生元的总量可为约0.01 g/100 kcal-约1.5 g/100 kcal。在某些实施方案中，存在于营养组合物中的益生元的总量可为约0.3 g/100 kcal-约0.7 g/100 kcal。此外，营养组合物可包含含有PDX的益生元组分。在一些实施方案中，益生元组分包含至少20% w/w PDX、GOS或它们的混合物。
如果PDX用于益生元组合物，在一种实施方案中，在营养组合物中PDX的量可在约0.01 g/100 kcal-约1.5 g/100 kcal的范围内。在另一个实施方案中，聚葡萄糖的量在约0.2 g/100 kcal-约0.6 g/100 kcal范围内。在一些实施方案中，PDX可以足以提供约1.0 g/L-10.0 g/L的量包括在营养组合物中。在另一个实施方案中，营养组合物含有约2.0 g/L-8.0 g/L量的PDX。在再其它实施方案中，在营养组合物中PDX的量可为约0.05 g/100 kcal-约1.5 g/100 kcal。
在其它实施方案中，益生元组分可包含GOS。如果GOS用于益生元组合物，在一种实施方案中，在营养组合物中GOS的量可为约0.015 g/100 kcal-约1.0 g/100 kcal。在另一个实施方案中，在营养组合物中GOS的量可为约0.2 g/100 kcal-约0.5 g/100 kcal。
在本发明的一个具体的实施方案中，PDX与GOS组合给予。
在一个具体的实施方案中，将GOS和PDX补充到营养组合物中，总量为约0.015 g/100 kcal-约1.5 mg/100 kcal。在一些实施方案中，营养组合物可包含GOS和PDX，总量为约0.6-约0.8 mg/100 kcal。
在一些实施方案中，本公开的营养组合物还可含有LCPUFA的源；尤其是包含二十二碳六烯酸的LCPUFA的源。其它合适的LCPUFA包括但不限于α-亚油酸、γ-亚油酸、亚油酸、亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)和花生四烯酸(ARA)。
在一种实施方案中，尤其是如果营养组合物为婴儿配方，营养组合物补充DHA和ARA二者。在该实施方案中，ARA:DHA的重量比可为约1:3-约9:1。在一个具体的实施方案中，ARA:DHA的比率为约1:2-约4:1。
在营养组合物中，长链多不饱和脂肪酸的量有利地为至少约5 mg/100 kcal，并且可在约5 mg/100 kcal-约100 mg/100 kcal变化，更优选约10 mg/100 kcal-约50 mg/100 kcal变化。
使用本领域已知的标准技术，营养组合物可补充含有DHA和/或ARA的油。例如，通过代替通常存在于组合物中的等量的油，例如高油酸葵花油，可将DHA和ARA加入到组合物中。作为另一个实例，通过代替通常存在于不含DHA和ARA的组合物中的总脂肪共混物的等量的其余部分，可将含有DHA和ARA的油加入到组合物中。
如果使用，DHA和/或ARA的源可为本领域已知的任何源，例如海洋油、鱼油、单细胞油、蛋黄脂质和脑脂质。在一些实施方案中，DHA和ARA源自单细胞Martek油、DHASCO®和ARASCO®，或其变体。DHA和ARA可为天然形式，条件是LCPUFA源的其余部分不对婴儿导致任何实质有害效果。或者，DHA和ARA可以精炼的形式使用。
在一种实施方案中，DHA和ARA的源为在美国专利号5,374,567；5,550,156；和5,397,591中教导的单细胞油，它们通过引用而全文结合到本文中。然而，本公开不局限于仅这样的油。
