本发明涉及一种iv型过敏用组合物。进一步详细而言，本发明涉及一种以属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类作为有效成分的、用于iv型过敏、特别是用于预防或改善接触性皮炎的组合物。
背景技术：
：：近年来，由于饮食习惯的变化、大气污染的恶化、过敏原物质、暴露于金属性装饰物等各种原因，花粉症、特异性皮炎、接触性皮炎等过敏显著增加。过敏被认为是基于免疫反应而对生物体的全身或局部造成伤害。而且，过敏大致分为由于血清抗体而引起的体液免疫反应i、ii和iii型过敏、以及因致敏淋巴细胞引起的细胞免疫反应的iv型过敏。iv型过敏也被称为迟发型过敏、细胞免疫、结核菌素型，是由与抗原起特异反应的致敏t细胞引起的。在iv型过敏中，活化巨噬细胞的因子等各种的生理活性物质从与抗原起反应的致敏t细胞游离出，引起周围的组织损伤。iv型过敏有结核菌素反应、接触性皮炎等，这类过敏的皮下反应通常在皮下注射抗原24～48小时后出现发红、硬结。作为对这样的过敏使用的药物，有抗组胺剂、类固醇药等。然而，这些药物被指出显示各种副作用，并不一定说是安全的。在此情况下，近年来，与免疫反应相关、具有抗过敏作用的乳酸菌作为安全性高的抗过敏材料备受瞩目。例如，提出了短乳杆菌(lactobacillusbrevis)等抑制ige抗体产生的乳酸菌(专利文献1)、具有抑制组胺游离效果的罗伊氏乳杆菌(lactobacillusreuteri)(ad0002菌株)的乳酸菌(专利文献2)、激活肠道免疫或i型辅助t细胞的粪肠球菌(enterococcusfaecium)乳酸菌(专利文献3和4)、具有th1免疫增强作用和th2免疫抑制作用的副干酪乳杆菌kw3110菌株的乳酸菌(非专利文献1)等。现有技术文献专利文献专利文献1：日本特开平09-2959号公报；专利文献2：日本特开2000-95697号公报；专利文献3：日本特开2006-67881号公报；专利文献4：日本特开2006-104107号公报。非专利文献非专利文献1：internationalarchivesofallergyandimmunology2004；135:205-215技术实现要素：发明要解决的问题在这样的技术背景下，期望开发以乳酸菌为有效成分的新的过敏用组合物。因此，本发明的技术问题在于，提供有效预防或改善iv型过敏特别是接触性皮炎的以乳酸菌为有效成分的新型组合物。用于解决问题的方案本发明人等以开发用于预防或改善iv型过敏、特别是接触性皮炎的新型组合物为目的，进行了深入研究，结果发现，属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌及其产生的多糖类具有对小鼠接触性皮炎模型的抑制作用，具有预防或改善iv型过敏特别是接触性皮炎的作用，基于该见解进一步反复研究，完成了本发明。本发明的一个方面中，涉及一种用于预防或改善iv型过敏的组合物，该组合物以属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类作为有效成分。本发明的组合物能够优选用于预防或改善接触性皮炎。在本发明的组合物中，优选乳酸菌为来自无花果的乳酸菌，特别优选lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株(保藏号nitebp-02242)或与其等同的乳酸菌。在本发明的组合物中，优选乳酸菌的培养物或发酵物为在凤梨属植物的果汁的存在下培养或发酵乳酸菌而得到的培养物或发酵物。在本发明的组合物中，作为乳酸菌产生的多糖类，可举出具有n-乙酰葡萄糖胺通过α-1,6键连结的结构的中性多糖、或者主要由葡萄糖和甘露糖构成的酸性多糖。本发明的组合物优选为饮食品组合物，作为饮食品，可举出饮料、功能性食品、发酵食品或保健品。此外，本发明的组合物优选为药物组合物。进而，本发明的组合物优选为饲料组合物和化妆品组合物。发明效果本发明的组合物具有对小鼠接触性皮炎模型的抑制作用，能够有效地预防或改善iv型过敏，特别能够用于预防或改善接触性皮炎。本发明的组合物能够用作用于预防或改善接触性皮炎等iv型过敏的饮食品、药品、饲料、化妆品。而且，本发明的组合物以属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类作为有效成分，因此安全性高，能够长期使用，此外，能够廉价地大量供给，其有用性和实用性极高。附图说明图1是lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的显微镜照片。图1的(a)是革兰氏染色显微镜照片、(b)是扫描型电子显微镜(sem)照片。图2是lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的多糖类的阴离子交换色谱(toyopearldeae-650m树脂(tosohcorporation))的分离曲线。使用0mm～500mm梯度浓度的nacl(虚线)使多糖类洗脱，通过苯酚硫酸法在490nm监测各个组分中的多糖类。图3示出将lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的多糖类通过阴离子交换柱色谱进行纯化而得到中性多糖、并将该中性多糖进行h-nmr和c-nmr而得到的各自的nmr曲线。图3的(a)是h-nmr的nmr曲线，(b)是c-nmr的nmr曲线。图4示出根据nmr曲线得到的中性多糖的结构解析结果。根据该结构解析结果可知，lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的中性多糖具有n-乙酰葡萄糖胺通过α-1,6键连结的结构。图5是示出在对小鼠接触性皮炎模型口服给药lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的菌体或多糖类的情况下，对接触性皮炎的抑制作用的图表(图基(tukey)检验)。图6是示出在对小鼠接触性皮炎模型口服给药lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的菌体或多糖类的情况下，对接触性皮炎的抑制作用的图表(采用韦尔奇(welch)方法的t检验)。图7是示出在对小鼠接触性皮炎模型涂敷lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的菌体或多糖类的情况下，对接触性皮炎的抑制作用的图表(图基检验)。图8是示出在对小鼠接触性皮炎模型涂敷lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的菌体或多糖类的情况下，对接触性皮炎的抑制作用的图表(采用韦尔奇方法的t检验)。