本发明属于农业领域，具体涉及一种铜绿丽金龟幼虫用饲料及其制备方法和无土饲养方法。
背景技术：
地下害虫是我国农林业生产中的一类重要害虫，已知地下害虫的种类有320余种，但危害最严重发生范围最广的是蛴螬，占地下害虫数量的80%左右，在部分地区铜绿丽金龟为主要优势种，发生数量占蛴螬总量的70%以上。据统计，因蛴螬等地下害虫的为害一般造成减产20%～40%，严重的减产70%～80%，甚至绝收，造成的农产品质量下降更是无法估计，地下害虫已成为严重影响主要农作物产量、品质和效益的重要因素。
由于地下害虫为害十分隐蔽，防治难度较大。药剂处理土壤是压低田间虫口基数、控制地下害虫为害的常规化学防治措施，但必须使用残效期长的杀虫剂，过去常用的六六六等杀虫剂因残效期长、残留严重已经禁止使用，随着各地种植业结构调整，各地的地下害虫危害逐年加重。近20多年顺应环境保护的大趋势，新推向市场的杀虫剂绝大多数为高效、低残留农药，但对地下害虫有明显防治效果且低毒的药剂极少，农民为了控制地下害虫的为害，不得不违规使用剧毒农药，地下害虫防治已经成为无公害农产品生产的最大障碍。
因此，要解决当前种植业结构调整中地下害虫为害日趋严重的问题，顺应未来绿色农业发展的需要，必须进行地下害虫控制技术的全面创新。以研制开发各种成虫诱杀措施、筛选生物和无公害化学杀虫剂为基础，以发展生态和行为调控技术为目标，以组装配套重要地下害虫的系统控制技术为重点，通过新技术的大面积应用与示范，引导农民进行无公害农产品生产，为控制地下害虫的大发生势头，提升地下害虫无公害防治和可持续治理水平提供科技支撑。
以上新技术的完成需要大量的供试虫源。由于铜绿丽金龟长期生活在土壤，生活习性、生长发育规律很难观测到，田间挖土调查需要大量的人力和物力，田间得到的虫源在室内很易死亡。为掌握铜绿丽金龟的生活发育规律，为试验提供可靠的虫源，我们对铜绿丽金龟的饲养技术进行了研究。室内传统的营养土饲养，虽然可以提供虫源，但需要大量的人力和物力进行取土，对土壤的消毒处理也非常难以进行，且饲养环境占地面积大，试验室内无法进行，饲养环境不易控制，在自然环境下极易感染各种病原菌，容易对饲养的虫源造成毁灭性的灾难。因此我们对铜绿丽金龟饲养技术进行了全面创新，进行了人工饲料配方研制及无土人工室内饲养技术的研究，以期为铜绿丽金龟生物杀虫剂的病原筛选、药剂毒力测定、病毒增殖等方面提供重要的研究材料，为地下害虫无公害防治和可持续治理提供更多更优的产品，从而提高农产品的产量、品质和效益。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种铜绿丽金龟幼虫用饲料及其制备方法和无土饲养方法，该饲料和饲养方法人工饲养铜绿丽金龟幼虫能提高幼虫的存活率、缩短幼虫发育天数。
本发明所采用的技术方案是：一种铜绿丽金龟幼虫用饲料，按照重量份数由以下原料制成：黄豆全株粉50-80份、黄豆粉90-120份、麦麸180-240份、酵母浸粉25-35份、山梨酸1.5-3份、抗坏血酸2.5-4份、防微灵3-5份、甲醛2-5份、硫酸链霉素0.1-0.5份、琼脂粉12-18份和水1000-1500份。
所述的铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备方法，包括以下步骤：
