1.本发明涉及了营养保健食品技术领域，特别涉及了一种益生菌组合物及其制备方法。
背景技术：
2.人类肠道是一个多元化和充满活力的微生态系统，拥有1000
–
1150种约100万亿细菌，是人体细胞数量的10倍。在这个空间中它们与人类相互作用，肠道菌群与人体长期互作、共同进化，帮助宿主消化吸收食物中的营养物质、代谢宿主肠道中产生的有毒废物，同时产生人体必需的氨基酸、维生素、短链脂肪酸等功能物质为宿主所用。其中，以乳酸菌为代表的益生菌可以调节人体肠道菌群结构、抑制致病菌在肠道中的定殖，同时帮助宿主建立健康的肠黏膜保护层，增强肠道屏障作用，增强宿主的免疫系统，具有积极作用。
3.而人体肠道内的益生菌丰度，随着人年龄的增长逐渐降低，老年人肠道内益生菌数量与青少年时期相比约下降至原来的1/1000~ 1/100；同时，由于广谱和强力的抗菌素的广泛应用，人体肠道内的益生菌遭受严重破坏，肠道菌群发生紊乱，抵抗力逐步下降，导致诸如糖尿病、肠易激综合征等多种疾病反复发作，身体健康受到极大威胁，由此可见，维护健康的肠道菌群平衡状态对维持机体健康十分关键。
4.人体肠道菌群结构复杂，导致健康人体肠道菌群差异的主要因素包括人体的基因型、饮食差异、生活方式、环境因素等。近年来，市面上益生菌产品种类繁多，开发一款与中国人体肠道菌群特点相适应的益生菌产品显得尤为迫切。
技术实现要素：
5.本发明目的在于提供一种更适合调节中国人肠道菌群平衡的益生菌组合物及其制备方法。
6.本发明技术方案如下：一种益生菌组合物，其特征在于包含下述重量份的原料制成：干酪乳杆菌zhang 0.4-8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8-8重量份，植物乳杆菌p9 0.4-8重量份。
7.优选，所述组合物包含干酪乳杆菌zhang 0.8-4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 4-7重量份，植物乳杆菌p9 0.8-4重量份。
8.更优选，所述组合物包含干酪乳杆菌zhang 1重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 1重量份。
9.本发明的组合物原料进一步包含益生元；优选，所述组合物原料进一步包含益生元32-52重量份；更优选，所述组合物原料进一步包含益生元36-50重量份；特别优选，所述组合物原料进一步包含益生元45重量份。
10.本发明的组合物原料进一步包含果蔬粉和/或甜味剂；优选，本发明的组合物原料进一步包含果蔬粉8-24重量份和/或甜味剂8-22重量份；更优选，所述组合物原料进一步包含果蔬粉10-20重量份和/或甜味剂12-20重量份；特别优选，所述组合物原料进一步包含果
蔬粉18重量份和/或甜味剂16重量份。
11.在本发明的一个优选实施方案中，本发明的组合物包含下述重量份原料制成：干酪乳杆菌zhang 0.4-8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8-8重量份，植物乳杆菌p9 0.4-8重量份，益生元32-52重量份，果蔬粉8-24重量份和甜味剂8-22重量份；优选的，干酪乳杆菌zhang 0.8-4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 4-7重量份，植物乳杆菌p9 0.8-4重量份，益生元36-50重量份，果蔬粉10-20重量份和甜味剂12-20重量份；更优选的，干酪乳杆菌zhang 1重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 1重量份，益生元45重量份，果蔬粉18重量份和甜味剂16重量份。
12.本发明组合物中所述干酪乳杆菌zhang (lactobacillus casei zhang) 、动物双歧杆菌乳亚种v9(bifidobacterium animalis subsp .lactis v9)和植物乳杆菌p9(lactobacillus plantarum p9)均在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心(国家专利局指定专利微生物保藏中心)保藏，地址：中国北京。其中，干酪乳杆菌zhang的微生物保藏编号为cgmcc no .5469，保藏日期为2011年11月18日；动物双歧杆菌乳亚种v9的保藏号为cgmcc no.5470，保藏日期为2011年11月18日；植物乳杆菌p9的保藏号为 cgmcc no.16662，保藏时间为2018年6月22日。
13.本发明所述干酪乳杆菌zhang(lactobacillus casei zhang)是从内蒙古锡林郭勒大草原酸马奶样品中分离得到1株益生菌，具有降血脂、免疫调节、抗氧化、拮抗肠道病原菌生长等益生功能；本发明所述动物双歧杆菌乳亚种v9(bifidobacterium animalis subsp .lactis v9)是从健康蒙古族儿童粪便中分离得到1株双歧杆菌，具有缓解便秘和急慢性腹泻的益生功能。
14.本发明所述植物乳杆菌p9(lactobacillus plantarum p9)，是从内蒙古巴彦淖尔自然发酵酸粥分离得到1株益生菌，具有调节肠道菌群、降低体内炎症和过敏反应等益生功能。
15.本发明所述组合物中干酪乳杆菌zhang活菌数量≥0.5
×
1010cfu/g，动物双歧杆菌乳亚种v9活菌数量≥1.5
×
1010cfu/g，植物乳杆菌p9≥0.5
×
1010cfu/g，本技术人发现，所述益生菌组合物中的活菌数含量在上述范围内能够保证复合益生组合物充分发挥益生功效。
16.本发明所述组合物中干酪乳杆菌zhang为干酪乳杆菌zhang冻干菌粉，所述动物双歧杆菌乳亚种v9为动物双歧杆菌乳亚种v9冻干菌粉，所述植物乳杆菌p9为植物乳杆菌p9冻干菌粉。
17.本发明所述益生元包括低聚半乳糖、菊粉、低聚果糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖、低聚乳糖、低聚壳聚糖、大豆低聚糖和/或聚葡萄糖，优选低聚半乳糖和菊粉。
18.本发明所述益生菌组合物中还包括果蔬粉和甜味剂，其中，所述果蔬粉包括柳橙粉、山楂粉、蓝莓粉、草莓粉、蔓越莓粉、樱桃粉、苹果粉、香蕉粉、木瓜粉、芒果粉、火龙果粉、南瓜粉、胡萝卜粉、葡萄粉、石榴粉、哈密瓜粉、枸杞粉、红枣粉和/或猕猴桃粉，优选柳橙粉和山楂粉；所述甜味剂包括白砂糖、麦芽糖醇、赤藓糖醇、葡萄糖、果糖、三氯蔗糖、麦芽糖、淀粉糖、乳糖、甜菊糖、阿斯巴甜、ak糖、糖精钠和/或甜蜜素，优选麦芽糖醇。
19.具体的，在本发明的一个优选实施方案中，本发明的组合物包含下述重量份原料
制成：干酪乳杆菌zhang 0.4-8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8-8重量份，植物乳杆菌p9 0.4-8重量份，低聚半乳糖26-40重量份，菊粉6-12重量份，柳橙粉8-24重量份和麦芽糖醇8-22重量份；优选的，干酪乳杆菌zhang 0.8-4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 4-7重量份，植物乳杆菌p9 0.8-4重量份，低聚半乳糖30-39重量份，菊粉8-11重量份，柳橙粉10-20重量份和麦芽糖醇12-20重量份；更优选的，干酪乳杆菌zhang 1重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 1重量份，低聚半乳糖35重量份，菊粉10重量份，柳橙粉18重量份和麦芽糖醇16重量份。