图9是示出在对小鼠接触性皮炎模型口服给药由lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株产生的发酵凤梨果汁的情况下，对接触性皮炎的改善作用的图表。图10是示出在对小鼠接触性皮炎模型口服给药lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株产生的酸性多糖和中性多糖的情况下，对接触性皮炎的改善作用的图表。图11是示出在对小鼠接触性皮炎模型口服给药lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的产生的酸性多糖和中性多糖的情况下，对小鼠接触性皮炎模型的炎症性细胞因子il-4的表达的抑制作用的图表。图12是示出在对小鼠接触性皮炎模型口服给药lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的产生的酸性多糖和中性多糖的情况下，对小鼠接触性皮炎模型中的血清中的ige水平的上升的抑制作用的图表。图13是示出在对小鼠接触性皮炎模型口服给药lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的产生的酸性多糖和中性多糖的情况下，对小鼠接触性皮炎模型的耳廓炎症的情况进行显微镜观察的结果照片。具体实施方式以下，对本发明提供的以属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类作为有效成分的用于预防或改善iv型过敏的组合物进行详细说明。1.本发明中作为对象的乳酸菌作为本发明对象的乳酸菌是属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌，优选来自无花果的乳酸菌。具体而言，根据本发明，可举出从无花果的叶子中分离鉴定的lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株。该菌株于2016年4月19日在国家技术评估学会专利微生物保藏中心(千叶县木更津市kazusa镰足2-5-8122号室〒292-0818)进行国内保藏，保藏号为nitep-02242，然后基于布达佩斯条约，移交为国际保藏，于2017年5月26日被授予国际保藏的保藏号，为nitebp-02242。lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株如图1的照片所示，是过氧化氢酶阴性的革兰氏阳性杆菌，且具有白色菌落形成性，具有带有条件性异型乳酸发酵特性这样的菌学性质。进而，具有产生多糖类的能力。在本发明中，也将与lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株等同的乳酸菌作为对象。在此，等同的乳酸菌是指属于lactobacillusparacasei的乳酸菌中与lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株同样地具有改善iv型过敏特别是接触性皮炎的作用的乳酸菌。这些等同的乳酸菌能够通过对例如lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株进行突变、基因重组等通常的变异处理技术来得到，此外，也可以是通过选择lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的自然变异菌株等而进行了培育的菌株。2.本发明的有效成分本发明的组合物包含上述的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类作为有效成分。乳酸菌能够通过使用通常所使用的mrs培养基、其改良培养基等，利用液体静置培养等通常使用的培养方法来进行培养。通过在凤梨属植物的果汁或其提取物的存在下培养乳酸菌，能够促进其增殖(国际公开第wo2011/046194号)，此外，通过在酒糟、酒糟提取物或酒糟的酶分解物的存在下培养乳酸菌，也能够促进其增殖(日本特开平3-172171号公报、日本特开平5-15366号公报和日本专利第2835548号公报)。培养乳酸菌后，可以直接将得到的培养物作为有效成分使用，也可以将得到的培养液稀释或浓缩来使用，也可以使用从培养物回收的菌体。此外，只要不损害本发明的效果，也能够在培养后进行加热和冻结干燥等各种追加操作。此外，乳酸菌的菌体可以是在其细胞表层附着有多糖类的活菌，也可以是死菌，也可以是活菌和死菌两者。死菌可以是匀浆，但期望在其表层附着多糖类。此外，乳酸菌的发酵物通常使用葡萄糖等作为营养源，能够根据需要进一步添加酵母提取物、凤梨属植物的果汁、酒糟、烧酒酒糟等植物乳酸菌的增殖促进物质，使其发酵，由此得到发酵物。乳酸菌产生的多糖类能够通过通常的方法从属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的培养物中分离纯化而得到。具体而言，例如能够通过离心分离从属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的培养物中除去菌体，使用乙醇、丙酮等使多糖类从得到的培养物中沉淀，由此得到多糖类。此外，也能够通过离子交换色谱进一步分离纯化而得到。这样得到的乳酸菌产生的多糖类中，有中性多糖和酸性多糖。在本发明中，作为乳酸菌产生的多糖类，具体而言可举出具有n-乙酰葡萄糖胺通过α-1,6键连结的结构的中性多糖，或者主要由葡萄糖和甘露糖构成的酸性多糖。如后述的实施例2记载的那样，该中性多糖能够通过利用阴离子交换色谱将由lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株的培养物得到的多糖类进行分离纯化而得到。根据图3所示的h-nmr和c-nmr的nmr曲线可知，该中性多糖具有n-乙酰葡萄糖胺通过α-1,6键连结的结构。此外，lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株向菌体外分泌主要由葡萄糖和甘露糖构成的酸性多糖。更具体而言，该酸性多糖由葡萄糖、甘露糖、半乳糖和鼠李糖构成，它们的组成比大约为10∶170∶2∶1。3.本发明的组合物本发明的组合物能够以饮食品组合物、药物组合物、饲料组合物、化妆品组合物等各种方式使用。作为饮食品组合物的饮食品，没有特别限定，可示例软饮料、碳酸饮料、营养饮料、果汁饮料、乳酸菌饮料等饮料；这些饮料的浓缩原液、制备用粉末等；冰激凌、果子露冰激凌、刨冰等冷冻甜点；饴糖、软糖、麦片、泡泡糖(chewinggum)、糖果(candy)、口香糖、巧克力、压片糖、点心、饼干、果冻、果酱、奶油和烘焙食品等糕点类；加工乳、乳饮料、发酵乳、酸奶饮料、黄油等乳制品；面包；肠内营养食品、流质食品、婴儿奶粉、运动饮料；果泥等食品；其他功能性食品等。此外，饮食品也可以是保健品，可以是例如颗粒状、粉末状、片剂状的保健品。