步骤（1）、将5-6叶期的黄豆全苗取回室内洗净，然后在自然条件下阴干，再用植物组织粉碎机将其粉碎成粉并过筛，得到黄豆全株粉，备用；
步骤（2）、取大豆原材料，并用植物组织粉碎机将其粉碎成粉并过筛，得到黄豆粉，备用；
步骤（3）、按上述重量份数称量麦麸、黄豆全株粉、黄豆粉、酵母粉，混匀后放在蒸锅内蒸30分钟，晾凉，备用；
步骤（4）、按上述重量份数取水、琼脂粉，放在烧杯内或不锈钢锅内加热，煮沸直至琼脂粉完全溶化，得到琼脂溶液，备用；
步骤（5）、将步骤（4）中的琼脂溶液晾凉至30-40℃放入搅拌器内，然后放入蒸制好的黄豆全株粉、黄豆粉、麦麸、酵母粉，再按照重量份数加入山梨酸、抗坏血酸、甲醛，充分混合搅拌均匀，得到混合料，备用；
步骤（6）、将配制好的混合料迅速倒入经过消毒的塑料容器内，根据虫龄大小将料层设置成不同的厚度，待自然晾凉后上面铺上一层经过消毒的卫生纸，放在冰箱内冷藏24小时，然后取出在料层上面用试管打上孔洞，最后把打过孔洞的饲料放入底层铺有一层消毒卫生纸的养虫盒内，即完成铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备。
作为本发明一种铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备方法的进一步优化，步骤（6）所述的料层厚度根据虫龄大小一龄幼虫人工饲料厚度为0.8-1.2cm，二、三龄幼虫1.6-2.4cm。
作为本发明一种铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备方法的进一步优化，步骤（6）所述一龄幼虫用饲料的孔洞直径为1.5cm，二龄幼虫用饲料的孔洞直径为2cm，三龄幼虫用饲料的孔洞直径为2.5cm。
利用所述的饲料进行铜绿丽金龟幼虫无土饲养的方法，包括以下步骤：
步骤一、把铜绿丽金龟成虫按雌雄1：1比例放在成虫养殖箱内，养殖箱内铺有厚度为8-12cm的消毒土，每天取卵放在经过消毒处理的纱布上，使其孵化；
步骤二、从土壤中取卵，把卵放在质量浓度为0.3%的次氯酸钠溶液中浸20秒后取出，然后把卵放在铺有经过消毒的纱布或卫生纸的培养皿里，上面再铺上一层经过消毒的纱布或卫生纸，定期定量加水使培养皿里保持一定的湿度；
步骤三、卵孵出幼虫后取出，移入养虫盒内的饲料中，7-12天更换一次饲料，更换饲料时并对养虫盒进行清洗和消毒，当一龄幼虫脱皮变成二龄幼虫、二龄幼虫脱皮变成三龄幼虫后对幼虫进行分拣。
作为本发明一种铜绿丽金龟幼虫的无土饲养方法的进一步优化，饲养过程中控制温度为22-27℃，湿度为70-75%，光周期为室内自然光照。
作为本发明一种铜绿丽金龟幼虫的无土饲养方法的进一步优化，所述养虫盒尺寸为：24×15×8cm，一龄幼虫可一次接入70-80头，二龄幼虫可一次放入50-60头，三龄幼虫可一次放入40头。
与现有技术相比，本发明至少具有下述优点及有益效果：
本发明提供的饲料和饲养方法人工饲养铜绿丽金龟幼虫能提高幼虫的存活率、缩短幼虫发育天数。该饲料的原料易得、成本低、配制方便，而且营养成分全面、饲养效果稳定，具有很强的实用性，有利于大规模饲养铜绿丽金龟幼虫，经济效益显著。
