本发明属于饲料原料加工技术领域，具体涉及一种提高鸡肉多肽吸收利用率的方法。
背景技术：
肽键是由一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基缩合形成的，形成的酰胺基在蛋白质化学中称为肽键；氨基酸的分子最小，蛋白质最大，两个或以上的氨基酸脱水缩合形成若干个肽键从而组成一个肽，多个肽进行多级折叠就组成一个蛋白质分子，蛋白质有时也被称为“多肽”；生物体内已发现几百种肽，是机体完成各种复杂的生理活动必不可少的参与者；在诸多的多肽中，由于小分子活性肽具有易吸收，不增加人体消化负担，营养价值极其高而广泛被当代人们所意识和接受，逐渐成为当下人们养生品而受热捧。
现有的小分子肽提取技术中，提取方法单一，提取效率不高，并且酶制剂用量较高，适用场合受限制，所制备的小分子肽活性难以用于肽类药物和肽类保健品。
技术实现要素：
为了解决以上技术问题，本发明提供一种提高鸡肉多肽吸收利用率的方法，能够有效提高鸡肉多肽吸收利用率。
本发明技术方案是：一种提高鸡肉多肽吸收利用率的方法，包括以下步骤：
步骤1，对鸡肉进行清洗粉碎，获得鸡肉肉骨，蒸煮所述鸡肉肉骨，获得鸡肉骨汤；
步骤2，对所述鸡肉骨汤进行磁化，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入磁化后的所述鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，获得酶剪切液；
步骤3，向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，离心分离后过滤获得上清液，采用酒精激活所述上清液，最后冷却离心分离获得鸡肉小分子肽。
其中，所述步骤1具体为：采用粉碎机对鸡肉进行粉碎，清洗后获得鸡肉肉骨，将所述鸡肉肉骨和纯净水加入蒸煮罐内，在0.2mpa压力下以132℃高压蒸煮60min，排出残渣，获得鸡肉骨汤。
其中，所述步骤2具体为：将所述鸡肉骨汤置于强力磁化机，在4700高斯磁场下磁化5s，将磁化后的所述鸡肉骨汤冷却至45-50℃，再采用盐酸溶液调节所述鸡肉骨汤的ph值至5.0-6.0，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入调节后的所述鸡肉骨汤，搅拌加入三种所述酶制剂后的鸡肉骨汤6-8h，直至所述鸡肉骨汤的肽链的酶剪切完毕，然后加热灭酶去腥，最后冷却至室温，过滤后获得的滤液为酶剪切液。
其中，所述步骤2中将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入调节后的所述鸡肉骨汤，具体为：将所述第一酶制剂按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述鸡肉骨汤，搅拌12-18min后按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述第二酶制剂，再搅拌12-18min后按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述第三酶制剂。
其中，所述第一酶制剂为胰蛋白酶，所述第二酶制剂为胰凝乳蛋白酶，所述第三酶制剂为弹性蛋白酶。
其中，所述步骤3具体为：向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，加热反应，待分离后的所述酶剪切液冷却后，离心分离10min，除去滤渣获得上清液，向所述上清液中加入酒精在18-21℃下激活24h，直至所述上清液为浆状，离心分离去除上层清液获得鸡肉小分子肽。
其中，所述蛋白分离液为99％酒精。
其中，所述步骤3之后还包括：步骤4，将所述鸡肉小分子肽提纯为含盐鸡肉小分子肽，具体为：采用tris-hcl缓冲液将所述鸡肉小分子肽溶鲜并定容至100ml，获得溶液；将所述溶液在2000r/min转速下离心分离10min，收集上层清液；将所述上层清夜转入g75层析柱过柱层析并采用tris-hcl缓冲液洗脱，获得层析液，收集峰值段为200-280nm的所述层析液并进行冷冻干燥，获得含盐鸡肉小分子肽。