上述饮食品能够通过向饮食品的原料中添加乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类进行制造、或者能够与通常的饮食品同样地制造。乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类的添加可以在饮食品的制造工序的任一阶段进行。也可以经过添加了乳酸菌的发酵工序来制造饮食品。作为这样的饮食品，可举出乳酸菌饮料、发酵乳等发酵食品等。饮食品组合物中的乳酸菌的菌体或者其培养物或发酵物的含量根据饮食品的方式适当设定，通常在饮食品组合物中，优选以1×106～1×1012cfu/g或1×106～1×1012cfu/ml范围内的含量包含菌体，更优选以1×107～1×1011cfu/g或1×107～1×1011cfu/ml范围内的含量包含菌体。在乳酸菌为死菌的情况下，cfu/g或cfu/ml能够替换为个细胞/g或个细胞/ml。在为乳酸菌产生的多糖类的情况下，优选在饮食品组合物中以多糖类的重量换算通常包含0.001重量％以上、进而包含0.01重量％以上的多糖类。药物组合物通常是将乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类与通常所使用的生理上可接受的液体或固体的制剂载体配合，进行制剂化来使用。药物组合物的剂型没有特别限制，能够示例片剂、丸剂、散剂、溶液剂、混悬剂、乳剂、颗粒剂、胶囊剂、糖浆剂、栓剂、注射剂、软膏剂、贴剂、滴眼剂和滴鼻剂等。本发明的药物组合物制剂中的乳酸菌的菌体或者其培养物或发酵物的含量根据剂型、用法、对象的年龄、性别、疾病的种类、疾病的程度和其他条件适当设定，优选通常以1×106～1×1012cfu/g或1×106～1×1012cfu/ml的范围内的含量包含菌体，更优选以1×107～1×1011cfu/g或1×107～1×1011cfu/ml的范围内的含量包含菌体。在乳酸菌为死菌的情况下，cfu/g或cfu/ml能够替换为个细胞/g或个细胞/ml。在为乳酸菌产生的多糖类的情况下，优选药物组合物中以多糖类的重量换算通常包含0.001重量％以上、进而包含0.01重量％以上的多糖类。本发明的药物组合物的给药时机没有特别限定，能够根据应用对象选择适当的给药时机。此外，可以预防性给药，也可以用于维持疗法。给药方式优选根据制剂形态、给药对象的年龄、性别、其他条件、给药对象的症状的程度等适当决定。本发明的药物组合物在任一情况下均能够1日1次或分多次给药，此外，也可以数日或数周给药1次。作为饲料组合物的饲料，可举出宠物食物、家畜饲料、养鱼饲料等。这样的饲料能够通过在通常的饲料中例如在谷类、粕类、糠类、鱼粉、骨粉、油脂类、脱脂乳粉、乳清(whey)、卤水、矿物质饲料、酵母类等中混合乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类来制造。此外，也可以例如如青贮饲料那样，经过添加了乳酸菌的发酵工序，制造饲料。所制造的饲料能够口服喂食给通常的哺乳动物、家畜类、养鱼类、宠物动物等。此外，在养鱼类的情况下，也能够采用在养鱼场中播撒添加了乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类的发酵物的方法。饲料组合物中的乳酸菌的菌体或者其培养物或发酵物的含量根据饲料的方式、适用对象适当设定，优选以1×106～1×1012cfu/g或1×106～1×1012cfu/ml的范围内的含量包含菌体，更优选以1×107～1×1011cfu/g或1×107～1×1011cfu/ml的范围内的含量包含菌体。在乳酸菌为死菌的情况下，cfu/g或cfu/ml能够替换为个细胞/g或个细胞/ml。在为乳酸菌产生的多糖类的情况下，优选饲料组合物中以多糖类的重量换算通常包含0.001重量％以上、进而包含0.01重量％以上的多糖类。作为本发明的化妆品组合物的化妆品，可举出例如肥皂、沐浴露、洁面乳洗面奶等清洗剂；化妆水(lotion)、润肤霜(vanishingcream)、雪花膏(coldcream)、滋润霜(emollientcream)、按摩霜等乳霜；乳液、美容液等。通过在这些化妆品通常所使用的材料中，添加本发明的乳酸菌的菌体或者其培养物或发酵物或者其产生的多糖类，能够得到本发明的化妆品组合物。在本发明的化妆品组合物中，优选使用例如如下的乳酸菌的发酵蛋清：在打破鸡等鸟类的蛋分离蛋黄而得到的液状的蛋清中，添加本发明的乳酸菌，使其发酵，由此得到的乳酸菌的发酵蛋清。这样的乳酸菌的发酵通常可以使用葡萄糖等作为营养源，且根据需要添加酵母提取物、凤梨果汁、酒糟、烧酒酒糟等植物乳酸菌的增殖促进物质，使其发酵。乳酸菌的发酵蛋清的形态根据配合的化妆品，可举出例如液状、粉末状、奶油状、膏状、果冻状等。本发明的化妆品组合物中使用的乳酸菌的菌体或者其培养物或发酵物的含量根据化妆品的形态、适用对象来适当设定，优选以1×106～1×1012cfu/g或1×106～1×1012cfu/ml的范围内的含量包含菌体，更优选以1×107～1×1011cfu/g或1×107～1×1011cfu/ml的范围内的含量包含菌体。在乳酸菌为死菌的情况下，cfu/g或cfu/ml能够替换为个细胞/g或个细胞/ml。例如，在为乳酸菌的发酵蛋清的情况下，优选发酵蛋清的含量以乳酸发酵蛋清的脱水物换算计通常为0.001重量％以上、进而为0.01重量％以上。在为乳酸菌产生的多糖类的情况下，优选化妆品组合物中以多糖类的重量换算通常包含0.001重量％以上、进而包含0.01重量％以上的多糖类。4.本发明的组合物的用途属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类具有对小鼠接触性皮炎的抑制作用，具有抑制iv型过敏、特别是接触性皮炎的作用。此外，属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类能够抑制炎性细胞因子il-4的表达和血清ige水平的上升，抑制炎症症状。因此，属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类能够用于预防或改善接触性皮炎、过敏性脑炎、特异性皮炎、过敏性肺炎、结核性空洞、麻风病、结节病的上皮样肉芽肿性病变、天花/荨麻疹的皮疹等iv型过敏。特别地，属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类由于具有对接触性皮炎的抑制作用，因此能够用于预防或改善皮肤接触药品等导致的过敏性接触性皮炎等。此外，本发明的组合物由于能够有效地预防或改善iv型过敏，因此能够特别用作维持健康、促进健康用的饮食品的材料。实施例以下，根据实施例对本发明进行进一步详细地说明，但是本发明并不限定于这些实施例。实施例1乳酸菌的分离和鉴定1.