采用本发明提供的饲料进行人工无土饲养，一龄初幼虫的存活率为72.8%，比传统方法60.8%的存活率提高12个百分点；一龄幼虫脱皮变成二龄幼虫存活率86.6%，比传统方法84.3%的存活率提高2.3个百分点；饲养一龄幼虫平均天数16.1天，比传统方法18.3天缩短了2.2天。人工无土饲养条件下，二龄初幼虫存活率为85.5%，比传统方法73.3%的存活率提高12.2个百分点；二龄幼虫脱皮变成三龄幼虫存活率80.9%，比传统方法66.1%的存活率提高14.8个百分点；饲养二龄幼虫平均天数25.2天，比传统方法31.9天缩短了7天。
本发明提供的铜绿丽金龟幼虫的无土人工饲养方法便于在室内开展，饲料易消毒，饲养环境易控制，能节省大量的人力和饲养空间，并且饲养环境干净不易感染，为铜绿丽金龟幼虫的饲养提供新的思路和方法，并且为铜绿丽金龟幼虫的生物杀虫剂的病原筛选、毒力测定、病毒增殖等方面提供重要的研究材料。
具体实施方式
为使本发明的内容更明显易懂，以下结合具体实施例，对本发明进行详细描述。
一种铜绿丽金龟幼虫用饲料，按照重量份数由以下原料制成：黄豆全株粉50-80份、黄豆粉90-120份、麦麸180-240份、酵母浸粉25-35份、山梨酸1.5-3份、抗坏血酸2.5-4份、防微灵3-5份、甲醛2-5份、硫酸链霉素0.1-0.5份、琼脂粉12-18份和水1000-1500份。
所述的铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备方法，包括以下步骤：
步骤（1）、将5-6叶期的黄豆全苗取回室内洗净，然后在自然条件下阴干，再用植物组织粉碎机将其粉碎成粉并过筛，得到黄豆全株粉，备用；
步骤（2）、取大豆原材料，并用植物组织粉碎机将其粉碎成粉并过筛，得到黄豆粉，备用；
步骤（3）、按上述重量份数称量麦麸、黄豆全株粉、黄豆粉、酵母粉，混匀后放在蒸锅内蒸30分钟，晾凉，备用；
步骤（4）、按上述重量份数取水、琼脂粉，放在烧杯内或不锈钢锅内加热，煮沸直至琼脂粉完全溶化，得到琼脂溶液，备用；
步骤（5）、将步骤（4）中的琼脂溶液晾凉至30-40℃放入搅拌器内，然后放入蒸制好的黄豆全株粉、黄豆粉、麦麸、酵母粉，再按照重量份数加入山梨酸、抗坏血酸、甲醛，充分混合搅拌均匀，得到混合料，备用；
步骤（6）、将配制好的混合料迅速倒入经过消毒的塑料容器内，根据虫龄大小将料层设置成不同的厚度，一龄幼虫人工饲料厚度为0.8-1.2cm，二、三龄幼虫1.6-2.4cm，待自然晾凉后上面铺上一层经过消毒的卫生纸，放在冰箱内冷藏24小时，然后取出在料层上面用试管打上孔洞，一龄幼虫用饲料的孔洞直径为1.5cm，二龄幼虫用饲料的孔洞直径为2cm，三龄幼虫用饲料的孔洞直径为2.5cm，最后把打过孔洞的饲料放入底层铺有一层消毒卫生纸的养虫盒内，即完成铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备。
利用所述的饲料进行铜绿丽金龟幼虫无土饲养的方法，包括以下步骤：
步骤一、把铜绿丽金龟成虫按雌雄1：1比例放在成虫养殖箱内，养殖箱内铺有厚度为8-12cm的消毒土，每天取卵放在经过消毒处理的纱布上，使其孵化；
步骤二、从土壤中取卵，把卵放在质量浓度为0.3%的次氯酸钠溶液中浸20秒后取出，然后把卵放在铺有经过消毒的纱布或卫生纸的培养皿里（纱布或卫生纸用水打湿，上面没有明水），上面再铺上一层经过消毒的纱布或卫生纸，定期定量加水使培养皿里保持一定的湿度；