虽然避免包括哺乳动物蛋白质，尤其是乳品蛋白质，但是在一些实施方案中，可期望在本公开的营养组合物中包括乳铁蛋白。乳铁蛋白为含有1-4个聚糖的约80 kD的单链多肽，这取决于种类。不同种类的乳铁蛋白的3-D结构非常类似，但是不相同。每一个乳铁蛋白包含两个同类型的叶（lobes），称为N-和C-叶，其分别指分子的N-末端和C-末端部分。每一个叶进一步由两个亚叶或结构域组成，它们形成裂口，其中三价铁离子(Fe3+)与(双)碳酸根阴离子协同合作紧密结合。这些结构域分别称为N1、N2、C1和C2。乳铁蛋白的N-末端具有负责多个重要的结合特性的强阳离子肽区域。乳铁蛋白具有非常高的等电点(~pI 9)，并且其阳离子性质在其能防御细菌、病毒和真菌病原体中起到主要作用。在乳铁蛋白的N-末端区域内存在若干介导乳铁蛋白抗广泛种类的微生物的生物学活性的阳离子氨基酸残基的簇。例如，人乳铁蛋白的N-末端残基1-47 (牛乳铁蛋白的1-48)对于乳铁蛋白的铁-独立性生物学活性是关键的。在人乳铁蛋白中，残基2-5 (RRRR)和28-31 (RKVR)为在N-末端中富含精氨酸的阳离子结构域，其对于乳铁蛋白的抗微生物活性尤其关键。在N-末端中的类似区域存在于牛乳铁蛋白中 (残基17-42；FKCRRWQWRMKKLGAPSITCVRRAFA)。
如在出版物Biochemistry and Cell Biology，第275-281页(2006)中出现的“对在乳铁蛋白和细菌之间的相互作用的看法”所描述的，来自不同宿主种类的乳铁蛋白可在它们的氨基酸序列不同，但是通常具有相对高的等电点，其在内部叶的末端区域具有带正电荷的氨基酸。用于本公开的合适的非人乳铁蛋白包括但不限于与人乳铁蛋白的氨基酸序列具有至少48%同源性的那些。例如，牛乳铁蛋白(“bLF”)具有与人乳铁蛋白具有约70%序列同源性的氨基酸组成。在一些实施方案中，非人乳铁蛋白与人乳铁蛋白具有至少55%同源性，在一些实施方案中，至少65%同源性。可接受用于本公开的非人乳铁蛋白包括但不限于bLF、猪乳铁蛋白、马乳铁蛋白、水牛乳铁蛋白、山羊乳铁蛋白、鼠乳铁蛋白和骆驼乳铁蛋白。
在一种实施方案中，乳铁蛋白以至少约15 mg/100 kCal的量存在于营养组合物中。在某些实施方案中，营养组合物可包括约15-约300 mg乳铁蛋白/100 kCal。在另一个实施方案中，当营养组合物为婴儿配方时，营养组合物可包含约60 mg-约150 mg乳铁蛋白/100 kCal量的乳铁蛋白；在又一个实施方案中，营养组合物可包含约60 mg-约100 mg乳铁蛋白/100 kCal。
在一些实施方案中，营养组合物可包括约0.5 mg-约1.5 mg/mL配方量的乳铁蛋白。在代替人乳的营养组合物中，乳铁蛋白可以约0.6 mg-约1.3 mg/mL配方的量存在。在某些实施方案中，营养组合物可包含约0.1-约2 g乳铁蛋白/L。在一些实施方案中，营养组合物包括约0.6-约1.5 g乳铁蛋白/L配方。
用于某些实施方案的bLF可为从全乳分离的和/或具有低体细胞计数的任何bLF，其中“低体细胞计数”指体细胞计数小于200,000个细胞/mL。通过举例，合适的bLF可得自新西兰Morrinsville的Tatua Co-operative Dairy Co. Ltd.、得自荷兰Amersfoort的FrieslandCampina Domo或得自新西兰Auckland的Fonterra Co-Operative Group Limited。