乳酸菌样本的分离选择无花果(品种：“とよみつ姫”)的叶、茎和果实，使用已杀菌的镊子和剪刀将其切细切断成2～3mm后，在已杀菌的加有mrs液体培养基的每个试管中，放入5～6个碎片，在28℃和37℃静置培养，直到作为乳酸菌的标准培养基的mrs培养基浑浊(增殖)。此外，能够目视到乳酸菌候选菌株的增殖需要2～4天。使用一次性接种环，将上述乳酸菌候选菌株的各培养液的一部分在mrs琼脂培养基上划线接种后，进行静置培养。在琼脂培养基上形成的菌落中，挑选出全部“颜色、光泽、形状不同的菌落”，在新鲜的mrs琼脂培养基上进行划线接种，纯化菌落。为了对纯化了的各个菌落验证有无产生过氧化氢酶，进行了h2o2测试。该试验法为观察有无产生氧的试验法，上述氧是在菌体暴露于10％的h2o2溶液时引起的、如果过氧化氢酶存在则会生成氧。此外，乳酸菌不产生过氧化氢酶。尝试探索从无花果中分离，结果能够从以无花果的叶作为分离源的菌株中得到1株显示过氧化氢酶阴性的乳酸菌候选菌株。2.分离菌株的鉴定在mrs液体培养基中重新培养上述乳酸菌候选菌株，通过离心分离得到菌体。通过细胞壁溶解酶处理后，使用dnazol试剂，提取基因组dna。按照lane,d.j.(1991).16s/23srrnasequencing.innucleicacidtechniquesinbacterialsystematics、pp.115-175.editedbye.stackebrandt&m.goodfellow.chichester:wiley记载的方法，将基因组dna作为模板，通过使用了27f引物和1525r引物的pcr反应扩增16srdna的部分，使用nucleospin胶/pcr产物纯化试剂盒(macherey-nagelgmbh&co.kg制)，由琼脂糖凝胶回收目标片段。使用大染料终止子循环测序人卵泡抑素快速反应试剂盒ver.3.1(bigdyeterminatorcyclesequencingfsreadyreactionkitver.3.1、thermofisherscientific公司制)进行用于确定碱基序列的染料终止法(dyeterminator)的测序反应，利用abiprism3130xl基因分析仪(abiprism3130xlgeneticanalyzer,thermofisherscientific公司制)进行解析。对解析了的16srdna的碱基序列利用blast程序(blastprogram)进行同源性检测，与dna数据库(ddbj/embl/genbank)的数据库进行比较，由此进行了分离菌株的分类学鉴定。将从无花果的叶中分离出的乳酸菌候选菌株命名为ijh-sone68菌株，与已经录入dna数据库(ddbj/embl/genbank)的“lactobacillusparacaseir094”的菌株中碱基序列的登录编号为“nr_025880”的碱基序列100％一致，因此鉴定为lactobacillusparacasei。该菌株于2016年4月19日在国家技术评估学会专利微生物保藏中心(千叶县木更津市kazusa镰足2-5-8122号室〒292-0818)进行国内保藏，保藏号为nitep-02242，然后基于布达佩斯条约，移交为国际保藏，于2017年5月26日被授予国际保藏的保藏号，为nitebp-02242。3.经分离鉴定过的乳酸菌的细菌学性质经分离鉴定过的上述乳酸菌ijh-sone68菌株如图1的照片所示，是过氧化氢酶阴性的革兰氏阳性杆菌，且具有白色菌落形成性，具有条件性异型乳酸发酵的特性，并且具有产生多糖类的能力。4.经分离鉴定过的乳酸菌的糖类同化能力(1)同化能力的试验方法通过以下的试验方法考察ijh-sone68菌株对49种糖类的同化能力。在mrs液体培养基中静置培养ijh-sone68菌株，直到增殖的静止期。将进行离心分离所得到的菌体使用适量的悬浮介质(biomérieuxsa制)清洗后，最终在2ml的悬浮介质中悬浮。将其一部分加入5ml的悬浮介质，求出麦克法兰浊度成为2的量(n)。接下来，在api50chl培养基(biomérieuxsa制)中添加2n的菌液，将其分注到api50chl试剂盒(biomerieux公司制，49种糖分别涂抹在各个孔底)的各个孔中。最后加一层矿物油，放置在加有灭菌水的托盘中。在37℃培养48小时后，观察各个孔中的色调的变化，由此判断有无同化能力。5.同化能力的试验结果考察ijh-sone68菌株对49种糖类的同化能力的结果如表1所示。[表1]ijh-sone68菌株对糖类的同化能力基质同化能力对照-甘油-赤藓糖醇-d-阿拉伯糖-l-阿拉伯糖-d-核糖+d-木糖-l-木糖-d-核糖醇+甲基-βd-木吡喃糖苷-d-半乳糖+d-葡萄糖+d-果糖+d-甘露糖+l-山梨糖+l-鼠李糖-半乳糖醇-肌醇-d-甘露醇+d-山梨糖醇-甲基-αd-吡喃甘露糖苷-甲基-αd-吡喃葡糖苷-n-乙酰葡萄糖胺+苦杏仁苷-熊果苷-七叶灵+柠檬酸铁+水杨苷+d-纤维二糖+d-麦芽糖+d-乳糖-d-蜜二糖-d-蔗糖+d-海藻糖+菊粉-d-松三糖+d-棉子糖-淀粉-糖原-木糖醇-龙胆二糖+d-松二糖-d-来苏糖-d-塔格糖+d-岩藻糖-l-岩藻糖-d-阿拉伯糖醇-l-阿拉伯糖醇-葡萄糖酸+2-酮葡萄糖酸-5-酮葡萄糖酸-表中，+表示能够同化，-表示不能够同化。实施例21.ijh-sone68菌株产生的多糖类的分离纯化按照以下的方法分离纯化ijh-sone68菌株产生的多糖类。在mrs液体培养基中静置培养ijh-sone68菌株，直到增殖的静止期。将5ml该培养液作为接种培养液，接种于5l的多糖类产生用半合成培养基(其组成在后文叙述)后，在37℃静置培养120小时。将培养液冷却至4℃后，为了使培养液上清液中包含的蛋白质变性、在后续的步骤中作为沉淀而除去，加入202.5ml的100％三氯乙酸水溶液，混合后静置30分钟。通过离心分离除去沉淀，在回收的上清液中添加等量的丙酮进行混合后，在4℃使其静置过夜，由此使ijh-sone68菌株产生的多糖类沉淀。通过离心分离回收沉淀物后，用250ml的70％乙醇进行沉淀物的清洗。使沉淀物风干后，添加75ml的50mmtris-hcl缓冲液(ph8.0)，混合1小时，由此使沉淀物溶解。通过离心分离除去不溶性的异物后，对回收的上清液分别添加750μl的1mg/mldnase溶液(worthington公司)和1mg/mlrnase溶液(nacalaitesque,inc.)，在37℃使其反应8小时。接下来添加750μl的2mg/mlproteinasek溶液(和光纯药工业公司制)，在37℃使其反应16小时。将反应后的溶液冷却至4℃后，为了使添加的各种酶变性、在下一步的离心分离中作为沉淀而除去，添加8.75ml的100％三氯乙酸水溶液，进行混合，在4℃静置1小时。通过离心分离除去沉淀物，对得到的上清液添加262.5ml的100％乙醇，充分混合后，通过离心分离以沉淀物的形式回收ijh-sone68菌株产生的多糖类。