步骤三、卵孵出幼虫后取出，移入养虫盒内的饲料中，所述养虫盒尺寸为：24×15×8cm，一龄幼虫可一次接入70-80头，二龄幼虫可一次放入50-60头，三龄幼虫可一次放入40头；7-12天更换一次饲料，更换饲料时并对养虫盒进行清洗和消毒，当一龄幼虫脱皮变成二龄幼虫、二龄幼虫脱皮变成三龄幼虫后对幼虫进行分拣；饲养过程中控制温度为22-27℃，湿度为70-75%，光周期为室内自然光照。
实施例1：
一种铜绿丽金龟幼虫用饲料，按照重量份数由以下原料制成：黄豆全株粉50份、黄豆粉90份、麦麸240份、酵母浸粉25份、山梨酸1.5份、抗坏血酸2.5份、防微灵3份、甲醛2份、硫酸链霉素0.1份、琼脂粉12份和水1000份。
所述的铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备方法，包括以下步骤：
步骤（1）、将5-6叶期的黄豆全苗取回室内洗净，然后在自然条件下阴干，再用植物组织粉碎机将其粉碎成粉并过筛，得到黄豆全株粉，备用；
步骤（2）、取大豆原材料，并用植物组织粉碎机将其粉碎成粉并过筛，得到黄豆粉，备用；
步骤（3）、按上述重量份数称量麦麸、黄豆全株粉、黄豆粉、酵母粉，混匀后放在蒸锅内蒸30分钟，晾凉，备用；
步骤（4）、按上述重量份数取水、琼脂粉，放在烧杯内或不锈钢锅内加热，煮沸直至琼脂粉完全溶化，得到琼脂溶液，备用；
步骤（5）、将步骤（4）中的琼脂溶液晾凉至30-40℃放入搅拌器内，然后放入蒸制好的黄豆全株粉、黄豆粉、麦麸、酵母粉，再按照重量份数加入山梨酸、抗坏血酸、甲醛，充分混合搅拌均匀，得到混合料，备用；
步骤（6）、将配制好的混合料迅速倒入经过消毒的塑料容器内，根据虫龄大小将料层设置成不同的厚度，一龄幼虫人工饲料厚度为1cm，二、三龄幼虫2cm，待自然晾凉后上面铺上一层经过消毒的卫生纸，放在冰箱内冷藏24小时，然后取出在料层上面用试管打上孔洞，一龄幼虫用饲料的孔洞直径为1.5cm，二龄幼虫用饲料的孔洞直径为2cm，三龄幼虫用饲料的孔洞直径为2.5cm，最后把打过孔洞的饲料放入底层铺有一层消毒卫生纸的养虫盒内，即完成铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备。
利用所述的饲料进行铜绿丽金龟幼虫无土饲养的方法，包括以下步骤：
步骤一、把铜绿丽金龟成虫按雌雄1：1比例放在成虫养殖箱内，养殖箱内铺有厚度为8-12cm的消毒土，每天取卵放在经过消毒处理的纱布上，使其孵化；
步骤二、从土壤中取卵，把卵放在质量浓度为0.3%的次氯酸钠溶液中浸20秒后取出，然后把卵放在铺有经过消毒的纱布或卫生纸的培养皿里（纱布或卫生纸用水打湿，上面没有明水），上面再铺上一层经过消毒的纱布或卫生纸，定期定量加水使培养皿里保持一定的湿度；
步骤三、卵孵出幼虫后取出，移入养虫盒内的饲料中，所述养虫盒尺寸为：24×15×8cm，一龄幼虫可一次接入70-80头，二龄幼虫可一次放入50-60头，三龄幼虫可一次放入40头；7-12天更换一次饲料，更换饲料时并对养虫盒进行清洗和消毒，当一龄幼虫脱皮变成二龄幼虫、二龄幼虫脱皮变成三龄幼虫后对幼虫进行分拣；饲养过程中控制温度为22-27℃，湿度为70-75%，光周期为室内自然光照。
实施例2：
一种铜绿丽金龟幼虫用饲料，按照重量份数由以下原料制成：黄豆全株粉80份、黄豆粉120份、麦麸180份、酵母浸粉35份、山梨酸3份、抗坏血酸4份、防微灵5份、甲醛5份、硫酸链霉素0.5份、琼脂粉18份和水1500份。