用于本公开的乳铁蛋白可例如由非人动物的乳分离或通过遗传修饰的生物体生产。例如，在美国专利号4,791,193中(其通过引用而全文结合到本文中)，Okonogi等人公开了一种用于生产高纯度牛乳铁蛋白的方法。总的来说，所公开的方法包括三个步骤。原料乳材料首先与弱酸性阳离子交换剂接触以吸收乳铁蛋白，接着第二步骤，其中进行洗涤，以除去未吸收的物质。接着脱附步骤，其中除去乳铁蛋白，以生产纯化的牛乳铁蛋白。其它方法可包括如在美国专利号7,368,141、5,849,885、5,919,913和5,861,491中描述的步骤，它们均通过引用而全文结合到本文中。
在某些实施方案中，用于本公开的乳铁蛋白可通过膨胀床吸收(“EBA”)过程提供，所述膨胀床吸收(“EBA”)过程用于从乳源分离蛋白质。EBA，有时也称为稳定的流化床吸附，为用于从乳源分离乳蛋白质(例如乳铁蛋白)的过程，包括建立包含颗粒基质的膨胀床吸附柱，将乳源施用于基质，和用包含约0.3-约2.0 M氯化钠的洗脱缓冲液从基质洗脱乳铁蛋白。任何哺乳动物乳源可用于本发明的过程，但是，在具体实施方案中，乳源为牛乳源。在一些实施方案中，乳源包含全脂乳、低脂乳、脱脂乳、乳清、酪蛋白或它们的混合物。
在具体实施方案中，目标蛋白质为乳铁蛋白，但是也可分离其它乳蛋白质，例如乳过氧化物酶或乳白蛋白。在一些实施方案中，过程包括以下步骤：建立包含颗粒基质的膨胀床吸附柱，将乳源施用于基质，和使用约0.3-约2.0M氯化钠从基质洗脱乳铁蛋白。在其它实施方案中，用约0.5-约1.0 M氯化钠洗脱乳铁蛋白，而在其它实施方案中，用约0.7-约0.9 M氯化钠洗脱乳铁蛋白。
膨胀床吸附柱可为本领域任何已知的，例如在美国专利号7,812,138、6,620,326和6,977,046中描述的那些，所述专利的公开内容通过引用结合到本文中。在一些实施方案中，以膨胀模式将乳源施用于柱，以膨胀或填充模式实施洗脱。在具体实施方案中，以膨胀模式实施洗脱。例如，在膨胀模式中膨胀比可为约1-约3，或约1.3-约1.7。EBA技术在国际公布的申请号WO 92/00799、WO 02/18237、WO 97/17132中进一步描述，它们通过引用结合而全文到本文中。
乳铁蛋白的等电点为约8.9。分离乳铁蛋白的先有的EBA方法使用200 mM氢氧化钠作为洗脱缓冲液。因此，系统的pH升高至超过12，并且乳铁蛋白的结构和生物活性可因不可逆的结构变化而收损（Thus, the pH of the system rises to over 12, and the structure and bioactivity may be comprised, by irreversible structural changes）。现已发现氯化钠溶液可用作从EBA基质分离乳铁蛋白中洗脱缓冲液。在某些实施方案中，氯化钠具有约0.3 M-约2.0 M的浓度。在其它实施方案中，乳铁蛋白洗脱缓冲液具有约0.3 M-约1.5 M或约0.5 M-约1.0 M的氯化钠浓度。
在其它实施方案中，用于本公开的组合物的乳铁蛋白可通过使用径向层析法或带电荷的膜来分离，这将是技术人员熟悉的。
在一些实施方案中，营养组合物还包含唾液酸。唾液酸为超过50个成员的9-碳糖的家族，均为神经氨基酸的衍生物。在人中发现的主要的唾液酸家族来自N-乙酰神经氨酸亚家族。唾液酸在乳(例如牛和羊)中存在。在哺乳动物中，与其它体细胞膜相比，神经元细胞膜具有最高浓度的唾液酸。唾液酸残基也是神经节苷脂的组分。