20.本发明组合物由下述工艺方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 10-20r/min，混合时间为 30-50min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在10%～60%。
21.目前研究表明，不同种的益生菌基因组差别较大，即便是同种益生菌的不同菌株之间也存在差异性，原因在于同种益生菌的不同菌株含有或表达不同的功能基因，因此可发挥不同的益生功效。本发明益生菌组合物的所有菌株均来源于中国，乳双歧杆菌v9能够预防和治疗便秘、腹泻，调节肠道菌群平衡，干酪乳杆菌zhang能够调节肠道稳态，调节肠道菌群年轻化，植物乳杆菌p9能够抑制致病菌，提升肠道菌群稳定性，本品将三种菌进行复配，且添加量≥250亿cfu/g，能够很好的起到调节肠道菌群的作用。
具体实施方式
22.实施例1称取原料干酪乳杆菌zhang 0.4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8重量份，植物乳杆菌p9 0.4重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 10r/min，混合时间为 30min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在30%。
23.实施例2称取原料干酪乳杆菌zhang 0.8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 4重量份，植物乳杆菌p9 0.8重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 35min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在10%。
24.实施例3称取原料干酪乳杆菌zhang 4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 7重量份，植物乳杆菌p9 4重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 15r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在60%。
25.实施例4称取原料干酪乳杆菌zhang 1重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 1重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在30%。
26.实施例5
称取原料干酪乳杆菌zhang 8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 8重量份，植物乳杆菌p9 8重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 15r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在60%。
27.实施例6称取原料干酪乳杆菌zhang 0.4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8重量份，植物乳杆菌p9 0.4重量份，低聚果糖15重量份，大豆低聚糖17重量份，蓝莓粉8重量份和三氯蔗糖8重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 10r/min，混合时间为 30min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在30%。
28.实施例7称取原料干酪乳杆菌zhang 0.8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 4重量份，植物乳杆菌p9 0.8重量份，低聚异麦芽糖18重量份、低聚乳糖18重量份，蔓越莓粉3重量份，樱桃粉7重量份和甜菊糖6重量份、阿斯巴甜6重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 35min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在10%。
29.实施例8称取原料干酪乳杆菌zhang 4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 7重量份，植物乳杆菌p9 4重量份，低聚半乳糖25重量份，低聚果糖25重量份，香蕉粉7重量份，芒果粉11重量份和麦芽糖醇16重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 15r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在60%。
30.实施例9称取原料干酪乳杆菌zhang 1重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 1重量份，低聚半乳糖35重量份，菊粉10重量份，柳橙粉18重量份和麦芽糖醇16重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在30%。
31.实施例10称取原料干酪乳杆菌zhang 8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 8重量份，植物乳杆菌p9 8重量份，低聚壳聚糖20重量份，大豆低聚糖18重量份，聚葡萄糖14重量份，南瓜粉8重量份，胡萝卜粉12重量份，葡萄糖9重量份，果糖11重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 15r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在60%。
32.实施例11称取原料干酪乳杆菌zhang 1重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 4重量份，植物乳杆菌p9 0.4重量份，低聚半乳糖40重量份，菊粉12重量份，葡萄粉10重量份，石榴粉14重量份，麦芽糖6重量份，淀粉糖6重量份，乳糖10重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 20r/min，混合时间为 50min，生