所述的铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备方法同实施例1。
利用所述的饲料进行铜绿丽金龟幼虫无土饲养的方法同实施例1。
实施例3：
一种铜绿丽金龟幼虫用饲料，按照重量份数由以下原料制成：黄豆全株粉70份、黄豆粉100份、麦麸220份、酵母浸粉30份、山梨酸2份、抗坏血酸3.5份、防微灵4份、甲醛3.5份、硫酸链霉素0.3份、琼脂粉15份和水1300份。
所述的铜绿丽金龟幼虫用饲料的制备方法同实施例1。
利用所述的饲料进行铜绿丽金龟幼虫无土饲养的方法同实施例1。
实验研究数据
一、铜绿丽金龟幼虫人工饲料饲养与传统饲养方法的比较
1、卵的孵化比较
在产卵箱中挑取成虫当天产的卵备用。试验设卫生纸保湿遮光、卫生纸保湿不遮光、含水量16%的土、含水量16%的土+粪（土和粪的重量比为3：1）。
卫生纸保湿遮光，培养皿的底层铺一层卫生纸喷入一定量的水（把纸用水打湿，纸上面没有明水），把卵放在纸上，在卵上面遮一层干纸，最后培养皿用报纸包住不让培养皿内部见光，放入人工气候箱中，定期给培养皿内加水，使培养皿保持原来的湿度。
卫生纸保湿不遮光，培养皿的底层铺一层卫生纸喷入一定量的水（把纸用水打湿，纸上面没有明水），把卵放在纸上，在卵上面遮一层干纸，直接把培养皿放入人工气候中，定期给培养皿内加水，使培养皿保持原来的湿度。
含水量16%纯土的制取：取田间的沙壤土，放在太阳下面曝晒，直到完全干。然后把土放在烘箱80℃烘干4个小时，测定含水量。配制土壤绝对含量为16%的试验用土备用。把16%含水量的土壤在培养皿底部铺一层，把卵放在土上面，然后用土把卵盖住，放入人工气候中，定期定量给培养皿内加水，使培养皿保持原来的湿度。
含水量16%土+粪的制取：把牛粪在日光下曝晒，直到完全干。把土和牛粪放在烘箱80℃烘干4个小时，测定含水量，土和粪按重量3：1进行配比，然后配制绝对含水量16%的土+粪。把16%含水量的土和粪在培养皿底部铺一层，把卵放在上面，然后把卵盖住，放入人工气候中，定期定量给培养皿内加水，使培养皿保持原来的湿度。
人工气候箱设置为28℃±0.5℃，光暗比为14：10，湿度为70%。
表1：铜绿丽金龟卵的无土饲养
铜绿丽金龟卵的孵化率以纸保湿遮光和土+粪的孵化率高分别达到95.9%和94.3%，二者显著高于纸保湿不遮光和纯土卵的孵化率；卵的孵化天数，纸保湿遮光、纯土、土+粪的天数与纸保湿不遮光的天数差异显著，前三者显著低于后者。因此，纸保湿遮光和土+粪两种条件下对铜绿丽金龟卵的孵化最有利，说明铜绿丽金龟卵的孵化率对光和营养较敏感。
2、幼虫的饲养比较
2.1一龄幼虫饲养观察
2.1.1人工饲料饲养
选取刚孵化出的一龄幼虫放在饲养盒内。养虫盒尺度为：24×15×8cm。按日期编号每盒放20头刚孵化的幼虫，5天后检查一次每盒初孵幼虫的存活数量，然后再按日期编号每盒放20头一龄幼虫，定期观察确定二龄幼虫的观察日期，发现有二龄初的幼虫时，每天观察一次二龄幼虫的日期和数量。饲料为人工配制的饲料，根据幼虫的取食情况定期对饲料进行更换。
表2：铜绿丽金龟一龄幼虫人工饲料饲养观察
用本发明的人工饲料饲养一龄幼虫，一龄初存活率为72.8%，一龄末幼虫脱皮变成二龄幼虫的存活率为86.6%，一龄幼虫到二龄幼虫平均经历的天数为16.6天。