其中，所述步骤3之后还包括：步骤5，将所述鸡肉小分子肽提纯为脱盐鸡肉小分子肽，具体为：采用tris-hcl缓冲液将所述鸡肉小分子肽溶鲜并定容至10ml，获得溶液；将所述溶液在2000r/min转速下离心分离10min，收集上层清液；将所述上层清夜转入g25层析柱过柱层析并采用三蒸水缓冲液洗脱，获得层析液，收集峰值段为200-250nm的所述层析液并进行冷冻干燥，获得脱盐鸡肉小分子肽。
发明的原理如下：
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明提出了从鸡肉肉骨提取的小分子肽及其提取方法，该提取方法通过对鸡肉进行清洗粉碎，获得鸡肉肉骨，蒸煮所述鸡肉肉骨，获得鸡肉骨汤；然后，对所述鸡肉骨汤进行磁化，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入磁化后的所述鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，获得酶剪切液；最后，向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，离心分离后过滤获得上清液，采用酒精激活所述上清液，最后冷却离心分离获得鸡肉小分子肽；这样，该方法直接对磁化后的鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，磁化过程能够使牢固的肽链出现了裂痕及部分脱落，并且，第一酶制剂、第二酶制剂、第三酶制剂分阶段进行肽链的酶剪切，操作性强，其对小分子多肽的提取率高达2.77％，磁化过程有助于加速肽链的酶剪切，同时减少了酶制剂的用量，从而减少了酶解带来的污染，降低了生产成本。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1：
一种提高鸡肉多肽吸收利用率的方法，包括以下步骤：
步骤1，对鸡肉进行清洗粉碎，获得鸡肉肉骨，蒸煮所述鸡肉肉骨，获得鸡肉骨汤；
具体为：去除鸡肉的内脏，然后采用粉碎机对鸡肉进行粉碎，清洗后获得鸡肉肉骨，将所述鸡肉肉骨和纯净水加入蒸煮罐内，纯净水为鸡肉肉骨重量的2倍，在0.2mpa压力下以132℃高压蒸煮60min，排出残渣，获得鸡肉骨汤；
步骤2，对所述鸡肉骨汤进行磁化，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入磁化后的所述鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，获得酶剪切液；
具体为：将所述鸡肉骨汤置于强力磁化机，在4700高斯磁场下磁化5s，再将所述鸡肉骨汤冷却至48℃，采用盐酸溶液调节所述鸡肉骨汤的ph值，待所述鸡肉骨汤的ph值为5.5，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入调节后的所述鸡肉骨汤，酶制剂在48℃对鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，在酶剪切过程中不断搅拌，搅拌加入所述酶制剂后的鸡肉骨汤7h，直至所述鸡肉骨汤的肽链的酶剪切完毕，对酶剪切完毕的鸡肉骨汤加热至灭酶，再加入肉桂以去除腥味，最后冷却至室温，分离过滤，过滤后获得的滤液为酶剪切液。
其中，所述步骤2中将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入调节后的所述鸡肉骨汤，具体为：将所述第一酶制剂按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述鸡肉骨汤，搅拌15min后按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述第二酶制剂，再搅拌15min后按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述第三酶制剂；所述第一酶制剂为胰蛋白酶，所述第二酶制剂为胰凝乳蛋白酶，所述第三酶制剂为弹性蛋白酶；
步骤3，向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，离心分离后过滤获得上清液，采用酒精激活所述上清液，最后冷却离心分离获得鸡肉小分子肽。