产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在20%。
33.实施例12称取原料干酪乳杆菌zhang 4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 1重量份，低聚半乳糖26重量份，菊粉8重量份，柳橙粉9重量份，山楂粉9重量份，麦芽糖醇6重量份，淀粉糖6重量份，白砂糖4重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 18r/min，混合时间为 35min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在20%。
34.实施例13称取原料干酪乳杆菌zhang 1重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8重量份，植物乳杆菌p9 1重量份，低聚半乳糖26重量份，菊粉6重量份，柳橙粉9重量份，山楂粉9重量份，麦芽糖醇6重量份，淀粉糖6重量份，白砂糖4重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 18r/min，混合时间为 35min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在20%。
35.实施例14称取原料干酪乳杆菌zhang 4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8重量份，植物乳杆菌p9 0.4重量份，低聚半乳糖25重量份，菊粉20重量份，柳橙粉18重量份和麦芽糖醇16重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在30%。
36.实施例15称取原料干酪乳杆菌zhang 8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 1重量份，低聚半乳糖25重量份，菊粉20重量份，山楂粉18重量份和麦芽糖醇16重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在30%。
37.实施例16称取原料干酪乳杆菌zhang 8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 8重量份，植物乳杆菌p9 0.4重量份，低聚半乳糖25重量份，菊粉20重量份，山楂粉18重量份和麦芽糖醇16重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在50%。
38.实施例17称取原料干酪乳杆菌zhang 0.8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 8重量份，低聚半乳糖30重量份，菊粉8重量份，山楂粉18重量份和麦芽糖醇16重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在50%。
39.实施例18称取原料干酪乳杆菌zhang 8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8重量份，植物乳杆菌
p9 0.4重量份，低聚壳聚糖20重量份，大豆低聚糖18重量份，聚葡萄糖14重量份，南瓜粉8重量份，胡萝卜粉12重量份，葡萄糖9重量份，果糖11重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 15r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在60%。
40.实施例19称取原料干酪乳杆菌zhang 4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 0.8重量份，低聚异麦芽糖18重量份、低聚乳糖18重量份，蔓越莓粉3重量份，樱桃粉7重量份和甜菊糖6重量份、阿斯巴甜6重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 16r/min，混合时间为 35min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在25%。
41.实施例20称取原料干酪乳杆菌zhang 0.4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 0.8重量份，植物乳杆菌p9 0.4重量份，低聚果糖15重量份，大豆低聚糖17重量份，蓝莓粉8重量份和草莓粉8重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 10r/min，混合时间为 30min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在30%。
42.实施例21称取原料干酪乳杆菌zhang 0.8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 4重量份，植物乳杆菌p9 0.8重量份，低聚异麦芽糖18重量份、低聚乳糖18重量份，甜菊糖9重量份、阿斯巴甜13重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 35min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在10%。
43.实施例22称取原料干酪乳杆菌zhang 4重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 7重量份，植物乳杆菌p9 4重量份，低聚半乳糖25重量份，低聚果糖25重量份，香蕉粉23重量份，芒果粉11重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 15r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在60%。
44.实施例23称取原料干酪乳杆菌zhang 1重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 6重量份，植物乳杆菌p9 1重量份，低聚半乳糖35重量份，菊粉10重量份，麦芽糖醇34重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 12r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在30%。
45.实施例24称取原料干酪乳杆菌zhang 8重量份，动物双歧杆菌乳亚种v9 8重量份，植物乳杆菌p9 8重量份，低聚壳聚糖20重量份，大豆低聚糖18重量份，聚葡萄糖14重量份，柳橙粉18重量份，山楂粉22重量份，并按下述方法制备：将原辅料低温干燥后按比例混合，搅拌，得到益生菌组合物；其中，混合时电机转速 15r/min，混合时间为 40min，生产加工过程环境温度控制在25℃以下，湿度控制在60%。