用50ml的70％乙醇清洗沉淀物后使其风干，添加适量(约25ml)的纯净水，在4℃静置过夜，由此使多糖类溶解。溶解后的多糖类样本使用10000mwco的超滤单元(merck公司)边将溶剂置换为纯净水，边除去回收了的样本中的单糖类等小分子，得到经过纯化的多糖类样本。将经纯化了的多糖类样本装载于填充了toyopearldeae-650m树脂(tosohcorporation)的开放柱(2.5×22cm)中，进行用于分离纯化中性多糖组分和酸性多糖组分的柱分离操作，上述toyopearldeae-650m树脂预先用50mmtris-hcl缓冲液(ph8.0)平衡。溶液使用相同的缓冲液，流速固定在1ml/min。此外，洗脱液以每6ml回收在不同的试管中。首先，从开始至240分钟之间用相同缓冲液洗脱(试管编号1-40)。接着，在从240分钟的时刻至600分钟的时刻，制作使用了相同缓冲液的0-500mmnacl的浓度梯度，继续洗脱(试管编号41-100)。柱分离谱示于图2。通过苯酚硫酸法(后述)对洗脱在试管中的全部样本确认多糖类的存在后，分别收集该试管内的溶液作为中性多糖组分、酸性多糖组分。各个组分使用10000mwco的超滤单元，边将溶剂置换为纯净水，边除去回收的样本中的单糖类等小分子。由此，分离纯化了中性多糖组分和酸性多糖组分作为ijh-sone68菌株产生的多糖类。多糖类产生用半合成培养基为对kimmelsa、robertsrf.developmentofagrowthmediumsuitableforexopolysaccharideproductionbylactobacillusdelbrueckiissp.bulgaricusrr.int.j.foodmicrobiol.、40、87-92(1998)所记载的培养基进行如下改变。多糖类产生用半合成培养基[g/l]微量元素溶液记载于ketsepw,galinskiea,debontjam.carnitine：anovelcompatiblesoluteinlactobacillusplantarum.arch.microbiol.,192,243-248(1994)，其组成如下。苯酚硫酸法(duboism,gilleska,hamiltonjk,reberspa,smithf.,colorimetricmethodfordeterminationofsugarsandrelatedsubstances.,anal.chem.,28,350-356(1956))将30μl的对象样品与等量的5w/v％苯酚水溶液混合后，加入150μl的浓硫酸使其混合，开始反应。10分钟后立即用冰进行冷却，终止反应。通过测定反应液在490nm的吸光度，测定糖类的浓度。另外，浓度的确定使用了标准曲线，该标准曲线通过将葡萄糖作为标准品进行相同实验来制作。2.胞外中性多糖的结构解析将上述的通过阴离子交换柱色谱(toyopearldeae-650m树脂(tosohcorporation))被纯化了的中性多糖进行h-nmr和c-nmr，得到的各nmr曲线示于图3。根据这些nmr曲线得到的中性多糖的结构解析结果示于图4。根据该结构解析结果可知，ijh-sone68菌株产生的胞外中性多糖具有n-乙酰葡萄糖胺通过α-1,6键连结的结构。3.胞外酸性多糖的糖组成分析通过高效液相色谱(hplc)法测定上述的通过阴离子交换柱色谱被纯化了的酸性多糖的糖组成分析。混合10μl经纯化了的酸性多糖(7.3mg/ml)和60μl的水，制备7倍稀释试样溶液，在试管中采集20μl制备的稀释试样溶液，减压干燥固化，添加100μl的2mo1/l三氟乙酸溶解，进行氮置换，减压封管，在100℃水解6小时，接下来进行减压干燥固化。在得到的残渣中添加200μl的水溶解，使用0.22μm的过滤器过滤，得到测定用试样溶液，用水将得到的测定用试样溶液稀释10倍，得到稀释测定用试样溶液。分析50μl这些测定用试样溶液和稀释测定用试样溶液。使用hplc系统：lc-20a系统(株式会社岛津制作)和荧光分光光度计m-10axl(株式会社岛津制作)作为分析仪器。分析条件如下所述。柱：tsk-gelsugaraxg4.6mmi.d.×15cm(tosohcorporation)柱温：70℃流动相：0.5mo1/l硼酸钾缓冲液，ph8.7流动相流速：0.4ml/min柱后标识：反应试剂：lw/v％精氨酸3w/v％硼酸反应试剂流速：0.5ml/min反应温度：150℃检测波长：ex.320nmem.430nm求出由胞外酸性多糖制备的试样的色谱图和各单糖类的校准曲线数据，通过标准曲线求出胞外酸性多糖的糖成分的试样中浓度。得到的结果示于表2。[表2]胞外酸性多糖的糖成分表中，n.d.表示末检测出。实施例3口服给药ijh-sone68菌株对小鼠接触性皮炎模型的抑制作用按照以下记载的方法考察口服给药在实施例1中得到的ijh-sone68菌株的乳酸菌菌体、以及ijh-sone68菌株的乳酸菌产生的在实施例2中得到的多糖类的情况下，对小鼠接触性皮炎的抑制作用。1.试验方法(1)小鼠试验用样本的制备在mrs培养基中培养ijh-sone68菌株48小时，通过离心分离从得到的培养液中回收菌体，将再次悬浮在纯净水中的菌体作为小鼠试验用的样本(相当于约1×1012cfu/ml)。将该状态的样本作为活菌用的样本，此外将以121℃、20分钟的条件进行了加热杀菌处理的样本用作死菌用的样本。另一方面，使用实施例2记载的方法从在modified-sdm培养基中培养本株时所得到的培养液的上清液中纯化本株产生的细胞外多糖，将所得到的多糖的混合物(实施例2的中性多糖组分和酸性多糖组分的混合物)供给细胞外多糖类给药组(浓度：1mg/ml)。(2)试验中使用的试剂从东京化成工业株式会社购入苦基氯来使用。(3)方法动物使用了雄性balb/cajcl系小鼠(7周龄，日本clea：交付时)。小鼠在饲养笼中饲养5只，在环境调节为温度：20～26℃、湿度：40～60％、照明时间：12小时(8：00～20：00)的动物饲养室中饲养，饵料为固体饲料mf(orientalyeastco.,ltd.)，使其自由摄取。此外，关于饮水，使其自由摄取纯净水。放入小鼠后，驯化7天。驯化饲养后，进行如下的分组(a组：对照组；b组：ijh-sone68菌株活菌悬浮液给药组；c组：ijh-sone68菌株死菌悬浮液给药组；d组：来自ijh-sone68菌株的细胞外多糖给药组)。将此时刻作为day0，从day0开始以1次/日的频率对小鼠连续口服给药样本14天。另外，每1天的给药量为0.20ml/只。在day6，对所有小鼠的四肢(20μl)、胸腹部(100μl)和背部(100μl)分别涂敷7w/v％苦基氯溶液，由此使小鼠记忆抗原信息。在day14，预先利用卡尺测定小鼠右耳廓的厚度，然后在右耳廓的正面和背面分别涂敷20μl的1w/v％苦基氯溶液，引发过敏反应。