如果包括在营养组合物中，唾液酸可以约0.5 mg/100 kcals-约45 mg/100 kcal的量存在。在一些实施方案中，唾液酸可以约5 mg/100 kcals-约30 mg/100 kcals的量存在。在再其它实施方案中，唾液酸可以约10 mg/100 kcals-约25 mg/100 kcals的量存在。
如所述的，所公开的营养组合物可包含β-葡聚糖的源。葡聚糖为多糖，特别是葡萄糖的聚合物，其为天然存在的，并且可在细菌、酵母、真菌和植物的细胞壁中发现。β葡聚糖(β-葡聚糖)本身为葡萄糖聚合物的各种子集，其由经由β-类型糖苷键连接在一起的葡萄糖单体的链组成，以形成复杂的碳水化合物。
β-1,3-葡聚糖为由例如酵母、蘑菇、细菌、藻类或谷类植物纯化的碳水化合物聚合物。(Stone BA，Clarke AE. Chemistry and Biology of (1-3)-Beta-Glucans ((1-3)-β-葡聚糖的化学和生物学)。London:Portland Press Ltd；1993.)。β-1,3-葡聚糖的化学结构取决于β-1,3-葡聚糖的源。此外，各种物理化学参数(例如溶解度、主要结构、分子量和分支)在β-1,3-葡聚糖的生物学活性中起作用。(Yadomae T.，Structure and biological activities of fungal beta-1,3-glucans (真菌β-1,3-葡聚糖的结构和生物学活性)。Yakugaku Zasshi。2000;120:413-431)。
β-1,3-葡聚糖为天然存在的多糖，具有或不具有在多种植物、酵母、真菌和细菌的细胞壁中发现的β-1,6-葡萄糖侧链。β-1,3;1,6-葡聚糖为含有(1,3)连接的葡萄糖单元的那些，其具有在(1,6)位置连接的侧链。β-1,3;1,6葡聚糖为共享结构共性的一组非均质葡萄糖聚合物，包括通过β-1,3键连接的直链葡萄糖单元的主链，其具有从该主链延伸的β-1,6-连接的葡萄糖支链。虽然这是目前描述类别的β-葡聚糖的基本结构，但是可存在一些变化。例如，某些酵母β-葡聚糖具有从β(1,6)支链延伸出的β(1,3)分支的另外的区域，这为它们的相应的结构增加进一步的复杂性。
衍生自面包酵母(啤酒酵母（Saccharomyes cerevisiae）)的β-葡聚糖由在1位和3位连接的D-葡萄糖分子的链组成，其具有在1位和6位连接的葡萄糖的侧链。酵母-衍生的β-葡聚糖为不溶性、纤维状、复杂糖，其具有直链葡萄糖单元的通用结构，其中β-1,3 主链散布有通常6-8个葡萄糖单元长度的β-1,6侧链。更具体而言，衍生自面包酵母的β-葡聚糖为聚-(1,6)-β-D-吡喃葡萄糖基-(1,3)-β-D-吡喃葡萄糖。
此外，β-葡聚糖为耐受良好的，并且不产生或引起儿科受试者额外的气体、腹胀、胃气胀或腹泻。通过提高针对侵袭的病原体的抗性，向儿科受试者的营养组合物(例如婴儿配方、成长乳或另一种儿童的营养产品)加入β-葡聚糖将改进受试者的免疫响应，因此保持或改进总体健康。
在一些实施方案中，β-葡聚糖为β-1,3;1,6-葡聚糖。在一些实施方案中，β-1,3;1,6-葡聚糖衍生自面包酵母。营养组合物可包含全部葡聚糖颗粒β-葡聚糖、颗粒β-葡聚糖、PGG-葡聚糖(聚-1,6-β-D-吡喃葡萄糖基-1,3-β-D-吡喃葡萄糖)或它们的任何混合物。
在一些实施方案中，存在于组合物中的β-葡聚糖的量为约0.010-约0.080 g/100g的组合物。在其它实施方案中，营养组合物包含约10-约30 mg β-葡聚糖/份。在另一个实施方案中，营养组合物包含约5-约30 mg β-葡聚糖/8 液量盎司(236.6 mL)份。在其它实施方案中，营养组合物包含足以提供约15 mg-约90 mg β-葡聚糖/天的量的β-葡聚糖。营养组合物可在多个剂量中递送，以达到在一整天将目标量的β-葡聚糖递送至受试者。
