本发明属于南美白对虾虾青素功能技术领域，具体涉及一种用于提高南美白对虾虾体内虾青素含量的组合物制剂及其制备方法和应用。
背景技术
在自然状态下，虾青素与甲壳蓝蛋白相结合形成二聚体，同时结合两个交叉的虾红素分子，两个交叉的虾红素分子由于相互作用改变单个分子所吸收光的波长，从而改变复合体的呈色。再加上其他蛋白的影响，因此结合的甲壳蓝蛋白-虾红素复合体可以显现出青、蓝、绿等多种颜色。虾体发蓝主要原因有可能是虾青素的合成出了问题。南美白对虾体表的色素不足现象，是室内高密度循环水养殖所面临的问题，原因是其体内的类胡萝卜素，特别是虾青素不足所导致。发蓝的南美白对虾养成虾因市场接受度不好，其价格较正常体色虾少4～8元/公斤，极大地影响了养殖效益。
技术实现要素：
发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种用于提高南美白对虾虾体内虾青素含量的组合物制剂，满足提高南美白对虾虾体内虾青素含量的使用需求。本发明的另一目的是提供一种上述用于提高南美白对虾虾体内虾青素含量的组合物制剂的制备方法。本发明还有一目的是提供一种上述用于提高南美白对虾虾体内虾青素含量的组合物制剂的应用。
技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：
一种用于提高南美白对虾虾体内虾青素含量的组合物制剂，成分中含有由雨生红球藻转化的虾青素和光合细菌发酵产物。
所述的光合细菌为沼泽红假单胞菌。
所述的用于提高南美白对虾虾体内虾青素含量的组合物制剂的制备方法，步骤如下：
1)取雨生红球藻，接种于雨生红球藻培养液中，光照摇床培养至0.5～1×108个/ml浓度；
2)取步骤1)的雨生红球藻培养液倒入新鲜培养液，进行二级培养至0.5～1×108个/ml浓度；
3)取光合细菌，接种并培养至0.5～1×108cfu/ml浓度；
4)取步骤2)的雨生红球藻二级扩增培养藻液，浓缩至2l后，再接入步骤3)制备的光合细菌菌液，将混合液转入无菌透明塑料袋，培养至组合物呈现为红色，即获得组合物制剂。
步骤1)中，培养条件为：28℃，1000lux，摇床转速为150rpm。
步骤2)中，培养条件为：28℃，1000lux，摇床转速为150rpm。
步骤3)中，培养条件为：28℃，1000lux，摇床转速为150rpm。
所述的组合物制剂在提高南美白对虾虾体内虾青素含量中的应用。
所述的组合物制剂在饲喂南美白对虾中的应用。
所述的应用：该制剂用于南美白对虾养殖过程中虾青素缺乏而导致的体内发蓝情况，饲喂与饲料混合使用，注意不要与抗生素混合，用量为：每50公斤饲料添加组合物4l，饲喂周期为4～7d。
有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优势：
1)本发明的组合物制剂，含有大量的雨生红球藻转化的虾青素和光合细菌发酵产物，雨生红球藻转化的虾青素可以直接补充南美白对虾体内的虾青素含量，直接改善虾体体色；光合细菌发酵产物可改善南美白对虾肠道菌群，增强免疫力，提高对虾体内虾青素的含量，进一步改善体色。
2)本发明的组合物制剂，是一类新型的功能性活性物质，制备简单，具有显著的应用效果和市场应用前景。
3)本发明的组合物制剂，使用时可直接与饲料混合投喂南美白对虾，投喂4～7d，即可产生明显效果，具有很好的实用性。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。
实施例1
一种用于提高南美白对虾虾体内虾青素的组合物制剂的制备方法，先由雨生红球藻和光合细菌分别培养，再选择合适的生长阶段将两者混合培养而成，具体步骤如下：
1、雨生红球藻的扩增培养
(1)雨生红球藻的一级接种培养：从固体培养平板上刮取少量纯化的雨生红球藻，接种于100ml雨生红球藻培养液(bg11培养液)中，于28℃，1000lux，150rpm，置于光照摇床培养至0.5～1×108个/ml浓度。
(2)雨生红球藻的二级扩增培养：将一级培养的100ml雨生红球藻培养液倒入灭菌的10l新鲜培养液，通入过滤空气，于28℃，1000lux，150rpm，摇床培养至0.5～1×108个/ml浓度。
(3)雨生红球藻的浓缩：将二级培养的雨生红球藻停气12h，让藻体沉降，去降上清，收集下层藻液，体积为1l，藻浓度约为0.5～1.0×109个/ml。
2、光合细菌的制备
用接种环从固体培养平板上刮取单菌落的光合细菌(沼泽红假单胞菌)，接种于100ml培养液(nh4c11.0g，ch3coona3.5g，mgcl20.1g，cacl20.1g，kh2po40.6g，k2hpo40.4g，酵母膏0.1g，蒸馏水1000ml，ph7.2)中，于厌氧罐中28℃，1000lux，150rpm，摇床培养至0.5～1×108cfu/ml浓度。
3、雨生红球藻的虾青素转化及光合细菌转入，两者组合后再培养
取1l雨生红球藻浓缩藻液，其藻液浓度达到1.0×109后，接入100ml光合细菌菌液，将混合液转入无菌透明塑料袋(具有单向排气阀)，袋体置于摇床以100转/分，光照1000lux，培养约3d，培养至组合物呈现为红色，即雨生红球藻转化合成虾青素及光合细菌竞争营养盐生长呈红色，即获得组合物制剂，此时，组合物制剂中含有虾青素浓度约为100mg/l，光合细菌数量约为1.0×1011cfu/l。
实施例2
采用实施例1的制剂，添加到常规的南美白对虾饲料中，进行常规南美白对虾养殖试验(注意不要与抗生素混合)，饲喂周期为4-7d，测定虾死亡率和虾青素含量等参数，结果如表1所示。
表1测定结果
注：本喂养实验中南美白对虾饲料的基础饲料的组成：鱼粉170g/kg，豆油20g/kg，小麦淀粉350g/kg，豆粕200g/kg，玉米淀粉180g/kg，复合维生素15g/kg，复合矿物质15g/kg，其他等。
表1的试验结果表明，当50kg饲料中添加4l组合物制剂，投喂5～7d后，对虾的体色由蓝色转为青色(正常体色)，其死亡率也大幅度降低。
实施例3
采用实施例1的制备方法，制备出不同的雨生红球藻和光合细菌浓度比的组合物制剂，采用实施例2的喂养方法，进行常规南美白对虾喂养，7天后，测定南美白对虾的虾青素浓度等参数，结果如表2所示。
表2虾青素的转化合成与光合细菌浓度
由表2可知，当雨生红球藻藻体浓度为1.0×108个/ml及光合细菌菌液浓度为1.0×108cfu/ml时，组合物中的虾青素及光合细菌的浓度达到最佳组合。