具体为，向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，加热反应，待分离后的所述酶剪切液冷却后，离心分离10min，除去滤渣获得上清液，向所述上清液中加入酒精在20℃下激活24h，直至上清液为浆状，离心分离去除上层清液获得鸡肉小分子肽。
所述步骤3之后还包括：步骤4，将所述鸡肉小分子肽提纯为含盐鸡肉小分子肽，具体为：采用tris-hcl缓冲液将所述鸡肉小分子肽溶鲜并定容至100ml，获得溶液；将所述溶液在2000r/min转速下离心分离10min，收集上层清液；将所述上层清夜转入g-75层析柱过柱层析并采用tris-hcl缓冲液洗脱，获得层析液，收集峰值段为200-280nm的所述层析液并进行冷冻干燥，获得含盐鸡肉小分子肽。
该提纯方法获得的含盐鸡肉小分子肽的纯度≥90％，含量≥20mg/kg体重。
所述步骤3之后还包括：步骤5，将所述鸡肉小分子肽提纯为脱盐鸡肉小分子肽，具体为：采用tris-hcl缓冲液将所述鸡肉小分子肽溶鲜并定容至10ml，获得溶液；将所述溶液在2000r/min转速下离心分离10min，收集上层清液；将所述上层清夜转入g-25层析柱过柱层析并采用三蒸水缓冲液洗脱，获得层析液，收集峰值段为200-250nm的所述层析液并进行冷冻干燥，获得脱盐鸡肉小分子肽。
该提纯方法获得的含盐鸡肉小分子肽的纯度≥98％。
实施例2：
一种提高鸡肉多肽吸收利用率的方法，包括以下步骤：
步骤1，对鸡肉进行清洗粉碎，获得鸡肉肉骨，蒸煮所述鸡肉肉骨，获得鸡肉骨汤；
具体为：去除鸡肉的内脏，然后采用粉碎机对鸡肉进行粉碎，清洗后获得鸡肉肉骨，将所述鸡肉肉骨和纯净水加入蒸煮罐内，纯净水为鸡肉肉骨重量的2倍，在0.2mpa压力下以132℃高压蒸煮60min，排出残渣，获得鸡肉骨汤；
步骤2，对所述鸡肉骨汤进行磁化，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入磁化后的所述鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，获得酶剪切液；
具体为：将所述鸡肉骨汤置于强力磁化机，在4700高斯磁场下磁化5s，再将所述鸡肉骨汤冷却至45℃，采用ph调节剂调节所述鸡肉骨汤的ph值，待所述鸡肉骨汤的ph值为5.0，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入调节后的所述鸡肉骨汤，酶制剂在45℃对鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，在酶剪切过程中不断搅拌，搅拌加入所述酶制剂后的鸡肉骨汤6h，直至所述鸡肉骨汤的肽链的酶剪切完毕，对酶剪切完毕的鸡肉骨汤加热至灭酶，再加入肉桂以去除腥味，最后冷却至室温，分离过滤，过滤后获得的滤液为酶剪切液。
其中，所述步骤2中将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入调节后的所述鸡肉骨汤，具体为：将所述第一酶制剂按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述鸡肉骨汤，搅拌12min后按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述第二酶制剂，再搅拌12min后按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述第三酶制剂；所述第一酶制剂为胰蛋白酶，所述第二酶制剂为胰凝乳蛋白酶，所述第三酶制剂为弹性蛋白酶；
步骤3，向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，离心分离后过滤获得上清液，采用酒精激活所述上清液，最后冷却离心分离获得鸡肉小分子肽。
具体为，向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，加热反应，待分离后的所述酶剪切液冷却后，离心分离10min，除去滤渣获得上清液，向所述上清液中加入酒精在18℃下激活24h，直至上清液为浆状，离心分离去除上层清液获得鸡肉小分子肽。
所述步骤3之后还包括：步骤4，将所述鸡肉小分子肽提纯为含盐鸡肉小分子肽，具体为：采用tris-hcl缓冲液将所述鸡肉小分子肽溶鲜并定容至100ml，获得溶液；将所述溶液在2000r/min转速下离心分离10min，收集上层清液；将所述上层清夜转入g-75层析柱过柱层析并采用tris-hcl缓冲液洗脱，获得层析液，收集峰值段为200-280nm的所述层析液并进行冷冻干燥，获得含盐鸡肉小分子肽。