24小时后(即day15)，测定耳廓的厚度，比较各组间引发前后的差异(△耳廓厚度[mm])。数据用平均值±标准误差表示，组间的显著性差异检验使用图基检验、或采用韦尔奇方法的t检验，p值(危険率)小于0.05判定为有显著差异。通过以上方法，评价各个样本对小鼠接触性皮炎模型有无抑制作用。2.试验结果各组中的△耳廓厚度示于表3。[表3]实验使用的小鼠各个体的耳廓厚度的增加量个体no.a组b组c组d组10.160.140.120.1220.120.120.080.1230.140.120.100.1040.120.100.120.1050.180.10-0.10平均0.1440.1160.1050.108se0.0120.0070.0100.005a组(对照组)、b组(活菌给药组)c组(死菌给药组)、d组(未分离eps给药组)此外，也示出了图5(图基检验)和图6(采用韦尔奇方法的t检验)。根据图5可确认，与对照组相比，c组和d组中显著抑制了由于炎症引起的耳廓厚度的增加(p＜0.05)。此外，根据图6可确认，在仅将对照组与b组比较的情况下，有抑制耳廓厚度的增加的倾向(p＜0.1)。根据以上结果可知，在抗原致敏前后反复口服给药ijh-sone68菌株菌体和由本株产生的细胞外多糖的情况下，显示出改善由苦基氯诱导的接触性皮炎模型的症状。实施例4涂敷ijh-sone68菌株产生的多糖类对小鼠接触性皮炎模型的抑制作用通过以下记载的方法考察在涂敷实施例1中得到的ijh-sone68菌株的乳酸菌产生的、实施例2中得到的多糖类情况下，对小鼠接触性皮炎的抑制作用。1.试验方法(1)小鼠试验用样本的制备使用实施例2的方法从在modified-sdm培养基中培养ijh-sone68菌株时得到的培养液的上清液中纯化本株产生的细胞外多糖，将得到的多糖混合物供给实验(1mg/ml)。另外，作为已有的抗炎症药的比较对照使用的甘草酸二钾水溶液也为相同浓度。(2)试验中使用的试剂从东京化成工业株式会社购入苦基氯来使用。(3)方法动物使用了雄性balb/cajcl系小鼠(7周龄，日本clea：交付时)。小鼠在饲养笼中饲养5只，在环境调节至温度：20～26℃、湿度：40～60％、照明时间：12小时(8：00～20：00)的动物饲养室中饲养，饵料为固体饲料mf(orientalyeastco.,ltd.)，使其自由摄取。此外，关于饮水，使其自由摄取纯净水。放入小鼠后，驯化7天。驯化饲养后，进行如下的分组(a组：对照组；b组：甘草酸二钾涂敷组；c组：未分离eps(实施例2中得到的中性多糖组分和酸性多糖组分的混合物)涂敷组；d组：中性eps(实施例2中得到的中性多糖组分)涂敷组；e组：酸性eps(实施例2中得到的酸性多糖组分)涂敷组)。将此时刻作为day0，对所有小鼠的四肢(20μl)和胸部(150μl)分别涂敷7(w/v)％苦基氯溶液，由此使小鼠记忆抗原信息。在day6，预先利用卡尺测定小鼠右耳廓的厚度，然后在右耳廓的正面和背面分别涂敷20μl的1(w/v)％苦基氯溶液，引发过敏反应。涂敷2小时后，对各组的小鼠右耳廓的正反两面分别涂敷20μl的各样本。进而，在18小时后(day7)，测定耳廓的厚度，比较各组间引起前后的不同(△耳廓厚度[mm])。数据用平均值±标准误差表示，组间的显著性差异检验使用图基检验、或采用韦尔奇方法的t检验，p值(危険率)小于0.05判定为有显著差异。通过以上方法，评价各样本对小鼠接触性皮炎模型有无抑制作用。2.试验结果各组中的△耳廓厚度示于表4。[表4]实验使用的小鼠各个体的耳廓厚度的增加量个体no.a组b组c组d组e组10.240.220.160.220.2020.220.220.240.260.2230.280.220.180.080.2440.320.200.180.160.2050.340.060.200.220.16平均0.280.1840.1920.1880.204se0.0230.0310.0140.0310.013a组(对照组)、b组(甘草酸二钾涂敷组)c组(未分离eps涂敷组)、d组(中性eps涂敷组)e组(酸性eps涂敷组)此外，也示出了图7(图基检验)和图8(采用韦尔奇方法的t检验)。根据图7可确认，与对照组相比，b组和d组有抑制由于炎症引起的耳廓厚度的增加的倾向(p＜0.1)。此外，根据图8可确认，在分别比较对照组和各组的情况下，耳廓厚度的增加被显著地抑制(p＜0.05)。根据以上结果可知，通过将由ijh-sone68菌株产生的细胞外多糖类涂敷在炎症部位，显示出改善由苦基氯诱导的接触性皮炎模型的症状。实施例5ijh-sone68菌株的发酵液对小鼠接触性皮炎模型的改善作用通过以下记载的方法考察在口服给药实施例1中得到的ijh-sone68菌株的发酵凤梨果汁的情况下，对小鼠接触性皮炎的改善作用。1.试验方法动物使用了雄性balb/cajcl系小鼠(7周龄，日本clea：交付时)。小鼠在饲养笼中饲养5只，在环境调节为温度：20～26℃、湿度：40～60％、照明时间：12小时(8：00～20：00)的动物饲养室中饲养，饵料为固体饲料mf(orientalyeastco.，ltd.)，使其自由摄取。此外，关于饮水，使其自由摄取纯净水。放入小鼠后，驯化7日。驯化饲养后，进行如下的分组。a组：阳性对照组(灭菌蒸馏水给药组)b组：未发酵凤梨果汁给药组c组：由ijh-sone68菌株产生的发酵凤梨果汁原液给药组d组：由ijh-sone68菌株产生的发酵凤梨果汁原液的10倍稀释液给药组e组：由ijh-sone68菌株产生的发酵凤梨果汁原液的100倍稀释液给药组在此，发酵凤梨果汁原液是指在100％凤梨果汁(包含1w/v％的烧酒蒸馏残渣)中培养ijh-sone68菌株48小时得到的发酵液。将使用灭菌蒸馏水稀释该原液至10倍的稀释液作为10倍稀释液，稀释至100倍的稀释液作为100倍稀释液。将进行上述分组的时刻作为day0，从day0开始以1次/日的频率对小鼠连续口服给药上述的各个样本14天。另外，每1天的给药量为0.20ml/只。在day6，对所有小鼠的四肢(20μl)、胸腹部(100μl)和背部(100μl)分别涂敷7w/v％苦基氯溶液，由此使小鼠记忆抗原信息。在day13，预先利用卡尺测定小鼠右耳廓的厚度，然后在右耳廓的正面和背面分别涂敷20μl的1w/v％苦基氯溶液，由此引发过敏反应。24小时后(day14)，测定耳廓的厚度，比较各组间引发前后的差异(△耳廓厚度[mm])。数据用平均值±标准误差表示，组间的显著性差异检验使用图基-克雷默法(tukey-kramer法)，p值(危険率)小于0.05判定为有显著差异。通过以上方法，评价各个样本对小鼠接触性皮炎模型有无改善作用。2.试验结果各组中的△耳廓厚度示于表5和图9。