在一些实施方案中，在营养组合物中β-葡聚糖的量为约3 mg-约17 mg/100 kcal。在另一个实施方案中，β-葡聚糖的量为约6 mg-约17 mg/100 kcal。
还可以足以供应受试者的每日营养需求的量将一种或多种维生素和/或矿物质加入到营养组合物。本领域普通技术人员会理解，维生素和矿物质需求将例如基于儿童的年龄而变。例如，婴儿可具有与年龄为1-13岁的儿童相比不同的维生素和矿物质需求。因此，实施方案不旨在限制营养组合物于具体的年龄组，而是用于提供可接受的维生素和矿物质组分的范围。
营养组合物可任选包括但不限于一种或多种以下维生素或其衍生物：维生素B1 (硫胺素、硫胺素焦磷酸酯、TPP、硫胺素三磷酸酯、TTP、盐酸硫胺素、硫胺素单硝酸酯)、维生素B2 (核黄素、黄素单核苷酸、FMN、黄素腺嘌呤二核苷酸、FAD、乳黄素、卵黄素)、维生素B3 (烟酸、尼克酸、烟酰胺、尼克酰胺、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸、NAD、烟酸单核苷酸、NicMN、吡啶-3-甲酸)、维生素B3-前体色氨酸、维生素B6 (吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺、盐酸吡哆醇)、泛酸 (泛酸盐、泛醇)、叶酸（folate） (叶酸(folic acid)、叶酸(folacin)、蝶酰谷氨酸)、维生素B12 (钴胺素、甲基钴胺素、脱氧腺苷钴胺素、氰基钴胺素、羟基钴胺素、腺苷钴胺素)、生物素、维生素C (抗坏血酸)、维生素A (视黄醇、乙酸视黄酯、棕榈酸视黄酯、与其它长链脂肪酸形成的视黄基酯、视黄醛、视黄酸、视黄醇酯)、维生素D (钙化醇、胆钙化醇、维生素D3、1,25,-二羟基维生素D)、维生素E (α-生育酚、α-生育酚乙酸酯、α-生育酚琥珀酸酯、α-生育酚烟酸酯、α-生育酚)、维生素K (维生素K1、叶绿醌、萘醌、维生素K2、甲萘醌-7、维生素K3、甲萘醌-4、2-甲基-1,4萘醌（menadione）、甲萘醌-8、甲萘醌-8H、甲萘醌-9、甲萘醌-9H、甲萘醌-10、甲萘醌-11、甲萘醌-12、甲萘醌-13)、胆碱、肌醇、β-胡萝卜素和它们的任何组合。
此外，营养组合物可任选包括但不限于一种或多种以下矿物质或其衍生物：硼、钙、乙酸钙、葡糖酸钙、氯化钙、乳酸钙、磷酸钙、硫酸钙、氯化物、铬、氯化铬、吡啶甲酸铬、铜、硫酸铜、葡糖酸铜、硫酸铜、氟化物、铁、羰基铁、三价铁、富马酸亚铁、正磷酸铁、硫酸亚铁、多糖铁、碘化物、碘、镁、碳酸镁、氢氧化镁、氧化镁、硬脂酸镁、硫酸镁、锰、钼、磷、钾、磷酸钾、碘化钾、氯化钾、乙酸钾、硒、硫、钠、多库酯钠、氯化钠、硒酸钠、钼酸钠、锌、氧化锌、硫酸锌和它们的混合物。矿物质化合物的非限制性示例性衍生物包括任何矿物质化合物的盐、碱性盐、酯和螯合物。
可将矿物质以盐形式加入到营养组合物中，例如磷酸钙、甘油磷酸钙、柠檬酸钠、氯化钾、磷酸钾、磷酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸铜、硫酸锰和亚硒酸钠。可加入另外的维生素和矿物质，如本领域已知的。