2.1.2传统营养土饲养
选取刚孵化出的一龄幼虫放在饲养盒内。养虫盒尺度为：24×15×8cm。按日期编号每盒放20头刚孵化的幼虫，5天后检查一次每盒初孵幼虫的存活数量，然后再按日期编号每盒放20头一龄幼虫，定期观察确定二龄幼虫的观察日期，发现有二龄初的幼虫时，每天观察一次二龄幼虫的日期和数量。
营养土的配制：取田间的沙壤土及牛粪，放在太阳下面曝晒，直到完全干。把土和牛粪放在烘箱80℃烘干4个小时，饲养土为按土+粪（重量比为3：1）配比配成绝对含水量为15—18%，饲养土的厚度为5cm。根据幼虫的取食情况，定期对饲养土进行消毒更换。
表3：铜绿丽金龟一龄幼虫传统方法饲养饲养观察
用营养土饲养一龄幼虫，一龄初存活率为60.8%，一龄末幼虫脱皮变成二龄幼虫的存活率为84.3%，一龄幼虫到二龄幼虫平均经历的天数为18.3天。
采用本发明的饲料饲养条件下，一龄初幼虫的存活率为72.8%，比传统方法60.8%的存活率提高12个百分点；人工饲料饲养一龄幼虫脱皮变成二龄幼虫存活率86.6%，比传统方法84.3%的存活率提高2.3个百分点；人工饲料饲养一龄幼虫平均天数16.1天，比传统方法18.3天缩短了2.2天。
2.2二龄幼虫饲养观察
2.2.1人工饲料饲养
选取刚孵化出的二龄幼虫放在饲养盒内。按日期编号每盒放20头二龄初的幼虫，5天后检查一次每盒二龄初期幼虫的存活数量，按日期编号每盒放20头二龄幼虫，定期观察确定三龄幼虫的观察日期，发现有三龄初的幼虫时，每天观察一次三龄幼虫的日期和数量。饲料为本发明人工配制的饲料，根据幼虫的取食情况定期对饲料进行更换。
表4：铜绿丽金龟二龄幼虫人工饲料饲养观察
用本发明的人工饲料饲养二龄幼虫，二龄初存活率为85.5%，二龄末幼虫脱皮变成三龄幼虫的存活率为80.9%，二龄幼虫到三龄幼虫平均经历的天数为25.2天。
2.2.2传统营养土饲养
选取刚孵化出的二龄幼虫放在饲养盒内。按日期编号每盒放20头二龄初的幼虫，5天后检查一次每盒二龄初期幼虫的存活数量，按日期编号每盒放20头二龄幼虫，定期观察确定三龄幼虫的观察日期，发现有三龄初的幼虫时，每天观察一次三龄幼虫的日期和数量。饲养方法同2.1.2上的方法。
表5：铜绿丽金龟二龄幼虫传统方法饲养饲养观察
用营养土饲养二龄幼虫，二龄初存活率为73.3%，二龄末幼虫脱皮变成三龄幼虫的存活率为66.1%，二龄幼虫到三龄幼虫平均经历的天数为31.9天。
采用本发明人工饲料饲养条件下，二龄初幼虫存活率为85.5%，比传统方法73.3%的存活率提高12.2个百分点；人工饲料饲养二龄幼虫脱皮变成三龄幼虫存活率80.9%，比传统方法66.1%的存活率提高14.8个百分点；人工饲料饲养二龄幼虫平均天数25.2天，比传统方法31.9天缩短了7天。
因此用人工饲料饲养铜绿丽金龟能提高幼虫的存活率、缩短幼虫发育天数。原料易得、成本低、配制方便，而且营养成分全面、饲养效果稳定，具有很强的实用性，有利于大规模饲养铜绿丽金龟幼虫，经济效益显著。
铜绿丽金龟的无土人工饲养便于在室内开展，饲料易消毒，饲养环境易控制，能节省大量的人力、物力和饲养空间，并且饲养环境干净不易感染，为铜绿丽金龟的饲养提供新的思路和方法，并能为铜绿丽金龟的生物杀虫剂的病原筛选、毒力测定、病毒增殖等方面提供重要的研究材料。