[表5]耳廓厚度的变化量(δ耳廓厚度(mm))和标准误差(se)个体no.a组b组c组d组e组10.160.180.100.160.1620.180.160.120.160.1830.160.160.120.100.1440.160.140.100.160.1250.140.180.100.140.12平均0.1600.1640.1080.1440.144se0.0060.0070.0050.0120.012根据表5和图9可知，与阳性对照组(a组)相比，发酵果汁给药组(c组)显著地抑制了由炎症引起的耳廓厚度的增加(p＜0.05)。此外，发酵果汁的稀释样本d组和e组与对照组相比，增加的值低。此外，未发酵的凤梨果汁给药组b组完全未确认到改善效果。根据以上结果可知，通过反复口服给药ijh-sone68菌株发酵的凤梨果汁，能够预防、改善由苦基氯诱导的接触性皮炎模型的症状。实施例6ijh-sone68菌株产生的酸性多糖和中性多糖对小鼠接触性皮炎模型的改善作用通过测定以下记载的小鼠接触性皮炎模型中的耳廓厚度变化、测定炎症细胞因子il-4和血清ige水平、以及观察耳廓的炎症来考察ijh-sone68菌株产生的酸性多糖和中性多糖对小鼠接触性皮炎模型的改善作用。1.耳廓厚度变化的测定(1)试验方法动物使用了雄性balb/cajcl系小鼠(7周龄，日本clea：交付时)。小鼠在饲养笼中饲养5只，在环境调节为温度：20～26℃、湿度：40～60％、照明时间：12小时(8：00～20：00)的动物饲养室中饲养，饵料为固体饲料mf(orientalyeastco.，ltd.)，使其自由摄取。此外，关于饮水，使其自由摄取纯净水。放入小鼠后，驯化7天。驯化饲养后，进行如下的分组。a组：阴性对照组(仅用常规饲料饲养的组)b组：阳性对照组(灭菌蒸馏水给药组)c组：纯化了的酸性eps溶液(1mg/ml)给药组d组：纯化了的酸性eps溶液(0.1mg/ml)给药组e组：纯化了的中性eps溶液(1mg/ml)给药组f组：纯化了的中性eps溶液(0.1mg/ml)给药组在此，c组的酸性eps溶液和e组的中性eps溶液分别为在实施例2中得到的酸性多糖组分和中性多糖组分，将它们用灭菌蒸馏水稀释而得到的稀释液分别是d组的酸性eps溶液和f组的中性eps溶液。将进行上述的分组的时刻作为day0，从day0开始以1次/日的频率对小鼠连续口服给药样本14日。另外，每1天的给药量为0.20ml/只。在day6，对所有小鼠的四肢(20μl)、胸腹部(100μl)和背部(100μl)分别涂敷7w/v％苦基氯溶液，由此使小鼠记忆抗原信息。在day13，预先利用卡尺测定小鼠右耳廓的厚度，然后在右耳廓的正面和背面分别涂敷20μl的1w/v％苦基氯溶液，引发过敏反应。24小时后(即day14)，测定耳廓的厚度，比较各组间引发前后的差异(△耳廓厚度[mm])。数据用平均值±标准误差表示，组间的显著性差异检验使用图基-克雷默法，p值(危険率)小于0.05判定为有显著差异。通过以上方法，评价各个样本对小鼠接触性皮炎模型有无抑制作用。(2)试验结果b～f组中的△耳廓厚度示于表6和图10。[表6]耳廓厚度的变化量(δ耳廓厚度(mm))和标准误差(se)个体no.b组c组d组e组f组10.160.120.140.140.1420.200.100.140.160.1230.200.140.160.140.1440.160.100.140.160.1850.220.100.140.140.18平均0.1880.1120.1440.1480.152se0.0120.0080.0040.0050.012根据表6和图10可知，与阳性对照组(b组)相比，在酸性eps溶液给药组中，1mg/ml(c组)和0.1mg/ml(d组)的任一浓度均显著地抑制了由炎症引起的耳廓厚度的增加(分别p＜0.01和p＜0.05)。此外，在中性eps溶液给药组中，1mg/ml的浓度(e组、p＜0.05)确认到有显著地抑制，即使0.1mg/ml的浓度(f组)也抑制了由炎症引起的耳廓厚度的增加。根据以上的结果可知，通过反复口服给药由ijh-sone68菌株产生的酸性多糖和中性多糖，能够预防、改善由苦基氯诱导的接触性皮炎模型的症状，特别地，其效果教导了更能够使用酸性多糖。2.炎症细胞因子il-4和血清ige水平的测定。(1)试验方法在进行上述1的试验方法记载的耳廓厚度的测定后，使小鼠安乐死，在安乐死后，切除各组小鼠引发炎症的右耳廓并回收，使用nucleospinrnaplus试剂盒(macherey-nagel公司制)提取mrna。通过revertraaceqpcrrtmastermixwithgdnaremover试剂盒(toyobo公司制)由提取的mrna样本合成cdna。将cdna作为模板，通过定量rt-pcr法比较炎症引起部位的炎症细胞因子il-4的mrna表达量。另外，定量rt-pcr使用kapasybrfastqpcrmastermix(nippongneticsco.，ltd.制)，通过pikorealreal-timepcrsystem装置(thermofisherscientific公司制)进行。此外，从安乐死后回收的血液中回收血清，通过使用了mouseigeelisadevelopmentkit(hrp)(mabtech公司制)的elisa法测定血清中的ige浓度。各数据用平均值±标准误差表示，组间的显著性差异检验使用图基-克雷默法，p值(危険率)小于0.05判定为存在显著差异(以下记载的图11和图12仅记录与阳性对照组的显著性差异)。(2)试验结果a～f组中的il-4的mrna的表达量(相对于a组il-4mrna的相对表达量)示于表7和图11。[表7]il-4的mrna的表达量和相对于a组il-4的mrna的相对表达量个体no.a组b组c组d组e组f组10.336.202.540.611.891.4821.439.031.651.251.143.6331.182.444.551.573.263.6440.892.931.312.912.402.1751.165.052.181.711.32-平均1.005.132.441.612.002.73se0.191.190.570.380.380.48根据表7和图11可知，炎症细胞因子il-4的mrna的转录由于引发炎症而在阳性对照组(b组)中显著上升(p＜0.01)，在多糖各个摄取组中，确认到与阳性对照组(b组)相比显著降低(d组和e组、分别为p＜0.01和p＜0.05)或有降低倾向(c组，p＜0.1)。a～f组中的血清中的ige浓度(ng/ml)示于表8，a～f组中的血清中的ige浓度相对于a组的相对值示于表9，将该相对值图形化的结果示于图12。