在一种实施方案中，营养组合物每份可含有对于任何给定的国家的最大饮食推荐的约10-约50%或对于一组国家的平均饮食推荐的约10-约50%的维生素A、C和E、锌、铁、碘、硒和胆碱。在另一个实施方案中，儿童的营养组合物每份可供应对于任何给定的国家的最大饮食推荐的约10-30%或对于一组国家的平均饮食推荐的约10-30%的Β-维生素。在又一个实施方案中，在儿童的营养产品中维生素D、钙、镁、磷和钾的水平可与乳中存在的平均水平相对应。在其它实施方案中，在每份儿童的营养组合物中的其它营养物可以对于任何给定的国家的最大饮食推荐的约20%的或对于一组国家的平均饮食推荐的约20%存在。
本公开的营养组合物可任选包括一种或多种以下调味剂，包括但不限于香味提取物、挥发油、可可粉或巧克力香料、花生黄油香料、饼干屑、香草或任何市售可得的香料。可用的香料的实例包括但不限于纯茴香提取物、仿造香蕉提取物、仿造樱桃提取物、巧克力提取物、纯柠檬提取物、纯橙子提取物、纯薄荷提取物、蜂蜜、仿造菠萝提取物、仿造朗姆酒提取物、仿造草莓提取物或香草提取物；或挥发油，例如蜜蜂花油、月桂油、香柠檬油、杉木油、樱桃油、肉桂油、丁香油或薄荷油；花生黄油、巧克力香料、香草饼干屑、奶油糖果、太妃糖和它们的混合物。调味剂的量可根据使用的调味剂而大大变化。调味剂的类型和量可如本领域已知的来选择。
本公开的营养组合物可任选包括一种或多种乳化剂，其可加入用于稳定最终产品。合适的乳化剂的实例包括但不限于卵磷脂(例如，来自蛋或大豆)、α乳白蛋白和/或单-和二-甘油酯和它们的混合物。其它乳化剂对于专业技术人员而言是容易显而易见的，并且合适的乳化剂的选择将部分取决于制剂和最终产品。
本公开的营养组合物可任选包括一种或多种防腐剂，其还可加入以延长产品储存期限。合适的防腐剂包括但不限于山梨酸钾、山梨酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸钠、EDTA二钠钙和它们的混合物。
本公开的营养组合物可任选包括一种或多种稳定剂和/或乳化剂。用于实践本公开的营养组合物的合适的稳定剂和/或乳化剂包括但不限于阿拉伯胶、印度胶、卡拉牙胶、黄蓍胶、琼脂、丹麦琼脂、瓜耳胶、胞外多糖胶、刺槐豆胶、果胶、低甲氧基果胶、明胶、微晶纤维素、CMC (羧甲基纤维素钠)、甲基纤维素羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、DATEM (单-和二甘油酯的二乙酰基酒石酸酯)、葡聚糖、角叉菜胶、CITREM (单-和二甘油酯的柠檬酸酯)、辛烯基琥珀酸酐(OSA)-改性的淀粉、单-和二甘油酯的柠檬酸酯和它们的混合物。
所公开的营养组合物可以本领域已知的任何形式提供，例如粉末、凝胶、悬浮液、糊膏、固体、液体、液体浓缩物、可重构的粉末状乳替代物或即用型产品。在某些实施方案中，营养组合物可包含营养补充剂、儿童的营养产品、婴儿配方、人乳强化剂、成长乳或设计用于婴儿或儿科受试者的任何其它营养组合物。本公开的营养组合物包括例如口服可摄取的，健康-促进物质，包括，例如，食物、饮料、片剂、胶囊和粉末。此外，本公开的营养组合物可标准化为特定的卡路里含量，其可作为即用型产品提供，或者可以浓缩的形式提供。在一些实施方案中，营养组合物呈粒径在5 μm-1500 μm范围，更优选在10 μm-300μm范围的粉末形式。
如果营养组合物为即用型产品形式，营养组合物的摩尔渗透压浓度可为约100-约1100 mOsm/kg水，更通常约200-约700 mOsm/kg水。
本公开的营养组合物可提供最少、部分或全部营养支持。组合物可为营养补充或膳食替代。但是组合物可能不需要是营养完全的。在一种实施方案中，本公开的营养组合物为营养完全的并且含有合适类型和量的脂质、碳水化合物、蛋白质、维生素和矿物质。脂质或脂肪的量通常可在约1-约7 g/100 kcal变化。蛋白质的量通常可在约1-约7 g/100 kcal变化。碳水化合物的量通常可在约6-约22 g/100 kcal变化。