该提纯方法获得的含盐鸡肉小分子肽的纯度≥90％，含量≥20mg/kg体重。
所述步骤3之后还包括：步骤5，将所述鸡肉小分子肽提纯为脱盐鸡肉小分子肽，具体为：采用tris-hcl缓冲液将所述鸡肉小分子肽溶鲜并定容至10ml，获得溶液；将所述溶液在2000r/min转速下离心分离10min，收集上层清液；将所述上层清夜转入g-25层析柱过柱层析并采用三蒸水缓冲液洗脱，获得层析液，收集峰值段为200-250nm的所述层析液并进行冷冻干燥，获得脱盐鸡肉小分子肽。
该提纯方法获得的含盐鸡肉小分子肽的纯度≥98％。
实施例3：
一种提高鸡肉多肽吸收利用率的方法，包括以下步骤：
步骤1，对鸡肉进行清洗粉碎，获得鸡肉肉骨，蒸煮所述鸡肉肉骨，获得鸡肉骨汤；
具体为：去除鸡肉的内脏，然后采用粉碎机对鸡肉进行粉碎，清洗后获得鸡肉肉骨，将所述鸡肉肉骨和纯净水加入蒸煮罐内，纯净水为鸡肉肉骨重量的2倍，在0.2mpa压力下以132℃高压蒸煮60min，排出骨渣，获得鸡肉骨汤；
步骤2，对所述鸡肉骨汤进行磁化，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入磁化后的所述鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，获得酶剪切液；
具体为：将所述鸡肉骨汤置于强力磁化机，在4700高斯磁场下磁化5s，再将所述鸡肉骨汤冷却至50℃，采用ph调节剂调节所述鸡肉骨汤的ph值，待所述鸡肉骨汤的ph值为6.0，然后将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入调节后的所述鸡肉骨汤，酶制剂在50℃对鸡肉骨汤进行肽链的酶剪切，在酶剪切过程中不断搅拌，搅拌加入所述酶制剂后的鸡肉骨汤8h，直至所述鸡肉骨汤的肽链的酶剪切完毕，对酶剪切完毕的鸡肉骨汤加热至灭酶，再加入肉桂以去除腥味，最后冷却至室温，分离过滤，过滤后获得的滤液为酶剪切液。
其中，所述步骤2中将第一酶制剂、第二酶制剂和第三酶制剂依次分阶段加入调节后的所述鸡肉骨汤，具体为：将所述第一酶制剂按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述鸡肉骨汤，搅拌15min后按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述第二酶制剂，再搅拌15min后按所述鸡肉肉骨重量0.01％加入所述第三酶制剂；所述第一酶制剂为胰蛋白酶，所述第二酶制剂为胰凝乳蛋白酶，所述第三酶制剂为弹性蛋白酶；
步骤3，向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，离心分离后过滤获得上清液，采用酒精激活所述上清液，最后冷却离心分离获得鸡肉小分子肽。
具体为，向所述酶剪切液中加入蛋白分离液，加热反应，待分离后的所述酶剪切液冷却后，离心分离10min，除去滤渣获得上清液，向所述上清液中加入酒精在21℃下激活24h，直至上清液为浆状，离心分离去除上层清液获得鸡肉小分子肽。
所述步骤3之后还包括：步骤4，将所述鸡肉小分子肽提纯为含盐鸡肉小分子肽，具体为：采用tris-hcl缓冲液将所述鸡肉小分子肽溶鲜并定容至100ml，获得溶液；将所述溶液在2000r/min转速下离心分离10min，收集上层清液；将所述上层清夜转入g-75层析柱过柱层析并采用tris-hcl缓冲液洗脱，获得层析液，收集峰值段为200-280nm的所述层析液并进行冷冻干燥，获得含盐鸡肉小分子肽。
该提纯方法获得的含盐鸡肉小分子肽的纯度≥90％，含量≥20mg/kg体重。
所述步骤3之后还包括：步骤5，将所述鸡肉小分子肽提纯为脱盐鸡肉小分子肽，具体为：采用tris-hcl缓冲液将所述鸡肉小分子肽溶鲜并定容至10ml，获得溶液；将所述溶液在2000r/min转速下离心分离10min，收集上层清液；将所述上层清夜转入g-25层析柱过柱层析并采用三蒸水缓冲液洗脱，获得层析液，收集峰值段为200-250nm的所述层析液并进行冷冻干燥，获得脱盐鸡肉小分子肽。
该提纯方法获得的含盐鸡肉小分子肽的纯度≥98％。