[表8]血清中的ige浓度(ng/ml)个体no.a组b组c组d组e组f组1210.2627.0477.0375.7376.8424.22349.4485.3361.2388.2189.2486.23461.1596.3334.5331.0331.2408.74396.8518.1528.1397.3283.2270.65258.9657.7206.7429.5287.1549.2平均335.3576.9381.5384.3293.5427.8se45.4332.6156.4816.0431.1346.49[表9]血清中的ige浓度相对于a组的相对值(/a组)a组b组c组d组e组f组平均1.001.721.141.150.881.28se0.140.100.170.050.090.14根据表8和9以及图12可知，确认到与il-4的情况同样地，在阳性对照组(b组)中血清中的ige浓度显著上升，在多糖的各个摄取组(特别是c～e组)中，与阳性对照组相比显著降低。根据以上的结果可知，通过反复口服给药由ijh-sone68菌株产生的酸性多糖和中性多糖，能够抑制由苦基氯诱导的接触性皮炎模型小鼠的炎症细胞因子il-4的表达和血清ige水平的上升。3.耳廓的炎症观察(1)试验方法在进行上述1的试验方法记载的耳廓厚度的测定后，使小鼠安乐死，在安乐死后，切除a～f组的小鼠引发炎症的右耳廓并回收，在10％福尔马林液中固定后，包埋在石蜡中，制作组织切片。切片进行伊红(hematoxylin-eosin，he)染色，在显微镜下观察炎症的状况。结果示于图13。由图13可确认，与阴性对照组(a组)相比，阳性对照组(b组)中表皮层(ep)变薄，另一方面由于炎症，真皮层(dm)厚度明显增加。可认为该炎症症状与由于给药各多糖样本使得耳廓厚度减少成比例地得到抑制。根据上述详细的说明能够明确可知，根据本发明，可提供：[1]一种组合物，其用于预防或改善iv型过敏，以lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株和属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类作为有效成分。[2]根据上述[1]所述的组合物，其用于预防或改善接触性皮炎。[3]根据上述[1]或[2]所述的组合物，乳酸菌为来自无花果的乳酸菌。[4]根据上述[1]～[3]中任一项所述的组合物，乳酸菌为lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株(保藏号nitebp-02242)或与其等同的乳酸菌。[5]根据上述[1]～[4]中任一项所述的组合物，培养物或发酵物为在凤梨属植物的果汁的存在下培养或发酵乳酸菌而得到的培养物或发酵物。[6]根据上述[1]～[4]中任一项所述的组合物，多糖类为具有n-乙酰葡萄糖胺通过α-1,6键连结的结构的中性多糖。[7]根据上述[1]～[4]中任一项所述的组合物，多糖类为主要由葡萄糖和甘露糖构成的酸性多糖。[8]根据上述[1]～[7]中任一项所述的组合物，组合物为饮食品组合物。[9]根据上述[8]所述的组合物，饮食品为饮料、功能性食品、发酵食品或保健品。[10]根据上述[1]～[7]中任一项所述的组合物，组合物为药物组合物。[11]根据上述[1]～[7]中任一项所述的组合物，组合物为饲料组合物。[12]根据上述[1]～[7]中任一项所述的组合物，组合物为化妆品组合物。[13]一种组合物在用于预防或改善iv型过敏中的用途，所述组合物的有效成分为lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株和属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类。[14]根据上述[13]所述的用途，组合物用于预防或改善接触性皮炎。[15]根据上述[13]或[14]所述的用途，乳酸菌为来自无花果的乳酸菌。[16]根据上述[13]～[15]中任一项所述的用途，乳酸菌为lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株(保藏号nitebp-02242)或与其等同的乳酸菌。[17]根据上述[13]～[16]中任一项所述的用途，培养物或发酵物为在凤梨属植物的果汁的存在下培养或发酵乳酸菌而得到的培养物或发酵物。[18]根据上述[13]～[16]中任一项所述的用途，多糖类为具有n-乙酰葡萄糖胺通过α-1,6键连结的结构的中性多糖。[19]根据上述[13]～[16]中任一项所述的用途，多糖类为主要由葡萄糖和甘露糖构成的酸性多糖。[20]根据上述[13]～[19]中任一项所述的用途，组合物为饮食品组合物。[21]根据上述[20]所述的用途，饮食品为饮料、功能性食品、发酵食品或保健品。[22]根据上述[13]～[19]中任一项所述的用途，组合物为药物组合物。[23]根据上述[13]～[19]中任一项所述的用途，组合物为饲料组合物。[24]根据上述[13]～[19]中任一项所述的用途，组合物为化妆品组合物。[25]一种预防或改善对象iv型过敏的方法，该方法包含将组合物应用于有需要的对象，该组合物包含lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株和属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或者其产生的多糖类作为有效成分。[26]根据上述[25]所述的方法，其预防或改善接触性皮炎。[27]根据上述[25]或[26]所述的方法，乳酸菌为来自无花果的乳酸菌。[28]根据上述[25]～[27]中任一项所述的方法，乳酸菌为lactobacillusparacaseiijh-sone68菌株(保藏号nitebp-02242)或与其等同的乳酸菌。[29]根据上述[25]～[28]中任一项所述的方法，培养物或发酵物为在凤梨属植物的果汁的存在下培养或发酵乳酸菌而得到的培养物或发酵物。[30]根据上述[25]～[28]中任一项所述的方法，多糖类为具有n-乙酰葡萄糖胺通过α-1,6键连结的结构的中性多糖。[31]根据上述[25]～[28]中任一项所述的方法，多糖类为主要由葡萄糖和甘露糖构成的酸性多糖。[32]根据上述[25]～[31]中任一项所述的方法，组合物为饮食品组合物。[33]根据上述[32]所述的方法，饮食品为饮料、功能性食品、发酵食品或保健品。[34]根据上述[25]～[31]中任一项所述的方法，组合物为药物组合物。[35]根据上述[25]～[31]中任一项所述的方法，组合物为饲料组合物。[36]根据上述[25]～[31]中任一项所述的方法，组合物为化妆品组合物。产业上的可利用性如以上详细说明的，本发明的组合物能够有效地预防或改善iv型过敏，特别能够用于预防或改善接触性皮炎。本发明的组合物能够作为用于预防或改善接触性皮炎等iv型过敏的饮食品、医药品、饲料、化妆品来使用。而且，本发明的组合物由于以属于副干酪乳杆菌(lactobacillusparacasei)的乳酸菌的菌体、其培养物或发酵物或其产生的多糖类作为有效成分，因此安全性高，能够长期使用，并且能够廉价地大量供给，其有用性和实用性极高。当前第1页12当前第1页12