在某些实施方案中，营养组合物包含类胡萝卜素，例如黄体素、玉米黄质、虾青素、番茄红素、β-胡萝卜素、α-胡萝卜素、γ-胡萝卜素和/或β-隐黄素。富含类胡萝卜素的植物源包括但不限于猕猴桃、葡萄、柑橘、番茄、西瓜、番木瓜和其它红色水果或暗绿色植物，例如甘蓝(kale)、菠菜、青萝卜、羽衣甘蓝绿、长叶莴苣(romaine lettuce)、西兰花、西葫芦、菜园豌豆和球芽甘蓝、菠菜、胡萝卜。
人不能合成类胡萝卜素，但是在人母乳中已鉴定超过34种类胡萝卜素，包括某些类胡萝卜素的异构体和代谢物。除了它们存在于母乳中，饮食类胡萝卜素(例如α和β-胡萝卜素、番茄红素、黄体素、玉米黄质、虾青素和隐黄素)存在于哺乳期的妇女和母乳哺育的婴儿的血清中。通常报道类胡萝卜素改进细胞与细胞的连通，促进免疫功能，支持健康的呼吸健康，保护皮肤免于UV线破坏，并且还与降低某些类型的癌症的风险和所有起因的死亡率有关。此外，类胡萝卜素的饮食源和/或多酚被人受试者吸收，累积并且保留在母乳中，使得它们可用于哺育婴儿。因此，向婴儿配方或儿童的产品加入植物营养物将使得配方在组成和功能上更接近人乳。
类黄酮，作为整体，也可包括在营养组合物中，因为类黄酮不能通过人合成。此外，来自植物或藻类提取物的类黄酮可以单体、二聚物和/或聚合物形式使用。在一些实施方案中，在哺乳的前三个月期间，营养组合物包含一定水平的与人乳中的那些类似的单体形式的类黄酮。虽然已在人乳样品中鉴定了类黄酮糖苷配基(单体)，但是类黄酮和/或它们的代谢物的共轭形式也可用于营养组合物。类黄酮可以以下形式加入：游离的、葡糖苷酸、甲基葡糖苷酸、硫酸酯和甲基硫酸酯。
在一种实施方案中，本公开的营养组合物包含有效量的胆碱。胆碱为细胞的正常功能必需的营养。其为膜磷脂的前体，并且其加速乙酰胆碱的合成和释放，乙酰胆碱为在记忆储存中涉及的神经传递素。此外，虽然不希望束缚于该理论或任何其它理论，我们认为饮食胆碱和二十二碳六烯酸(DHA)协同起作用以促进磷脂酰基胆碱的生物合成，因此帮助促进人受试者的突触发生。另外，胆碱和DHA可呈现促进树突棘形成的协同效果，这对于维持已建立的突触连接是重要的。在一些实施方案中，本公开的营养组合物包括有效量的胆碱，其为每份约20 mg胆碱/8 液量盎司(236.6 mL)每份至约100 mg/8 液量盎司(236.6 mL)。
本公开还提供一种用于为受试者提供营养支持的方法。所述方法包括给予受试者有效量的本公开的营养组合物。
营养组合物可直接排入受试者的肠道中。在一些实施方案中，营养组合物直接排入肠中。在一些实施方案中，可配制组合物，以在医师的监督下，经肠消耗或给予，并且可旨在用于特定的饮食管理疾病或状况，例如腹腔疾病和/或食物过敏症，其中基于公认的科学原理，针对所述疾病或状况通过医学评价建立独特的营养需求。
本公开的营养组合物不局限于包含本文特别列举的营养物的组合物。任何营养物可作为组合物的一部分而递送，用于满足营养需求和/或为了优化受试者的营养状况的目的。
在一些实施方案中，可将营养组合物递送至婴儿，从出生时直至匹配足月妊娠的时间。在一些实施方案中，可将营养组合物递送至婴儿，直至至少约3个月矫正年龄。在另一个实施方案中，可将营养组合物递送至受试者，只要校正营养缺陷有需要。在又一个实施方案中，可将营养组合物递送至婴儿，从出生时直至至少约6个月矫正年龄。在又一个实施方案中，可将营养组合物递送至婴儿，从出生时直至至少约一岁矫正年龄。
本公开的营养组合物可标准化为特定的卡路里含量，其可作为即用型产品提供，或者可以浓缩的形式提供。
在一些实施方案中，本公开的营养组合物为成长乳。成长乳为强化的基于乳的饮料，所述基于乳的饮料旨在用于超过1岁的儿童(通常1-3岁，4-6岁或1-6岁)。它们不是医学食物，并且不旨在作为膳食替代或补充以解决具体的营养缺乏。而是，成长乳设计意图用作多种饮食的补充剂以提供对儿童实现连续、每日摄取所有必需维生素和矿物质、大量营养元素加上另外的功能饮食组分(例如具有声称的健康-促进性质的非必需营养物)的额外保证。
根据本公开的营养组合物的精确组成在市场之间可变化，这取决于当地规章和关注的人群的饮食摄入信息。在一些实施方案中，根据本公开的营养组合物由乳蛋白质源(例如全乳或脱脂乳)加上加入的糖和甜味剂(以实现期望的感觉特性)和加入的维生素和矿物质组成。脂肪组合物通常衍生自乳原料。总蛋白质的目标可为与人乳、牛乳或较低值相匹配。总碳水化合物的目标通常是提供尽可能少加入的糖(例如蔗糖或果糖)以实现可接受的味道。通常，维生素A、钙和维生素D以匹配区域性牛乳的营养贡献的水平加入。另外，在一些实施方案中，维生素和矿物质可以提供约20%的饮食参考摄入(DRI)或20%的每日值(DV)/份的水平加入。此外，营养值在市场之间可变化，这取决于预期人群的鉴定的营养需求、原料贡献和区域规章。
提供实施例来说明本公开的营养组合物的一些实施方案，但是不应解释为对其有任何限制。考虑本文公开的营养组合物或方法的说明书或实践，在本文权利要求范围内的其它实施方案对于本领域技术人员来说将是显而易见的。旨在认为说明书以及实施例仅为示例性的，本公开的范围和精神由实施例后的权利要求书来指示。
实施例1
该实施例说明根据本公开的营养组合物的一个实施方案。
实施例2
该实施例说明根据本公开的营养组合物的另一个实施方案。
实施例3
该实施例说明根据本公开的营养组合物的又一个实施方案。
实施例4
该实施例说明根据本公开的营养组合物的再一个实施方案。
实施例5
该实施例说明根据本公开的营养组合物的另一个实施方案。
实施例6
该实施例说明根据本公开的营养组合物的再一个实施方案。
实施例7
该实施例说明根据本公开的营养组合物的另一个实施方案。
实施例8
该实施例说明根据本公开的营养组合物的又一个实施方案。
实施例9
该实施例说明根据本公开的营养组合物的再一个实施方案。
实施例10
该实施例说明根据本公开的营养组合物的一个实施方案。
实施例11
该实施例说明根据本公开的营养组合物的再一个实施方案。
实施例12
该实施例说明根据本公开的营养组合物的再一个实施方案。
在本说明书中引用的所有参考文献通过引用而全文结合到本说明书中，其包括但不限于所有论文、出版物、专利、专利申请、介绍（presentations）、正文、报告、手稿、小册子、书、互联网帖子、杂志文章、期刊等。本文中参考文献的讨论旨在仅概述它们的作者的主张，不是承认任何参考文献构成现有技术。申请人保留挑战引用的参考文献的精确性和相关性的权利。
虽然已使用特定的术语、装置和方法描述了本公开的实施方案，这样的描述仅用于说明的目的。所用的词语为描述性而不是限制性词语。应理解的是，在不偏离在以下权利要求中描述的本公开的精神或范围的情况下，本领域普通技术人员可以进行变化和改变。此外，应理解的是，各种实施方案的各方面作为整体或部分可互换。例如，虽然已举例说明用于产生根据那些方法制备的商用无菌液体营养补充剂的方法，还预期其它用途。因此，所附权利要求的精神和范围应不局限于其中所包含的版本的描述。